The influences of temperature and nutritional conditions on the mycelium growth of oyster mushroom Pleurotus ostreatus (PO) and Pleurotus cystidiosus (PC) were investigated in laboratory experiment during the summer season of 2014. The results of the experiment indicated that potato dextrose agar (PDA) and yam dextrose agar (YDA) were the most suitable media for the mycelium growth of oyster mushroom PO while four media (PDA, YDA, sweet potato dextrose agar, and malt extract agar medium) were not significantly different in supporting mycelium growth of oyster mushroom PC. The optimal temperature for mycelium growth of both oyster mushroom species was obtained at $28^{\circ}C$. Mycelium growth of oyster mushroom PO was improved by carbon sources such as glucose, molasses, and at 1~5% sucrose concentration, mycelium colony diameter of mushroom PO was achieved the highest value. Whereas glucose, dextrose, and sucrose as carbon sources gave the good mycelium growth of oyster mushroom PC, and at 1~3% sucrose concentration, mycelium colony diameter of PC was achieved the maximum value. Ammonium chloride concentrations at 0.03~0.09% and 0.03~0.05% also gave the greatest values in mycelium colony diameter of mushroom PO and PC. Brown rice was found to be the most favourable for mycelium growth of two oyster mushroom species. In addition, sugarcane residue, acasia sawdust and corn cob were selected as favourable lignocellulosic substrate sources for mycelium growth of both oyster mushrooms.
In July 2021, wilting symptoms were observed in adult and seedling hemp (Cannabis sativa L. cv. Cherry Blossom) plants grown in a greenhouse. As the disease progressed, yellowing and wilting symptoms on the leaves developed, resulting in whole plant death. In seedling plants, typical damping-off symptoms were observed. To identify the pathogen, the roots of diseased plants were sampled, surface sterilized, and cultured on potato dextrose agar (PDA) media. From the culture, 4 different fungal isolates were recovered and purely cultured. Each fungal isolate showed distinct growth shapes and color development on malt extract agar, oatmeal agar, sabouraud dextrose agar, and PDA media. Microscopic observation and molecular identification using ribosomal DNA internal transcribed spacer sequencing identified them as 3 Fusarium spp. and 1 Thielaviopsis paradoxa. Additional sequencing of elongation factor 1-alpha and b-tubulin regions of 3 Fusarium spp. revealed that 2 of them are Fusarium solani, and the other one is Fusarium proliferatum. To examine which isolate can act as a causal agent of wilt disease of hemp, each isolate was tested for their pathogenicity. In the pathogenicity test, F. solani AMCF1 and AMCF2, and F. proliferatum AMCF3, but not T. paradoxa AMCF4, were able to cause wilting disease in hemp seedlings. Therefore, we report that F. solani AMCF1 and AMCF2, and F. proliferatum AMCF3 as causal agents of Fusarium wilt of hemp plants. To our knowledge, this is the first report of the wilt disease of C. sativa L. caused by Fusarium spp. in Korea.
The effects of media, incubation time, temperature and pH on production of conidia and chlamydospore of Cylindrocarpon destructans (Zinssm.) Scholen causing root rot of Panax ginseng were studied. Microconidia of the pathogen were abundantly produced on V-8 juice agar as a solid substrate with 5.73(log conidia/mm2) and in V-8 broth as a liquid substrate with 6.65 (log conidia/ml) among media tested. No difference was observed on the length of microconidia produced from the media with a range of 9.50∼11.38 $\mu\textrm{m}$. However, tryptic soy agar produced the broadest microconidia (average 5.00 $\mu\textrm{m}$) among the media tested. All the media produced chlamydospores In a range of 1.06∼4.37 (log chlamydospores/mm2) without a significant difference in number, while V-8 juice agar produced the bigger one (18.39 $\mu\textrm{m}$ in diameter) as compared to the tested media. The fungus began to sporulate conidia after three days of incubation and reached maximum at the 8th day. It seemed to be in a stationary phase until 30 days of incubation but was decreased thereafter. Chlamydospore was produced at 4th day after incubation. Maximum production was observed at 8th day and the number seemed to be maintained during the observation period. Both conidia and chlamydospore of the pathogen were able to be spoluated at 10∼25$^{\circ}C$. However, optimum temperatures of conidia and chlamydospore formation were 15∼25$^{\circ}C$ and 10∼20$^{\circ}C$, respectively. C. destrmtans produced conida with an wide range of pH from 3.3 to 8.0 and chlamydospore from 2.8 to 8.0. Number of conidia was increased with an increase of pH up to 4.0. There was no significant difference in the number between 4.0 to 8.0. It seemed to have two optimum pH ranges, 3.3∼4.0 and 7.1∼8.0 for the chlamydospore formation.
Nematode destroying-fungi from ginseng field were isolated and then identified on 2% wateragar and malt extract agar media. 1. Six strains of Arthrobotrys sp. and three strains of Harposporium sp. were isolated and identified. 2. Arthrobotrys sp. formed trapping apparatus when they were cultured with Nematode and appeared to be destroying fungi. 3. Harposporium sp. appeared to be endoparasitic fungi. 4. Both Arthrobotrys sp. and Harposporium sp. were grown well on nutrient agar and malt extract agar.
Proteolytic bacteria were isolated from Myeolchi-jeotgal and Saeu-jeotgal using high-salt-content media and their growths in the media containing 25% NaCl were monitored to draw the role of bacteria in the ripening of jeotgal. The most populous genus in Myeolchi-jeotgal detected on agar media with 15% NaCl was Bacillus and its relatives, while the most populous in Saeu-jeotgal was Staphylococcus. Among the isolates, Virgibacillus halodenitrificans from Myeolchi-jeotgal and Halobacillus trueperi from Saeu-jeotgal showed proteinase activities. The species from Myeolchi-jeotgal showed proteinase activity on the agar media with 8% NaCl were similar to those isolated from the media with 15% NaCl. The dominant of Myeolchi-jeotgal isolated at the 15% NaCl concentration may be involved in the proteolysis. The proteolytic species from Saeu-jeotgal on the agar media with 8% NaCl were the genera Bacillus, Salinicoccus, and Salimicrobium those were not the dominants at 15% NaCl condition. The dominant isolates from Saeu-jeotgal on agar media with 15% NaCl may not be involved in the proteolysis of Saeu-jeotgal. Vb. halodenitrificans and Staphylococcus equorum, the dominant species from Myeolchi-jeotgal and Saeu-jeotgal, showed growths at the nutrient broth containing 25% NaCl. They may play a significant role in the ripening of jeotgal and have a high possibility to be used as the starter.
Ahn, Youngbeom;Lee, Un Jung;Lee, Yong-Jin;LiPuma, John J.;Hussong, David;Marasa, Bernard;Cerniglia, Carl E.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.29
no.10
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pp.1495-1505
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2019
The Burkholderia cepacia complex (BCC) is capable of remaining viable in low-nutrient environments and harsh conditions, posing a contamination risk in non-sterile pharmaceutical products as well as a challenge for detection. To develop optimal recovery methods to detect BCC, three oligotrophic media were evaluated and compared with nutrient media for the recovery of BCC from autoclaved distilled water or antiseptic solutions. Serial dilutions ($10^{-1}$ to $10^{-12}CFU/ml$) of 20 BCC strains were inoculated into autoclaved distilled water and stored at $6^{\circ}C$, $23^{\circ}C$ and $42^{\circ}C$ for 42 days. Six suspensions of Burkholderia cenocepacia were used to inoculate aqueous solutions containing $5{\mu}g/ml$ and $50{\mu}g/ml$ chlorhexidine gluconate (CHX) and $10{\mu}g/ml$ benzalkonium chloride (BZK), and stored at $23^{\circ}C$ for a further 199 days. Nutrient media such as Tryptic Soy Agar (TSA) or Tryptic Soy Broth (TSB), oligotrophic media (1/10 strength TSA or TSB, Reasoner's $2^{nd}$ Agar [R2A] or Reasoner's $2^{nd}$ Broth [R2AB], and 1/3 strength R2A or R2AB) were compared by inoculating these media with BCC from autoclaved distilled water and from antiseptic samples. The recovery of BCC in water or antiseptics was higher in culture broth than on solid media. Oligotrophic medium showed a higher recovery efficiency than TSA or TSB for the detection of 20 BCC samples. Results from multiple comparisons allowed us to directly identify significant differences between TSA or TSB and oligotrophic media. An oligotrophic medium pre-enrichment resuscitation step is offered for the United States Pharmacopeia (USP) proposed compendial test method for BCC detection.
Cordyceps cardinalis was reported in Japan and the USA in 2004, and its fruiting bodies have recently been cultured in Korea. Herbarium specimens preserved at the Cordyceps Research Institute, Mushtech, Korea were revised and identified as C. cardinalis, based on morphological characters and conidial structures. Most of the C. cardinalis specimens were collected from Mt. Halla in Jeju-do. The effects of various nutritional sources and environmental conditions such as temperature and pH on mycelial growth of C. cardinalis were studied. Oatmeal agar, Martin's peptone dextrose agar, and Schizophyllum (mushroom) genetics complete medium plus yeast extract resulted in the best mycelial growth. Among carbon sources, cereals, and nitrogen sources, maltose, oatmeal, and peptone resulted in the best mycelial growth respectively. Mineral salts helped to increase growth rate but only resulted in thin mycelial density, similar to water agar. A temperature of $25^{\circ}C$ and a pH of 7 resulted in the highest mycelial growth. Based on these results, a Cordyceps cardinalis composite medium (CCM) was formulated with 1% maltose, 2% oatmeal, 1% peptone, and 2% agar. Use of the CCM resulted in slightly better mycelial growth than that of other commonly used agar media. Only organic nitrogen sources imparted a reddish pigmentation to the agar media, but this character diminished after several subcultures. A 7 day culture duration resulted in the best mycelial growth.
In this study, performances of culture methods using two selective media and real-time PCR were evaluated for detection of Campylobacter jejuni (C. jejuni) in various food samples. Sausage, ground beef, and radish sprouts inoculated with C. jejuni were enriched in Hunt broth and then streaked onto modified cefoperazone charcoal deoxycholate agar and Preston agar, followed by incubation under microaerobic conditions. The enriched Hunt broth (1 mL) was used in real-time PCR assay. No statistical differences were observed in sensitivity among the two selective media and real-time PCR for sausage and ground beef. However, the number of positives by real-time PCR in radish sprouts was much higher than the two selective media (p<0.05). It appears that real-time PCR could be used as an effective screening tool to detect C. jejuni, particularly in foods with a high number of background microflora such as fresh vegetables.
The selective media including NPC agar, DHL agar, MacConkey agar, and Cetrimide desoxycholate agar were compared to determine selectivity for the growth of bacteria Cetrimide desoxycholate agar was better than NPC agar, DHL agar, and MacConkey agar for the growth of psychrotrophic grarn-negatve bacteria including Pseudomonas. and for the inhibition of gram positive bacteria The specificity of resazurin reduction time test was investigated to determine post-pasteurization contamination of market milk. Equal volume of Cetrimide desoxycholate broth was added to market milk, which was then incubated at $21^{\circ}C$ for 18 hours. The growth of bacteria in the incubated milk was detected in resazurin reduction time test. The results in resazurin reduction time test and total bacteria number count of market milk after storage at $7^{\circ}C$ were relatively correlated each other. Pseudomonas was isolated most frequently from the market milk stored at $7^{\circ}C$ for 10 days, and Acinetobacter and Aeromonas followed. Acinetobacter, Pseudomonas and Enterobacter were frequently isolated from the mixture of market milk and Cetrimide desoxycholate broth incubated at $21^{\circ}C$ for 18hours in resazurin reduction time test.
The isolation and chemical characterization of yellow food pigments from Monascus purpureus were studied according to the compositions of media. Monacus yellow pigments were isolated and purified by solvent fractionation, silicagel column chromatography, TLC and HPLC. The retention time of Monascus yellow pigments isolated by HPLC was respectively 5 min(I) and 9 min(II) as the yeast malt extract agar(YMA) media and was respectively 4.6 min(III), 5 min(I) 5.7 min(IV), 8.3 min(V), 9 min(II) and 10.7 min(Ⅵ) at the malt extract agar(MEA) media. The structure of monascin(I), ankaflavin(II), 6,11-dihydrorubropunctatin(III), 6,11-dihydromonascorubrin(V) and unknown compounds(IV,Ⅵ) was elucidated by EI-Mass, H and C NMR, UV-visible spectrometer. Therefore, it was suggested that 6,11-dihydrorubropunctatin(III) and 6,11-dihydromonascorubrin(V) are new intermediates of Monascus yellow pigments.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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