Background and Objective : Chungsangboha-tang (CSBHT) has analgesic, sedative, anti-convulsive and anti-histamine effects, so it alleviates the symptoms of asthma. For the comparison of anti-inflammatory effect(s) on CSBHT, PD098059 was used as a negative control. Materials and Methods : This study emphasized THP-1 cells, which had been well characterized as a human monocytic leukemic cell line. The cells resemble monocytes with respect to several criteria and can be differentiated into macrophage-like cells by treatment with PMA. By using the MTS assay, it was possible to prove the safety of CSBHT. Results : Results shows that the CSBHT did not affected cell survival within $10^{1}$ ng/ml to $10^{5}$ ng/ml. Especially, $10^{5}$ ng/ml CSBHT treated cells show 70% deduction of $TNF-{\alpha}$ gene expression against that of LPS treated group. Furthermore, $IL-1{\beta}$, IL-6, IL-8, IL-10 and $TNF-{\alpha}$ levels are down-regulated when treated with CSBHT with concentrations up to 100 ug/ml on monocyte-derived macrophages. Interestingly, CSBHT-treated samples showed that overall transcriptional activities were down-regulated to 20% of that of PD098059 ($TNF-{\alpha}$ inhibitor). At protein level, the expression of $TNF-{\alpha}$ showed similar results as that of transcriptional activity. Results show that the protein level decreased more in the CSBHT-treated group (487 ${\pm}$ 87 pg/ml) than in the LPS-treated group (703 ${\pm}$ 103 pg/ml). In addition, the protein level of IL-8 in the CSBHT treated-group (9.84 ${\pm}$ 3.28 ng/ml) decreased similar as the expression of the control and PD098059-treated groups. Conclusion : CSBHT affects immune response, especially allergic responses and suppression of inflammatory reaction. The results provide us an alternative way to care for clinical inflammatory diseases, not only asthma but also the other possible general inflammatory and allergic diseases.
This study aimed to investigate the effects of Sesami Semen on the itching and anti-allergic inflammation mechanism related with cytokine, chemokine, histamine, $\beta$-hexosaminidase, NF-$\kappa$B, and free radical, and it was concluded as follows : 1. Sesami Semen did not show any cytotoxicity at the range of con-centration (1-250 ${\mu}g/m\ell$) on the human fibroblast cell (hFCs). 2. Sesami Semen reduced the gene expressions of IL-8, TNF-$\alpha$, IL-6 mRNA comparing with control. 3. Sesami Semen reduced the levels of IL-6, IL-8, MCP-1 within THP-1 cell depending on the concentration, and especially significantly reduced the the levels of IL-6, MCP-1 at all the concentration. 4. Sesami Semen significantly decreased the histamine secretion on HMC-1 at all the concentration. 5. Sesami Semen decreased the $\beta$-Hexosaminidase secretion 6.2% at 10 ${\mu}g$/ml conc., 58.3% at 100 ${\mu}g$/ml conc. and 63.2% at 200 ${\mu}g$/ml conc., respectively. And IC50 (${\mu}g$/ml) was 158.25 ${\mu}g$/ml. 6. Sesami Semen significantly suppressed the activity of NF-$\kappa$B promoter depending on the concentration. 7. Sesami Semen decreased the production of reactive oxygen species (ROS) and DPPH generation depending on the concentration. As judged with above results, the effects of Sesami Semen on the anti-allergic inflamation would be recognized, and it could be applied on the medicinal sources for prevention or treatment of several allergy disease. And more studies are needed furthermore with the seperation of effective materials.
본 연구에서는 고장초 줄기 ethanol 추출물 5종(10, 30, 50, 70, 90% Z. latifolia ethanol extract)에 대한 다양한 효능을 평가하여 원료제조를 위한 추출 조건을 최적화하고자 하였다. Z. latifolia ethanol extracts의 항산화능 평가결과, ethanol의 함량이 증가함에 따라 DPPH 및 ABTS 라디칼에 대한 $RC_{50}$ 값은 감소하여 소거능이 증가함을 확인하였다. Z. latifolia ethanol extracts의 항염증 평가 결과, ethanol의 함량이 증가함에 따라 lipopolysaccharide (LPS)로 처리한 RAW 264.7에서 nitric oxide (NO)의 생성 억제능이 농도의존적으로 증가되는 경향을 확인하였으며, $250{\mu}g/ml$의 농도에서의 NO 생성능 비교 시, 15.69, 14.13, 11.86, 8.64, $10.09{\mu}M$로 70% Z. latifolia ethanol extract에서 가장 높은 NO 억제 활성을 나타냈다. Z. latifolia ethanol extracts의 항알러지 효능을 평가하기 위하여 RBL-2H3 세포를 IgE-항원으로 활성화 시킨 결과, 10% Z. latifolia ethanol extract의 ${\beta}-hexosaminidase$ 방출 억제효과는 나타나지 않았으나, 30% Z. latifolia ethanol extract부터 농도의존적으로 ${\beta}-hexosaminidase$의 방출 억제효과를 확인할 수 있었다. 특히, $100{\mu}g/ml$ 추출물 처리 시 ${\beta}-hexosaminidase$ 방출은 각각 94.20, 57.10, 46.70, 36.38, 27.45%로 90% Z. latifolia ethanol extract의 항알러지 활성이 가장 우수하였다. Z. latifolia ethanol extracts의 미백 효능 평가 결과, ethanol 함량이 증가함에 따라 멜라닌 생성 억제 효과도 증가함을 확인할 수 있었으며, 특히 $500{\mu}g/ml$ 농도의 70%, 90% Z. latifolia ethanol extracts의 멜라닌 생성 억제능은 양성대조군인 arbutin ($250{\mu}M$)과 비슷한 효과를 나타내었다. 본 연구 결과, Z. latifolia ethanol extracts는 세포 독성이 없으며 피부 보호 효능과 관련된 다양한 활성이 우수함을 확인하였다. 이러한 원료 제조 조건에 대한 활성 결과는 향후 피부건강을 위한 기능성 식품 원료 제조를 위한 기초 결과로 활용될 것으로 기대된다.
Objective: In this study, we investigated the protective effect of rhododendron mucronulatum extract (RME) on allergic reactions and inflammation. Methods: The effect of RME was determined using ELISA and RT-PCR in RBL-2H3 mast cells and RAW 264.7 macrophage cells. We determined cell viability, β-hexosaminidase release, and the synthesis of IL-4 and TNF-α in RBL-2H3 cells. In addition, we determined NO from RAW 264.7 and the gene expression of IL-1β, iNOS, IL-6, TNF-α, and IL-10. Results: RME inhibited β-hexosaminidase release and synthesis of IL-4 and TNF-α in RBL-2H3 by the anti-DNP IgE plus DNP-HSA stimulation. In addition, RME inhibited the production of NO and the gene expression of IL-1β, iNOS, IL-6, and TNF-α in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Conclusion: From these results, we concluded that RME possesses anti-allergic activity and anti-inflammatory activity due to the inhibition of mast cells and macrophage function.
Type I allergic reaction and it's related clinical manifestations are known to occur by the effects of various chemical mediators. These chemical mediators are released from circulating basophils and tissue mast cells, which become 'sensitized' through the binding of antigens and antibodies of the IgE type to their cell surface receptors. Efforts to elucidate the mechanism of the release of these mediators, especially that of histamine, have been persued for years. The mechanism is not yet clarified at the present time. Recent reports of hyaluronidase, an enzyme known to be involved in the tissue inflammatory process, as possible participant in type I allergic reaction, initiated this study. Relationships between the hyaluronidase activity and histamine release from the sensitized rat peritoneal mast cells were investigated. Also anti-allergic agents, tranilast and disodium cromoglycate, along with known histamine releasers, morphine and compound 48/80, were used to observe the inhibitory and stimulatory effects of these substances on the hyaluronidase activity as well as histamine release from the rat mast cells. The results obtained are summarized as follows: 1) Hyaluronidase activity and histamine release from sensitiaed rat peritoneal mast cells started to increase on the 4th day of postsensitization. Hyaluronidase activity reached it's peak value on the 7th day of postsensitization and that of histamine release on the 14th day of postsensitization. 2) Hyaluronidase activity and histamine release from sensitized rat peritoneal mast cells, pre-treated with tranilast revealed significant decrease in comparison with those of non-treated cells. 3) Hyaluronidase activity and histamine release from sensitized rat peritoneal mast cells, pre-treated with tranilast, followed by morphine injection, revealed significant increase in comparison with those of tranilast treated cells. 4) In vitro study of hyaluronidase activity and histamine release from un-sensitized rat peritoneal mast cells, using morphine and compound 48/80 as activators, revealed significant increase compared to those of non-activator used cells. 5) In vitro study of hyaluronidase activity and histamine release from un-sensitized rat peritoneal mast cells, pre-treated with tranilast and disodium cromoglycate, using confound 48/80 and morphine as activators revealed significant decrease in comparison with those of tranilast and disodium cromoglycate treated cells. From above results, participation of enzyme hyaluronidase in the process of histamine release from sensitized rat pertioneal mast cells, could be suggested. It was also quite evident that the clinically used anti-allergic agents, tranilast and disodium cromoglycate, have significant inhibitory function on the hyaluronidase activity and histamine release from sensitized rat peritoneal mast cells, while morphine significantly increased the hyaluronidase activity and histamine release from sensitized rat peritoneal mast cells.
This study investigated the effects of mycelia of Lentinus edodes mushroom-cultured Glycyrrihiza radix(LMG) on cancer cell lines and sarcoma 180(S-180), as well as on human mast cells. In an anti-cancer tests using Hep3B(hepatic cancer cell), MCF-7(breast cancer), and HeLa(uterine cancer) cells, LMG extract exhibited greater anti-proliferation effects than Glycyrrihiza glabra(GG) extract. LMG extract multiplication restraining effects were 60% that of ethanol at 3 mg/mL extract also displayed tumor suppressive effects in mice injected with S-180 cells. The growth-inhibition rates against tumor cells were 56% for LMG and 37% for GG. When LMG was added to human mast cells, the Intensity of RT-PCR products using primers($FC{\varepsilon}RI\;c-kit$) decreased. significantly compared with that of control. These results suggest that Lentinus edodes Mushroom-Cultured Glycyrrhiza glabra has an anti-proliferation effects against cancer cell lines(Hep3B, MCF-7 and HeLa) and S-180 tumors and will be also beneficial in treating allergic reactions.
본 연구는 노령목의 산림의 경제적 가치를 증진하고자 밤나무 잎에 함유된 물질의 기능성화장품 원료로의 기능을 규명하여 화장품 산업에 적용하기 위하여 천연소재로써의 이용 가능성을 살펴보았다. 항산화능 측정을 위한 실험으로 DPPH radical 소거능과 ABTS cation radical 소거능을 실시하였으며, 양성 대조군으로는 항산화 작용이 있는 것으로 알려진 BHA를 이용하여 밤잎 추출물의 항산화 효과를 비교하였다. 그 결과 아세톤 추출물의 경우 시료 농도에 따라 DPPH radical 및 ABTS radical 소거 증가 정도가 컸으며, 열수 추출물은 10 ug/ml의 농도에서 50% 이상의 소거활성을 나타내었다. 이러한 결과로 미루어 볼 때 밤잎 추출물은 항산화 작용이 높고 피부에서 흔히 일어나는 활성산소에 대한 노화 방지에 도움이 될 것으로 사료된다. 주름개선 효과 측정으로 elastase 저해활성을 측정한 결과 아세톤과 열수 추출물에서는 그 효과가 없었으나 에탄올 추출물 100 ug/ml에서 64.6%의 우수한 elastase 저해활성을 나타내었으며, collagenase 저해활성을 측정한 결과 3가지 추출물은 100 ug/ml에서 열수 추출물 18.0%, 아세톤 추출물 14.3%, 에탄올 추출물 5.3%의 순으로 collagenase 저해활성능을 나타내었으며, 다른 천연물질을 이용한 연구결과와 비교 시 밤잎 추출물은 주름개선에 우수함을 확인 할 수 있었다. 주름개선 원료로의 이용가치가 있을 것으로 보인다. 이상의 연구 결과로 보아 밤잎은 항산화 및 항노화 효소 활성을 갖는 천연소재로서 주름개선 소재로 활용 될 수 있을 것으로 사료되며, 임삼 효능 평가 등의 계속적인 연구를 통해 기능성 화장품 소재로 개발된 가능성이 매우 높다고 사료된다.
알러지 반응이 일어나면 histamine이 방출되기 때문에 histamine을 정량 측정함으로써 유발된 알러지의 정도를 확인 할 수 있다. 일반적으로는 항원-항체반응으로 microplate reader를 이용하여 흡광도를 측정하여 정량 한다. 본 연구에서는 histamine 방출량을 측정함에 있어서 일반적인 항원-항체반응과 분석 화학적인 방법으로 HPLC-MS를 이용한 방법을 비교하였다. 세포주는 RBL-2H3를 사용하였고, C48/80으로 자극시켜 알러지를 유발하였다. 유발된 알러지는 ${\beta}$-hexosaminidase의 측정으로 탈 과립을 확인하였으며 실험의 정당성을 위하여 세포독성 능을 확인하였다. Histamine 정량에서 항원-항체반응에 의한 측정의 정량한계는 10.257 ppm이었고, HPLC-MS에 의한 정량한계는 0.020 ppm으로 현저한 차이를 보였다. 알러지 활성 및 항 알러지 실험에 있어서 histamine의 측정은 HPLC-MS를 이용한 분석이 더 정밀하고 정확한 실험인 것을 확인하였다.
The worldwide prevalence and severity of allergic diseases including atopic dermatitis and asthma has increased dramatically over the past decade, especially in developed countries. Mast cells are important effector cells in allergic reactions. The purpose of this study was undertaken to investigate the anti-allergic activities of the extract of Duchesnea chrysantha (DCE). DCE was prepared by extracting with 80% ethanol. In the present study, we investigate the effect of DCE on the production of tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, interleukin (IL)-$1{\beta}$, IL-6, IL-8, and histamine in the human mast cell line (HMC-1 cells) and on the scratching behavior in hairless mice. Various concentrations of DCE were treated before the activation of HMC-1 cells with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) plus calcium ionophore A23187. PMA plus A23187 significantly increased TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6, and IL-8 production compared with media control. We also show that the increased cytokines such as TNF-${\alpha}$ IL-$1{\beta}$, IL-6, and IL-8 were significantly inhibited by DCE in a dose-dependent manner. Moreover, DCE inhibited the histamine release from HMC-1 cells stimulated by compound 48/80, which promotes histamine release. Futhermore, the administration of DCE reduced the scratching behavior induced by pruritogen (compound 48/80 or histamine) in hairless mice. These results suggest that DCE has a potential use as a medicinal plant for treatment against allergy-related disease.
He, Shan;Lyu, Fangqiao;Lou, Lixia;Liu, Lu;Li, Songlin;Jakowitsch, Johannes;Ma, Yan
Journal of Ginseng Research
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제45권2호
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pp.273-286
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2021
Background: Prostate carcinoma is the second most common cancer among men worldwide. Developing new therapeutic approaches and diagnostic biomarkers for prostate cancer (PC) is a significant need. The Chinese herbal medicine Panax quinquefolius saponins (PQS) have been reported to show anti-tumor effects. We hypothesized that PQS exhibits anti-cancer activity in human PC cells and we aimed to search for novel biomarkers allowing early diagnosis of PC. Methods: We used the human PC cell line DU145 and the prostate epithelial cell line PNT2 to perform cell viability assays, flow cytometric analysis of the cell cycle, and FACS-based apoptosis assays. Microarray-based gene expression analysis was used to display specific gene expression patterns and to search for novel biomarkers. Western blot and quantitative real-time PCR were performed to demonstrate the expression levels of multiple cancer-related genes. Results: Our data showed that PQS inhibited the viability of DU145 cells and induced cell cycle arrest at the G1 phase. A significant decrease in DU145 cell invasion and migration were observed after 24 h treatment by PQS. PQS up-regulated the expression levels of p21, p53, TMEM79, ACOXL, ETV5, and SPINT1 while it down-regulated the expression levels of bcl2, STAT3, FANCD2, DRD2, and TMPRSS2. Conclusion: PQS promoted cells apoptosis and inhibited the proliferation of DU145 cells, which suggests that PQS may be effective for treating PC. TMEM79 and ACOXL were expressed significantly higher in PNT2 than in DU145 cells and could be novel biomarker candidates for PC diagnosis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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