Cho, Hye Hyun;Kwon, Gye Cheol;Kim, Semi;Koo, Sun Hoe
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제25권7호
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pp.1154-1162
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2015
The emergence of carbapenem resistance among Pseudomonas aeruginosa is an increasing problem in many parts of the world. In particular, metallo-$\beta$-lactamases (MBLs) and AmpC $\beta$lactamases are responsible for high-level resistance to carbapenem and cephalosporin. We studied the diversity and frequency of $\beta$-lactamases and characterized chromosomal AmpC $\beta$lactamase from carbapenem-resistant P. aeruginosa isolates. Sixty-one carbapenem-resistant P. aeruginosa isolates were collected from patients in a tertiary hospital in Daejeon, Korea, from January 2011 to June 2014. Minimum inhibitory concentrations (MICs) of four antimicrobial agents were determined using the agar-dilution method. Polymerase chain reaction and sequencing were used to identify the various $\beta$-lactamase genes, class 1 integrons, and chromosomally encoded and plasmid-mediated ampC genes. In addition, the epidemiological relationship was investigated by multilocus sequence typing. Among 61 carbapenem-resistant P. aeruginosa isolates, 25 isolates (41.0%) were MBL producers. Additionally, 30 isolates producing PDC (Pseudomonas-derived cephalosporinase)-2 were highly resistant to ceftazidime (MIC50 = $256{\mu}g/ml$) and cefepime (MIC50 = $256{\mu}g/ml$). Of all the PDC variants, 25 isolates harboring MBL genes showed high levels of cephalosporin and carbapenem resistance, whereas 36 isolates that did not harbor MBL genes revealed relatively low-level resistance (ceftazidime, p < 0.001; cefepime, p < 0.001; imipenem, p = 0.003; meropenem, p < 0.001). The coexistence of MBLs and AmpC $\beta$-lactamases suggests that these may be important contributing factors for cephalosporin and carbapenem resistance. Therefore, efficient detection and intervention to control drug resistance are necessary to prevent the emergence of P. aeruginosa possessing this combination of $\beta$-lactamases.
This paper deals with the isolation of Salmonella on 3 herds during the period from May 1984 to May 1985. Isolated Salmonella were examined for serotypes, adhesive fimbriae, antibiotic susceptibility and detection of R plasmid. The results were as follows; Of total 1505 cattle, 24 Salmonella were isolated from 18 cattle (1.2%) and their serotypes were S. enteritidis (9 strains), S. derby(4 strains), S. infantis (1 strain), $C_1$ group(8 strains), $C_2$ group(1 strain) and untypable(1 strain). Twelve strains of Salmonella were isolated from 227 cattle with diarrhea and their serotypes were S. enteritidis(4 strains), S. derby(3 strains), S. infantis(1 strain), $C_1$ group(3 strains) and untypable(1 strain). The isolation rate of Salmonella in cattle varied from 1.6 to 0.9% in 3 herds, it was higher in summer and autumn and lower with the age. Of total 24 strains, 23 were adhesive type 1 fimbriae. Antibiotic susceptibility test of Salmonella isolated was performed by the agar dilution method, using 9 antibiotics as follows: ampicillin(Am), chloramphenicol(Cm), gentamicin(Gm), kanamycin(Km), nalidixic acid(Na), rifampicin(Rf), streptomycin(Sm), sulfadimethoxine(Su) and tetracycline(Tc). All the strains tested were susceptible to Am, Cm, Gm, Km, Na, Rf and Tc. Of total 24 strains, 23(95.8%) were resistant to Su and 14(58.3%) to Sm. Of the 23 resistant Salmonella strains, all the strains were found to carry R plasmid. Among them, two strains which had the R plasmid conferring SmSu resistance was transferable at $25^{\circ}C$ only.
One hundred and sixty nine Escherichia (E.) coli strains isolated from fecal samples of aquatic birds in Geumho river basin and Dalseong park were tested by agar dilution method to determine their susceptibility patterns to 14 antimicrobial agents. The distribution of tetracycline resistance determinants (tetA, tetB, tetC, tetD and tetE) were also examined by PCR in 76 tetracycline-resistant ($TC^r$) E. coli isolates. The high resistance was observed in tetracycline, cephalothin and ampicillin (45.0~36.7%). Resistance of E. coli isolates derived from Dalseong park to tetracycline, cephalothin, ampicillin and streptomycin (65.7~44.8%) were significantly higher than those isolated from Geumho river basin (31.4~14.7%). About seventy percent (70.4%) of the strains isolated were resistant to one or more drugs tested. Thirty (39.5%) of 76 $TC^r$ E. coli isolates which were resistant to one or more drugs transferred all or a part of their resistance patterns to the recipient strain of E.coli J53 by conjugation. All of $TC^r$ E. coli isolates contained at least one or more of 5 tet genes examined. The most common genes found in these isolates were tetA (60.6%) and followed by tetB (7.9%) and tetC (1.3%). However, tetD and tetE were not found in any of the isolates tested. Twenty one (27.6%) of $TC^r$ E. coli isolates had two determinants, tetA/tetB (20 strains), tetA/tetC (1 strain). And two strains (2.6%) contained three determinants (tetA/tetB/tetC).
Kim, Jae Cheol;Pluske, John R.;Yoo, Jaehong;Heo, Jung Min
농업과학연구
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제41권2호
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pp.135-139
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2014
Pathogenic E. coli associated post-weaning diarrhea (PWD) and edema disease are common diseases in commercially-housed weanling pigs. An enterotoxigenic E. coli (ETEC) oral challenge model has been used to mimic the physiological responses observed in commercial conditions. However, an oral challenge procedure has two major limitations: (1) the ETEC cell density is unknown at the point of oral inoculation, and (2) blending ETEC with traditional TSB (trypticase soy broth) is not palatable and hence decreases acceptability by piglets. Therefore, the purposes of this study were to (1) establish a regression equation that can be used for estimation of ETEC concentration in dilution media using the spectrophotometric measurement of cell density; and (2) examine survival of ETEC after blending either with TSB, sweetener or dextrose. A strain of ETEC (serogroup beta-hemolytic E. coli O149; K91; F4; toxins LT, STa, STb) was grown in TSB for 3.5 hours, centrifuged, the supernatant was discarded, and the ETEC pellet was then blended either with TSB (100 mL), sweetener (60 mL TSB + 40 mL fruit flavored concentrate), or dextrose (50 mL TSB + 50 mL dextrose; 0.5g/mL dextrose). Cell density was measured using the colorimetric method and also plated on a 5% sheep blood agar for counting of ETEC colony forming units at 0, 5, 35, 65 and 125 min after blending. The optical density at 600 nm explained 83% of ETEC colony forming units, indicating that the established linear equation (y= 6E+08x - 4E+07, P<0.004) can be used for robust quantification of ETEC cell density in TSB, sweetener and dextrose media. When ETEC was blended with sweetener and dextrose, survival of ETEC was decreased by 45% and 72% within 5 min post-blending. Therefore, further research is required to find out the suitable medium that has potential to improve palatability without compromising survival of ETEC.
The aim of this study was to evaluate the anti-helicobacter activity of the ethanol extract of Sohamhyoongtang (Coptidis Rhizoma, Pinelliae Tuber and Trichosanthis Semen) and Coptidis Rhizoma total alkaloids, which is one of the components of Sohamhyoongtang. Crude ethanol extract of Sohamhyoongtang (ESHHT) and Coptidis Rhizoma total alkaloids (CRTA) were used for this experiment. Five different types of H. pylori (including H. pylori 26695) were used as test strain. To determine anti-helicobacter activity, minimum inhibitory concentration (MIC) was determined by agar dilution method. The effect of ESHHT and CRTA on the gene expression of H. pylori was investigated by quantitative realtime-PCR (qRT-PCR). MICs of ESHHT against five H. pylori strains were $250{\sim}500{\mu}g/ml$ and MICs of CRTA against five H. pylori strains were $50{\sim}200{\mu}g/ml$. Four representative virulence genes of H. pylori, cagA, ureA, ureB and ureI were tested as target genes for qRT-PCR. According to the qRT-PCR results, both ESHHT and CRTA markedly repressed the expression of cagA gene of H. pylori 26695 (6.91 and 20 folds respecively). These results showed that the ESHHT and CRTA demonstrated antihelicobacter properties, suggesting their potential use in gastritis or duodenal ulcer.
The sensitivities of 270 pathogens (124 Streptococci, 118 Staphylococci, 10 Corynebacterium pyogenes and 18 Escherichia coli) isolated from clinical or subclinical cases of bovine mastitis during lactation to 11 antibiotics were determined by the agar plate dilution method. All cultures of Streptococci were inhibited at $1.56{\mu}g/ml$ of ampicillin and 1.56 units/ml of penicillin G. Most of the cultures were inhibited at $3.125{\mu}g/ml$ of leukomycin, but were resistant to kanamycin, streptomycin, chloramphenicol, erythromycin and colistin at concentration of $12.5{\mu}g/ml$. More than 93% of the Staphlococcal cultures were sensitive to kanamycin, leukomycin, ampicillin, tetracycline, ledermycin and minocycline at concentrations of $12.5{\mu}g/ml$ or less, and sensitive to penicillin at concentration of 3.125 units/ml, but for more than 71% of the cultures to chloramphenicol, erythromycin and colistin the concentrations required to inhibit growth were 100 ${\mu}g/ml$ or higher. All 10 cultures of Corynebacterium pyogenes were inhibited by leucomycin, ampicillin and minocycline at concentration of $1.56{\mu}g/ml$ and by penicillin G at concentration of 0.78 units/ml, but all the cultures required at least $400{\mu}g/ml$ or higher of streptomycin, erythromycin and colistin for inhibition. More than 83% of E. coli cultures were sensitive to erythromycin and minocycline at concentration of $12.5{\mu}g/ml$, but resistant to leucomycin and chloramphenicol at concentration of $100{\mu}g/ml$.
적리를 동반하는 돼지 분변에서 용혈성 균주를 분리 동정한 후, 장 독소 생성 유 무 및 항생제 감수성 시험을 수행하였다. 분리된 용혈성 균주 B. cereus BY06의 gyrB 유전자 염기서열을 분석한 결과, B. cereus와 99% 유사성을 나타내었다. PCR법에 의한 장 독소 유전자 검출 시험에서 B. cereus BY06는 장 독소 분비 양성으로 판정됨에 따라 설사형 식중독 균임이 확인되었다. B. cereus BY06를 이용한 항균제의 감수성 시험 결과, penicillin G에는 내성을 나타낸 반면 cephalothin, vancomycin, clindamycin, fusidic acid, gentamicin, ciprofloxacin, tetracycline 및 rifampin에 대하여 감수성을 나타냈다. 본 연구를 통해 돼지 분변에서 분리된 B. cereus 균주는 설사를 유발하는 장 독소를 분비하며, penicillin G에 대한 내성을 확인하였다.
A total of 141 strains of Streptococcus mutans were isolated from dental plaques of 153 subjects. Eighty-two children with caries-experience, 18 caries-free children and their mothers were participated. All isolates were examined for their serotypes by immunodiffusion method with 7 reference sera and their antibiotic susceptibilities to 7 antibiotics by agar dilution method using 7 kinds of antibiotics, and were compared their results by caries experience (DMFT ratio) and by intrafamilial levels. 1. Isolation rate of Streptococcus mutans were greater in samples of carious teeth than those of sound teeth, and in mothers than in children. 2. Multiple serotypes of Streptococcus mutans were occasionally found in a single samples. 3. Of the total 141 isolates (83 isolates from children, and 58 from their mothers), type c isolates were most prevalent (63.8%). Type d,e and f were found, comprizing 14.9%, 10.6% and 6.4% respectively. Serotype g, a and untypable strain were also found but far lower frequencies (2.8-0.7%), and type b was detected. 4. These results suggest that there are no significant correlation among the distribution of serotypes, antibiotic susceptibilities, caries experience and intrafamilial relationships. 5. Most of isolates were susceptible to chloramphenicol (100%), penicillin (95.7%), ampicillin (94.3%), and gentamicin (92.2%), but about one-third isolates were resistant to cephaloridine (27%), streptomycin (33.3%) and kanamycin (47.6%), resulting that 91 strains (64.5%) among 141 isolates were resistant to one or more drugs used. 6. Of the 91 resistant strains, 20 different resistant patterns were observed, and the most frequently encountered patterns were KM, SM and CE.
Three-hundred and sixteen Escherichia coli strains from seawater, and a variety of farmed fishes, including oliver flounder (Paralichthys olivaceus), black rock fish (Sebastes schlegeli), red sea bream (Pagrus major) and sea bass (Lateolabrax japonicus) between May to October in 2004, were tested by agar dilution method to determine their susceptibility patterns to 17 antimicrobial agents. Overall, 92.1% of Escherichia coli isolates from samples showed antimicrobial resistance to at least one antimicrobial agent and the multiple resistance was seen in 173 isolates (54.7%). The resistance of E. coli isolates to tetracycline (74.1%) was highest, followed by cephalothin (69.9%), doxycycline (66.5%), streptomycin (47.2%), ampicillin (46.2%), cefazolin (31.6%), enrofloxacin (31.0%). norfloxacin (28.2%). The most frequent resistance pattern was TE-D-CF-CIP-ENO-NOR-AM-S-C-SXT-AmC-CZ (14.7%), followed by CF (6.2%), TE (5.1%), TE-CF (4.5%) in 177 isolates from fishes and TE-D-CF (7.2%) followed by TE-D-CF-S (5.8%), CF and TE-D-S (3.6%) in 139 isolates from seawater.
Methicillin-resistant staphylococci를 신속하게 검출하기 위한 방법으로 mecA polymerase chain reaction을 이용하고 결과를 항생제 감수성 검사와 비교하였다. 국내 병원에 입원중인 환자와 종사자로부터 총 43개의 staphylococci를 분리하여 항생제 감수성 시험을 실시한 결과, 43균주 중 methicillin 내성 균주(MRS)는 39 균주, 감수성 균주(MSS)는 4균주이었다. PCR시험결과, methicillin 내성 균주에서는 MRSC (methicillin-resistant Staphylococcus cohnii), 1 균주(HRC2-4)를 제외하고 mecA 유전자에 해당하는 533bp의 절편이 중폭되었다. 한편, methicillin 감수성으로 분류된 MSSA (methicillin-susceptable Staphylococcus aureus), 1 균주(HSA1-10)에서도 mecA 유전자가 중폭되어 항생제 감수성과 상반된 결과를 보였다. 모든 MSSA는 mecA 양성을나타내었으나, 전체적으로 mecA 유전자의 유무는 항생제 감수성 검사와 95.6%의 일치를 나타냈다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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