Objectives : Traditional medicines isolated from natural products often have positive effects in the prevention and healing of various immune disorders, such as allergy and atopic inflammation. Scrophulariae Radix (SR) been used in oriental medicine used for treatment of acute and chronic inflammatory diseases. Mast cells are known to play important roles in the initiation of allergic reactions. In this study, we investigated the effects of SR ethanol extract on inflammatory responses in IgE-stimulated RBL-2H3 mast cells. Methods : Rat basophilic leukemia RBL-2H3 cells were purchased from Korean Cell Line Bank (KCLB No. 22256). Cell viability was measured by MTT assay. Assays for ${\beta}-Hexosaminidase$ Secretion : RBL-2H3 cells were sensitized with dinitrophenyl-ImmunoglobulinE (DNP IgE). The next antigen DNP-BSA ($25ng/m{\ell}$) was added for 10 minutes and the reaction was terminated after 5 minutes in the ice bath. To determine ${\beta}-Hexosaminidase$ release, supernatants were aliquoted into 96-well plates. Samples were mixed with substrate solution and incubated for 1 h at $37^{\circ}C$. Absorbance was measured with a spectrophotometer at 405 nm. IL-4 and tumor necrosis $factor-{\alpha}$($TNF-{\alpha}$) concentrations in cell culture supernatants were measured using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits. Results : The cytotoxicity of SRE in RBL-2H3 cells was less than 5%. SRE inhibited DNP-IgE-imduced degranulation of mast cells in RBL-2H3 cells. Also significantly decreased the levels of inflammatory cytokine, IL-4 and TNF-alpha. In this study, the SRE showed potential anti-allergic and antiinflammatory. Conclusions : These results indicate that SRE could be inhibit the allergic response through suppressing the mast cell activation.
Aster Yomena (AY) has been used in traditional medicine to treat diseases such as obesity, hyperlipidemia, atherosclerosis, diabetes and osteoarthritis. However, protective effect of AY on acute pancreatitis (AP) has not been reported. The present study examined the anti-inflammatory effects of an ethanol extract of AY on cerulein-induced AP. AP was induced in mice by intraperitoneally injecting cerulein ($50{\mu}g/kg$) hourly for 6 times. 70% ethanol extract of AY (0.1, 0.2, and 0.5 g/kg) was orally administered for 1 week before acute pancreatitis induction. The mouse was killed at 6 hours after the final cerulein injection. The pancreas and lung were rapidly removed for histological examination and myeloperoxidase (MPO) assay. Blood samples were taken to determine serum amylase and lipase activity. In addition real-time reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was also performed to investigate mRNA expression of proinflammatory cytokines such as $TNF-{\alpha}$. $IL-1{\beta}$, and IL-6. Administration of AY significantly ameliorated pancreatic weight to body weight ratio, histological damages and MPO activity during AP. In addition, AY inhibited the serum amylase and lipase activity during AP. Also, mRNA expression of $TNF-{\alpha}$, $IL-1{\beta}$ and IL-6 were inhibited by AY against AP. Our results revealed that pre-treatment of AY reduces the severity of cerulein-induced AP. Therefore, AY may have a protective effect drug against AP.
To investigate effects of Achyranthis Radix herbal-acupuncture on adjuvant arthritis in rats, the edema rate, the number of WBC, the quantity of total protein, albumin and globuline in the blood serum and histological test of the muscular tissue were measured in the arthritis part. 1. After elicitating arthritis of Sprague dawley(SD) rats by injection of Freund's complete adjuvant for 2 weeks, normal saline was injected for the Exp. I group and Achyranthis Radix herbal-acupuncture was injected for the Exp. II group during 30days. Selected point was $D\acute{u}b\acute{i}(ST_{35})$ in both the groups. And then the volume of the paw were checked. The volume of the paw was $0.84{\pm}0.14mm$ in the Exp. I group and $0.47{\pm}0.11mm$ in the Exp.II group, the swelling of the paw was restricted significantly in the Exp. II group(p<0.05). 2. The number of WBC was $10.34{\pm}0.14(10^3/ml)$ in the normal group and $37.47{\pm}5.46(10^3/ml)$ in the Exp. I group. It was $21.24{\pm}2.58(10^3/ml)$ in the Exp. II group. This fact showed that the group Exp. II with Achyranthis Radix herbal-acupuncture was more effective than the Exp. II group in the treatment of arthritis(p<0.05). 3. The content of the total protein in the blood serum was $6.14{\pm}0.43g/dl$ in the normal group, $7.95{\pm}0.94g/dl$ in the Exp. I group, and $6.41{\pm}0.68g/dl$ in the Exp. II group. There was no significance in total protein between the Exp. II group and the Exp. I group from the statistical analysis. 4. The content of albumin in the blood serum was $2.94{\pm}0.13g/dl$ in the normal group, $2.01{\pm}0.48g/dl$ in Chang Tong-young the Exp. I group and $3.15{\pm}0.27g/dl$ in the Exp. II group. This fact showed that the Exp. II group had significant increase in the serum albumin from the statistical analysis compared with the Exp. I group. 5. The content of the globulin in the blood serum was $3.19{\pm}0.48g/dl$ in the normal group, $4.70{\pm}1.26g/dl$ in the Exp. I group and $3.26{\pm}0.57g/dl$ in the Exp. II group. There was no significance in the serum globulin between the Exp. II group and Exp. I group from the statistical analysis. 6. In histological finding, because of severe inflammatory reaction, remarkably irregular tissue and large amount of inflammatory cells were found in the Exp. I group. But the Exp. II group showed small amount of inflammatory cells, the refrained inflammatory state and even recovering state.
Sepsis is an acute inflammatory response that leads to life-threatening complications if not quickly and adequately treated. Cytolysin, hemolysin, and pneumolysin are toxins produced by gram-positive bacteria and are responsible for resistance to antimicrobial drugs, cause virulence and lead to sepsis. This work assessed the effects of aloe-emodin (AE) and photodynamic therapy (PDT) on sepsis-associated gram-positive bacterial toxins. Standard and antibiotic-resistant Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, and Streptococcus pneumonia bacterial strains were cultured in the dark with varying AE concentrations and later irradiated with 72 J/cm-2 light. Colony and biofilm formation was determined. CCK-8, Griess reagent reaction, and ELISA assays were done on bacteria-infected RAW264.7 cells to determine the cell viability, NO, and IL-1β and IL-6 pro-inflammatory cytokines responses, respectively. Hemolysis and western blot assays were done to determine the effect of treatment on hemolysis activity and sepsis-associated toxins expressions. AE-mediated PDT reduced bacterial survival in a dose-dependent manner with 32 ㎍/ml of AE almost eliminating their survival. Cell proliferation, NO, IL-1β, and IL-6 cytokines production were also significantly downregulated. Further, the hemolytic activities and expressions of cytolysin, hemolysin, and pneumolysin were significantly reduced following AE-mediated PDT. In conclusion, combined use of AE and light (435 ± 10 nm) inactivates MRSA, S. aureus (ATCC 29213), S. pneumoniae (ATCC 49619), MDR-S. pneumoniae, E. faecalis (ATCC 29212), and VRE (ATCC 51299) in an AE-dose dependent manner. AE and light are also effective in reducing biofilm formations, suppressing pro-inflammatory cytokines, hemolytic activities, and inhibiting the expressions of toxins that cause sepsis.
Background: Peste des petits ruminants (PPR), caused by the PPR virus (PPRV), is an acute and fatal contagious disease that mainly infects goats, sheep, and other artiodactyls. Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) are considered the primary innate immune cells. Objectives: PBMCs derived from goats were infected with PPRV and analyzed to detect the relationship between PPRV replication and apoptosis or the inflammatory response. Methods: Quantitative real-time polymerase chain reaction was used to identify PPRV replication and cytokines expression. Flow cytometry was conducted to detect apoptosis and the differentiation of CD4+ and CD8+ T cells after PPRV infection. Results: PPRV stimulated the differentiation of CD4+ and CD8+ T cells. In addition, PPRV induced apoptosis in goat PBMCs. Furthermore, apoptosis and the inflammatory response induced by PPRV could be suppressed by Z-VAD-FMK and Z-YVAD-FMK, respectively. Moreover, the virus titer of PPRV was attenuated by inhibiting caspase-1-dependent apoptosis and inflammation. Conclusions: This study showed that apoptosis and the inflammatory response play an essential role in PPR viral replication in vitro, providing a new mechanism related to the cell host response.
Recently epidemiologic studies have indicated that the patients with periodontitis may have increased risk of ischemic cardiovascular events, and have suggested the important roles of blood cytokines and acute reactant proteins in the systemic infection and inflammatory response. Periodontitis and coronary heart disease (CHD) may share the common risk factors and the genetic mechanism associated with interleukin(IL)-1A, B and RA genotype may be involved in the production of IL-1. This study was aimed to investigate the relationship between angiographically defined CHD and periodontitis as chronic Gram-negative bacterial infection and to determine whether the IL-1 gene polymorphism is associated in both diseases. Patients under the age of 60 who had undergone diagnostic coronary angiography were enrolled in this study. Subjects were classified as positive CHD (+CHD, n=37) with coronary artery stenosis more than 50% in at least one of major epicardial arteries, and negative CHD (-CHD, n=30) without significant stenosis. After recording the number of missing teeth, periodontal disease severity was measured by means of plaque index (PI), gingival index (GI), bleeding on probing (BOP), probing depth (PD), clinical attachment level (CAL), and radiographic bone loss around all remaining teeth. Gingival crevicular fluid (GCF) was collected from the 4 deepest periodontal pockets and assessed for cytokine ($IL-1{\beta}$, IL-6, IL-1ra, tumor necrosis $factor-{\alpha}$, and prostaglandin $E_2$). Additionally, blood CHD markers, lipid profile, and blood cytokines were analyzed. IL-1 gene cluster genotyping was performed by polymerase chain reaction and enzyme restriction using genomic DNA from buccal swab, and allele 2 frequencies of IL-1A(+4845), IL-1B(+3954), IL-B(-511), and IL-1RA(intron 2) were compared between groups. Even though there was no significant difference in the periodontal parameters between 2 groups, GCF level of $PGE_2$ was significantly higher in the +CHD group(p<0.05). Correlation analysis showed the positive relationship among PD, CAL and coronary artery stenosis(%) and blood $PGE_2$. There was also significant positive relationship between the periodontal parameters (PI, PD, CAL) and the blood CHD markers (leukocyte count, C-reactive protein, and lactic dehyrogenase). IL-1 gene genotyping showed that IL-1A(+3954) allele 2 frequency was significantly higher in the +CHD group compared with the -CHD group (15% vs. 3.3%, OR 5.118,p=0.043). These results suggested that periodontal inflammation is related to systemic blood cytokine and CHD markers, and contributes to cardiovascular disease via systemic inflammatory reaction. IL-1 gene polymorphism might have an influence on periodontal and coronary heart diseases in Korean patients.
출생 후 건강하게 지내던 중 생후 9일째 급성 복증 및 장 폐쇄의 증상으로 내원한 남아에서 시험적 개복술 시행하여, Meckel 게실 천공과 장 유착을 발견하고 수술적으로 제거한 후 회복된 증례이다. 병리 소견상 경한 게실 염과 정상 장 점막 소견을 보여 자발적 Meckel 게실 천공이라고 추정 되는 증례이다. 신생아시기에 자발적 Meckel 게실 천공은 매우 드물지만 심각한 질환이다. 따라서 신생아 시기에 급성 복증 증상을 보일 때 반드시 감별 진단 목록에 Meckel 게실을 포함시켜야만 한다.
Background: The treatment of acute kidney injury (AKI), a common disease in dogs, is limited. Therefore, an effective method to prevent AKI in veterinary clinics is particularly crucial. Objectives: Hydrogen sulfide (H2S) is the third gaseous signal molecule involved in various physiological functions of the body. The present study investigated the effect of H2S on cisplatin-induced AKI and the involved mechanisms in dogs. Methods: Cisplatin-injected dogs developed AKI symptoms as indicated by renal dysfunction and pathological changes. In the H2S-treated group, 50 mM sodium hydrosulfide (NaHS) solution was injected at 1 mg/kg/h for 30 min before cisplatin injection. After 72 h, tissue and blood samples were collected immediately. We performed biochemical tests, optical microscopy studies, analysis with test kits, quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction, and western blot analysis. Results: The study results demonstrated that cisplatin injection increased necroptosis and regulated the corresponding protein expression of receptor interacting protein kinase (RIPK) 1, RIPK3, and poly ADP-ribose polymerase 1; furthermore, it activated the expressions of inflammatory factors, including tumor necrosis factor-alpha, nuclear factor kappa B, and interleukin-1β, in canine kidney tissues. Moreover, cisplatin triggered oxidative stress and affected energy metabolism. Conversely, an injection of NaHS solution considerably reduced the aforementioned changes. Conclusions: In conclusion, H2S protects the kidney from cisplatin-induced AKI through the mitigation of necroptosis and inflammation. These findings provide new and valuable clues for the treatment of canine AKI and are of great significance for AKI prevention in veterinary clinics.
In this study lactating female rabbits and strains of coliforms previously isolated from the cases of acute and chronic mastitis in dairy cattle were employed. The pathological changes were observed on the mastitis experimentally induced with the coliform strains and the mamary glands after infusions of E. coli suspension together with dexamethasone, dextran iron or transferrin were grossly and microscopically observed. From the results reported, the following points are concluded. In the bacterial suspension-infused groups by E. coli, K. pneumoniae and Ent. aerogenes, respectively, the affected quarters of udder showed grossly swelling, hyperemia, hemorrhage, focal necrosis and firmness. The microscopic findings of early stage of the mastitis were appearance of large numbers of heterophils in the glandular lumina and ducts accompanied by degeneration, necrosis and desquamation of epithelial cells and also infiltration of heterophils, hemorrhage and edema in the interstitial tissue and destruction of alveoli. Later, proliferation of fibroblasts, plasma cells, lymphocytes, eosinophils and macrophages appeared in the glandular tissue and with these cells necrotic foci of glandular tissue were surrounded by highly proliferated connective tissue. In addition, granulomatous inflammatory changes could be observed in the glandular tissue from the 7th day after infusion. The difference of the inflammatory response among the groups did not recognized. In the groups infused with dexamethasone and E. coli suspension the inflammatory response was slighter at the inflammatory change with alveolar destruction and hemorrhage was more rapid and severer than E. coli alone. Also in the groups infused with dextran iron and E. coli suspension the inflammatory change was more rapid and severer than E. coli alone and the histological changes were not recognized in the groups infused with dextran iron alone. Reaction of the iron staining was diffusely strong positive within the glandular alveolar lumina in the groups of dextran iron alone, hut was slightly positive toward epithelial cells in the groups of dextran iron and E. coli infusion. In the group infused with transferrin and E. coli suspension, the inflammatory response was tighter, but the peroxidase activity of the heterophils in the glandular lumina was more or less stronger than E. coli alone.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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