Nitrogen fixing activity associated with 40 varieties of rice was assayed at heading stage by an in situ acetylene reduction method. The in situ acetylene reduction activity and population of nitrogen fixing bacteria obtained on nitrogen-free malate medium for Azospirillum spp. enrichment showed positive correlation. Six Azospirillum spp. with high nitrogenase activity were isolated from the rice roots, from which five spp. were identified as A. lipoferum and one was A. brasilense. The physiological characteristics of the six Azospirillum isolates, that is, carbon source utilization, biotin requirement, antibiotic resistance, indole acetic acid excretion, plasmid profile and protein patterns were compared.
Rhizobium meliloti 102 F 51, the symbiotic partner of alfalfa, was mutagenized with N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (NTG) and UV-irradiation. Three group of mutants which form white, white-pink and red nodules were selected. The adetylene reduction activity, nodulation activity, amount of heme synthesis during the nodulation, and ${\delta}-aminolevulinic$ acid synthetase (ALAS) and ${\delta}-aminolevulinic$ acid dehydratase (ALAD) activities in free living rhizobia and bacteroid states of the each group of mutants were compared. The mutants forming white nodules showed lower acetylene reduction activity compared to those of red nodule forming mutants. The two key enzymes for the heme synthetic pathway, ALAS and ALAD activities of the mutants forming red nodules was much higher than those of the mutants forming white nodules in bacteroid state, however no significant difference was observed in free living state. In the nodules the ALAS was detected only in bacteroid fraction, while ALAD was detected both in bacteroid and plant fraction. ALAS was dramatically increased with the heme synthesis during the nodulation, while ALAD was decreased in plant fraction but slight increase was observed in bacteroid fraction.
Increase in nodulation and nitrogen fixation was achieved partly through the isolation of supernodulating soybean mutant plants. This experiment was conducted to compare nodulation, nitrogen fixation, and early growth characters of wild type 'Bragg' with those of its supernodulating soybean mutant, 'nts 382' and 'nts 246'. At 31 days after planting, nodule dry weight of nts mutants was 2.5 to 3.7 times greater than that of Bragg. Higher nodulation of nts mutants showed the reduced top growth, indicating that photosynthates might be translocated and used for nodule growth attached to the root system. Total acetylene reduction activity was higher in nts mutants than Bragg, whereas specific acetylene reduction activity of nts mutant was the half of that of Bragg. Mixture of nts mutants and Bragg did not affect nodulation characters each other, suggesting that factors affecting supernodulating characters exist inside rather than outside the root system.
A laboratory experiment was conducted to find out the effect of inoculation with plant growth of associative $N_2$-fixing bacteria on the combination of eight different rice seedling with seven different associative $N_2$-fixing bacteria in which were isolated and identified from grasses and rice in saline and reclaimed saline paddy soil. Those were examined in N-free axenic culture medium. The result of this experiment exemplified the contribution of associative $N_2$-fixing bacteria to their host plant were varied much by the combination of rice cultivars and bacterial strains. Acetylene reduction ($N_2$-fixation) activity seems to be more variable with respect to the combination of rice cultivars and bacterial strains. The relationship between acetylene reduction activity and rice performance such as dry matter weight, plant height, root length, and number of root were statistically insignificant. However, in comparision with the control, the dry matter yield of Annapuruna was increased by inoculation of all the seven bacteria strains. Among the seven rice cultivars, the average acetylene reducing activity was the highest in Annapuruna, and Shingwang, and the lowest in IR-8 inoculated with Pseudomonas sp H8. Among the seven bacterial strains the highest acetylene reducing activity was obtained by the combination of Shingwang with Pseudomonas sp H8.
Five soybean varieties of two early maturing Karikei73 and SS 79168, and three late maturing Tohoku76, Baegunkong and Jangbaegkong were used and evaluated in the study. Of the varieties examined, Karikei73 was characterized by the delayed leaf senescence. The varieties were planted in the pots of 1/3500 a filled with volcanic ash soil at the experimental fields of the National Institute of Agrobiological Resources in Japan. Major agronomic characteristics including the activity of nitrogen fixation for root nodules during the grain filling period were measured. Measurements during the stages were followed by the stage of development descriptions for soybeans made by Fehr and Carviness (1977). The acetylene reducing activity (ARA) per dry weight of root nodule measured using acetylene reduction assays was the highest at R4-R4.5 with decreasing trends thereafter for the early matruing varieties, while it continuously increased up to R6 but decreased rapidly thereafter for the late maturing varieties. The dry weights of root nodules and all parts of the host plant at each stage checked were greater in the late maturing varieties being the same in ARA per pot.
Soybean, inoculated with effective Rhizobium japonicum 110, were grown by sand culture with nutrient solution containing either of 0, 1, 3, 10 or 30mM NO3-/l, and analyzed growth characteristics, NR activity, N2-fixation activity, and changes of ureide contents during the growing period. The amount of nodule formation decreased abruptly by nitrate treatment, the maximum nodule dry weight was 1.59, 1.05, 0.78, 0.09 and 0.008 g plant-1, respectively for each treatment on the 98th day. Specfic activity of N2-fixation showed the maximum rates of 140, 101, 37, 5 and 2.2 nM dw.mg-1.hr-1, respectively for each treatment in the earlier growth period. The maximum acetylene reduction activity on the 98th day after sowing was 81.5, 35.3, 14.3, 0.1 and 0.0045 $\mu$M C2H4 plant-1.hr-1, respectively for 0, 1, 3, 10 and 30 mM of NO3- gradients. Nitrate reduction activity increased along with nitrate gradients, and decreased abruptly with age. Relative abundance of ureides in plant organs was high in reproductive growth, and showed the maximum value in fully symbiotic dependent plant. Relative abundance of ureides in stem is a useful indication for the evaluation of nitrogen fixation in nodules of symbiotic plant.
A pot experiment was conducted to find the nitrogen fixing activities associated with ice rhizoplane in nine varieties at various growth stage by acetylene reduction technique. Results obtained ware Summarized as follows. 1. Nitrog en fixing activites associated with rice rhizoplane differ by the rice variety and the growth stage. The activities increased with progressing of growing time, and maximum activities were obtained from the ear forming stage to the heading stage. 2. The application of rice straw did not greatly enhanced the nitrogen fixing activities associated with rice rhizoplane. However, somewhat increasing tendency was obtained in the Kataktara, TKM-6, Centrypartna. Daegujo, and Jodongji varieties. 3. The nitrogen fixed during the one rice cropping period was estimated as 0.55kg of N per 10a by Milyang-23 variety to 2.6kg of N per 10a by Jodongji variety. 4. The amount of rice root showed no significant relationship with the amount of nitrogen fixed during the growing period of rice plant.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.13
no.1
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pp.16-22
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1993
Ladino clover stolen growing in grazed sward transplanted in 1/5,000a Wagner pot with two rows and were grown in green house with 12h lighting. Fifty days after transplanting the first cutting was made, the secound and 3rd cutting was made 20 days after each harvest. Treatment were nitrogen fertilization level of 2.5, 5.0 and 7.5 kg N/10a. Nitrogen was top dressed after transplanting and each cutting. Growing point, above and under ground DM yield, nitrogen fixation, crude protein of stolon, root and change of acetylene reduction activity after cutting were investigated. Result are as follows. 1. Growing point, DM production were heighst in 5 kg N at the first and 2nd harvest while 2.5 kg at 3rd cutting. Plants with 7.5 kg N/10a were dead at 3rd harvest. There were significant differences in growing point between treatment. 2 Nitrogen fixation of ladino clover were the heightest in 2.5 kg N pot at 1st cutting and as cutting and N fertilization were contiuned nitrogen fixation activity was lowered. 3. Leaf have more crude protein than that of stolen and root while plant crude protein increased by 2nd cutting as plant got more nitrogen fertilizer and again decreased in 3rd cutting. 4. Acetylene reduction activity were lowest at 3 week and recovered normal level at 5 week after cutting, also DM root was same trend.
This study was conducted to select rhizobia from hairy vetch (Vicia villosa Roth) with nodulation and excellent nitrogen-fixing ability. Hairy vetch root was collected from 7 of cultivation region of all over the country, rhizobia were isolated from the root nodules. Isolates were re-inoculated into a hairy vetch separately and studied nodulation and nitrogen-fixing ability. As a result, total of 52 Rhizobium isolates were isolated from the hairy vetch root nodules, among these, 16 isolates were Rhizobium which show good growth at more than 0.5% NaCl concentration. These 16 isolates were re-inoculated separately, 8 weeks after, good root nodule formation was observed from Rhizobium sp. RH1, RH3, RH81, RH82, RH84, and RH93 strain treated samples. Six isolates were positive for nitrogen fixing ability, the highest acetylene reduction activity was shown by Rhizobium sp. RH84. Results suggest that the Rhizobium sp. RH84 could be used as the possibility of its application as a green manure crop of hairy vetches in nonuniform salt distribution reclaimed land.
In this study, we compared the levels of methylotrophic bacterial community diversity in the leaf, stem, grain, root and rhizosphere soil sainples of four rice cultivars collected from three regions of Korea. Thirty five pigmented and five non-pigmented isolates showing characteristic growth on methanul were obtained. When phylotypes were defined by performing numerical analysis of 42 characteristics, four distinct clusters were formed. While two clusters, I and IV diverged on the basis of nitrate and nitrite reduction, other two clusters, comprising only pink pigmented colonies, diverged on the basis of cellulase activity. Out of the two reference strains used in the analysis, Methyhbacterium extorquens AM1 diverged from all the clusters and M. fujisawaense KACC 10744 grouped under cluster III. All the isolates were positive for urease, oxidase, catalase and pectinase activity and negative for indole production, MR and VP test, $H_2S$ production, starch, and casein hydrolysis. No clusters were found to possess thermotolerant isolates, as no growth of the isolates was observed at $45^{\circ}C$. Two strains in cluster I were found to possess gelatin hydrolysis and methane utilizing properties respectively. Most of the isolates in all the four clusters utilized monosaccliarides, disaccharide and polyols as carbon source. Six isolates showed considerable nitrogenase activity ranging from 86.2 to $809.9nmol\;C_2H_4\;h^{-1}\;mg^{-1}$ protein.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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