A phytase gene was identified in a publicly available metagenome derived from subsurface groundwater, which was deduced to encode for a protein of the histidine acid phosphatase (HAP) family. The nucleotide sequence of the phytase gene was chemically synthesized and cloned, in order to further overexpress the phytase in Escherichia coli. Purified protein of the recombinant phytase demonstrated an activity for phytic acid of 298 ± 17 µmol P/min/mg, at the pH optimum of 2.0 with the temperature of 37℃. Interestingly, the pH optimum of this phytase is much lower in comparison with most HAP phytases known to date. It suggests that the phytase could possess improved adaptability to the low pH condition caused by the gastric acid in livestock and poultry stomachs.
A column bioleaching experiment at room temperature with no addition of sulfuric acid was effectively carried out to leach the valuable elements from pyrite, which is common mine waste. The Fe concentration of pyrite leachate from bioleaching column was 14 times higher than that of the control leachate, and secondary minerals were not formed. The $SO_4^{2-}$ concentration of the pyrite leachate was 2.99 times higher. The XRD intensity of the (111), (200), (220), (311), (222), (230) and (321) planes of pyrite decreased, whereas the intensity of (210) and (211) increased after column bioleaching.
A bacterial strain PN33 producing large amounts of extracellular pectin lyase (PNL, EC 4.2.2.10) was isolated from soil. The isolated bacterium was identified as a strain of Bacillus sp. Production of PNL by the strain was induced only by pectins, with a higher degree of esterification, which had been added to the culture medium as a sole carbon source. The optimal medium for PNL production was determined to consist of 10 g pectin, 2 g yeast extract, 4 g $K_2HPO_4{\cdot}3H_2O$, 0.6 g $MgSO_4$, and 0.11 g $CaCl_2$ per liter (pH 7.0). The PNL activity in the culture supernatant reached the highest level of 132 mU/ml after 32 h cultivation at $37^{\circ}C$ in the optimal medium. The PNL produced was purified to homogeneity by ammonium sulfate fractionation (50~80%), and cation exchange and size exclusion chromatographies. The molecular mass of the enzyme was estimated to be approximately 52 kDa by SDS-PAGE. Almost the same mass was determined by nondenaturing PAGE, indicating that the functional enzyme had a monomeric structure. As expected, the PNL exhibited higher activities on the highly esterified pectins whereas it gave no detectable activity on polygalacturonic acid. The enzyme showed the highest activity at the acidic pH of 6.0, exceptional for a bacterial PNL. Maximum activity was measured at $40^{\circ}C$, although the stability f the purified enzyme was poor at this temperature. alcium (1 mM) was found to activate the PNL activity by $50\%$, and also remarkably increased the thermal stability f the enzyme. Phenylmethylsulfonylfluoride (PMSF) and iethylpyrocarbonate (DEPC) inhibited the PNL activity lmost completely at the concentration of 5 mM. This result ndicates that some serine and histidine residues of the nzyme may play an essential role for catalytic function of he enzyme.
The oogenesis of the Microphysogobio yaluensis was investigated using light microscopy. Various developmental oocytes appeared in the ovary of the M. yaluensis. The oogenesis is largely divided into four stages: nuclear-chromatin stage, peri-nucleoli stage, vitellogenesis (yolk vesicle and yolk granule stages), and mature stage. The nuclear-chromatin is distributed in a large germinal vesicle as threads. The peri-nucleoli stage has many acidic nucleoli lining at the inner side of the nuclear membrane and an egg envelope just weakly starts. As the oogenesis gradually proceeds, they change to the vitellogenesis stage. The oocyte become to drastically increase and the marginal area of the ooplasm is covered with many vacuoles showing no negative reactions with hematoxylin and eosin staining, called the yolk vesicle stage. Many yolk vesicles-owned oocyte largely increase and as the development continues, its ooplasm is changed from the yolk vesicles to the yolk granules of eosinophilic. At the mature stage, lots of granules merged into a big yolk mass, acidophilic. Even at the mature stage, the egg envelope was still thin between the ooplasm and the follicular layer of the oocyte.
Kim, Hyejin;Kim, Hyeon Jin;Kim, Young Sook;Lee, Jung Sick
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.53
no.1
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pp.90-97
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2020
The purpose of this study was to provide basic information on sexual maturity and reproductive biology for the management of biological resources in abalone Haliotis discus hannai. The nucleus of the oogonium occupied about 42% of the cytoplasm, and had a distinctive basophilic chromatin. The cytoplasm of previtellogenic oocytes was homogeneous and the size of nuclear pores increased. Fine granular and vacuolar yolk granules were observed in the cytoplasm of the initial vitellogenic oocyte. In this stage, the egg stalk and jelly membrane began to develop. The nucleus of the active vitellogenic oocyte was located near the animal pole. Yolk granules were strongly acidophilic. Lampbrush chromosomes were observed in the nucleus and rough endoplasmic reticulum. Annulate lamellae developed in the cytoplasm. The shape of the ripe oocyte was rounded polygonal. The size of ripe oocytes was 202.9±21.40×142.1±18.82 ㎛ and the thickness of the jelly membrane was 10.1±1.52 ㎛. These results show that yolk accumulation in H. discus hannai is based on two methods: exogenous accumulation, through the egg stalk, and endogenous accumulation, through intracellular organelles. Management of biological resources will be necessary when oocytes predominate after the active vitellogenic stage.
This study was carried out to investigate the preventive and therapeutic effect of Panax ginseng water extract (PG-WE) on the toxicity induced by 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD), one of the most notorious toxic environmental pollutants belonging to the group of polyhalogenated aromatic hydrocarbons. Normal control (NC) group guinea pigs (180~200 g) received vehicle and saline, and TCDD-treated (TT) group was given TCDD and saline. P100 and P200 group animals received PG-WE for 28 days since 1 week before TCDD exposure at daily doses of 100 mg/kg b.w. and/or 200 mg/kg b.w., respectively. C100 and C200 group received PG-WE for 14 days starting 1 week after TCDD-exposure. Toxicity was induced by a single intraperitoneal injection of TCDD (1 $\mu\textrm{g}$/kg b.w.). Abnormal increase in AST and ALT activities in TT group was significantly improved by the administration of PC-WE. Microscopically, there were mild to moderate swelling of hepatocytes, hyperchromatism of individual cells, acidophilic cytoplasm and cytoplasm vacuolation of some hepatocytes, slight to moderate variations of staining density, occasional single cell necrosis, variable size and shape of some hepatocytes, small groups of degenerating hepatocytes surrounded by mononuclear cells, dilated sinusoids of centrilobular zone and some loss of lobular architecture in TT group liver. From these results, we could find the protective and therapeutic role of PG-WE in TCDD-induced liver toxicity by examining the blood chemical parameters and histopathological observation.
An abattoir study on the abdominal fat necrosis in adult cattle was performed pathologically. Grossly, masses of fat necrosis were leekgreen in colour, lobulated on the cut surface, and saponificated in the texture. These necrotic adipose tissues infiltrated usually into neighboring parenchymal organs including intestines and pancreas, leading to fibrosis or atrophy of them. Histopathologically, necrotic fat cells contained acidophilic, opaque, amorphous substance or basophilic fibrillar or granular minerals in their cytoplasms. The lesions of fat necrosis were divided by fibroconnective tissue. With increase of the severity, necrotic fat cells fused each other and then formed fat cysts. In this severe lesion, necrotic fat cells were partialy or completely replaced by macrophages. Multinucleated giant cells were scattered in this lesion. Interestingly, small artery in the lesion of fat necrosis revealed severe thickening of internal elastic membrane. Severe fibrosis was observed in or between the outer longitudinal and inner circular muscular externas causing segregation, degeneration and necrosis of muscle fibers. The nerve cells of Auerbach's and Meissner's plexuses surrounded by fibrosis were degenerated or necrotic. In addition, necrotic fat cells infiltrated into the pancreas, resulting in pancreas atrophy. From these results, it is speculated that fat necrosis might compromise intestinal movement due to necrosis of muscular externa and ganglion cells of Auerbach's and Meissner's plexuses.
Kim, K.W.;Choe, K.O.;Park, C.Y.;Lee, H.;Son, H.Y.;Huh, K.B.;Ryu, K.J.
The Korean Journal of Nuclear Medicine
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v.13
no.1_2
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pp.37-43
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1979
This is an analysis of 39 patients studied at the Yonsei Medical Center from January, 1976 to March 1979. Of these35 patient were suspected of having hypothalamic insufficiency and subjected to the L-Dopa stimulation test to observe growth hormone sceretory function while four acromegaly patient received the glucose loading test and L-Dopa stimulation test. The results are as follows: 1. The basal level of GH in the various disease was as follows: a. The basal level was lower than the control level but was not statistically significant b. In diabetes the mean value tended to be higher than the control level but was not significant statistically c. In all four acromegaly patients the GH level was significantly higher than the control level 2. Of 13 patients with diabetes, nine had diabetic retinopathy, and of those nine, sir showed increased L-Dopa response. However, of the four non retinopathic DM patients, only one showed increased response to L-Dopa. 3. Two patients out of ten with Sheehan's syndrome responded to L-Dopa stimulation. 4. One Patient of eight with pituitary chromophobe adenoma responded to L-Dopa stimulation. 5. Four acromegaly patients revealed 3 acidophilic adenoma and one chromophobe adenoma histologically. Of patients receiving the L-Dopa stimulation test. Two showed a paradoxical response. Two patients who received the glucose loading test showed supressed response. 6. Of two craniopharyngioma patients, one showed increased GH response after L-Dopa stimulation. Increased response of GH after L-Dopa stimulation was seen in one of two craniopharyngioma patients and also in one of two patients with
Langerhans' cell histiocytosis (LCH), known for histiocytosis X, is a clinicopathologic entity characterized by proliferation of Langerhans' cells (LCs) throughout the body including the reticuloendothelial system, bone, and skin. LCs is currently considered as a distinct type of histlocytic cells, not primarily phagocytic in nature. Recently, we could make the diagnosis on cytologic specimen in a 3 month-old-boy and a 3 year-old-boy. The cases were diagnosed on scraping smear from the skin and fine needle aspiration cytology from the lymph node, respectively. The characteristic cytologic features of Langerhans' cells were noted in the nuclei, namely eccentric, indented, elongated, and grooved nuclei. The cells also had abundant and acidophilic cytoplasm. The cytologic diagnoses were confirmed on the biopsies from the skin and lymph node, respectively.
The use of cellulolytic lactic acid bacteria in new method to prepare high nutrition complementary foods was investigated. For the screening of cellulolytic lactic acid bacteria, more than 1,150 bacterial colony were isolated from diluted infant feces samples. A typical strain which appeared the most excellent cellulolytic activities was identified novel acidophilic Enterococcus sp. TO-94 through the results of morphological, biochemical and chemotaxonomic characteristics and 16S rDNA sequencing. The optimal lactic acid fermentation conditions of Omija(Schizandra chinensis Baillon) by Enterococcus sp. TO-94 were as follows: pH and temperature were 3.0 and $37^{\circ}C$, respectively, and fermentation time was 20hrs. The fructose and glucose were major free sugar and the contents were 5.83 and 4.30 mg/g after fermentation, respectively. The contents of lactic acid and acetic acid were 9.84 mg/g and 2.08 mg/g after fermentation, respectively. The vitamin $B_1$, $B_2$, niacin, folic acid and C were major vitamin in the fermented broth, the contents were 1.5~3 times higher than those of initial fermentation time. Also, the contents of polyphenol and anthocyanine were 3.8 and 1.2 times higher than those of initial fermentation time.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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