• 생명과학회지
• /
• 제18권1호
• /
• pp.136-142
• /
• 2008

Rhodotorula glutinis epoxide hydrolase (EH) 유전자를 pPICZ vector에 이중발현 cassette로 재조합하여 발현시킨 재조합균주 Pichia pastoris를 제작하였으며 라세믹 styrene oxide 혼합물로부터 고순도 광학활성 (S)-styrene oxide를 제조하는데 사용하였다. 본 연구에서 사용된 R. glutinis EH 유전자는 전보에서 사용한 pPICZ B/RgEH plasmid DNA를 주형으로 하여 얻었으며 PCR 방법으로 BglII 제한자리를 돌연변이 시키고 AOX1 promoter $(P_{AOX1})$-RgEH 유전자-전사종결서열($TT_{AOX1}$)을 이중으로 가진 이중발현 cassette를 만들어 P. pastoris의 염색체 DNA에 삽입시켰다. 반응온도를 $30^{\circ}C$로 하였을 때, RgEH를 이중발현 cassette로 발현시킨 재조합균주 P. pastoris의 (R)-styrene oxide에 대한 $V_{max}$ 값은 $2.2{\mu}mol\;min^{-1} (mg\;dcw)^{-1}$으로 단일발현 cassette로 발현시킨 P. pastoris의 $0.4{\mu}mol\;min^{-1}(mg\;dcw)^{-1}$에 비하여 6배 향상되었다. 광학순도가 높은 (S)-styrene oxide를 제조하는 최적조건을 찾기 위하여 입체선택적 가수분해 속도 및 수율에 미치는 detergent 및 온도의 효과를 실험하였으며, Tween 20을 0.5% 첨가하고 $10^{\circ}C$로 반응시킨 경우 10분 반응을 통해 99.9% ee 이상의 고순도 (S)-styrene oxide를 43.4% 얻을 수 있었다.

• 전자진흥
• /
• 제14권10호
• /
• pp.89-99
• /
• 1994

• 한국염색가공학회:학술대회논문집
• /
• 한국염색가공학회 2005년도 춘계학술발표회 논문집
• /
• pp.219-222
• /
• 2005

• 한국생물공학회:학술대회논문집
• /
• 한국생물공학회 2000년도 추계학술발표대회 및 bio-venture fair
• /
• pp.376-379
• /
• 2000

메탄올 자화효모인 Pichis pastoris는 메탄올에 의해 유도되는 강력한 AOX1 프로모터의 존재로 인하여 외래 단백질의 생산을 위한 가장 좋은 숙주중의 하나이다. methanol fed batch phase(MFP)동안에 메탄올의 공급은 그 메탄올이 단백질의 발현을 유도하며 또한 숙주에게 에너지원으로 쓰이기 때문에 매우 중요하다. 과량의 메탄올은 세포의 성장을 저해하며, 반면에 불충분한 메탄올의 공급은 세포를 느리게 자라게 하고 생산성도 떨어뜨린다. 본 연구는 새로운 혈소판 응집 억제제인 saxatilin의 생산성, 혹은 수율을 최대화 하기 위해서 메탄올의 공급속도와 세포의 비성장속도를 조절하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제40권4호
• /
• pp.348-355
• /
• 2012

본 연구에서는 S. cerevisiae와 P. pastoris에서 bovine pancreatic (bp-) DNase I의 과발현과 재조합 DNase I의 특성을 조사하였다. bp-DNase I 유전자는 GAL10 promoter, $MF{\alpha}$, GAL7 terminator 사이에 삽입하여 재조합 plasmid인 pGAL-$MF{\alpha}$-DNaseI (6.4 kb)를 구축하였다. 그리고 bp-DNase I 유전자를 AOX1 promoter, $MF{\alpha}$, AOX1 terminator 에 삽입하여 재조합 plasmid인 pPEXI (8.8 kb)를 구축하였다. 재조합 plasmid인 pGAL-$MF{\alpha}$-DNaseI과 pPEXI를 각각 S. cerevisiae와 P. pastoris 숙주세포에 형질전환시켰다. 형질전환된 효모세포들을 galactose와 methanol 배지에서 $30^{\circ}C$, 48시간 배양하면 bp-DNase I은 대부분이 배양 상등액으로 과발현되었다. P. pastoris 형질전환체는 배양 상등액에서 45.5 unit/mL의 DNase I 활성을 보였으며, 반면에 S. cerevisiae 형질전환체는 37.7 unit/mL의 DNase I 활성을 보였다. 또한 DNA 분해 특성을 조사한 결과, P. pastoris 재조합 DNase I으로 기질 DNA(calf thymus)를 처리하였을 때 1분 이내 DNA가 분해되는 것을 확인할 수 있었으며 이는 상업용 bp-DNase I과 S. cerevisiae 재조합 DNase I으로 처리했을 때보다 빠른 분해 패턴을 보였다.

• 한국섬유공학회:학술대회논문집
• /
• 한국섬유공학회 1998년도 가을 학술발표회논문집
• /
• pp.114-117
• /
• 1998

양모의 수축은 양모를 습윤 처리할 때 양모 스케일의 모근과 모단방향의 마찰계수가 다르기 때문에 일어나는 현상이므로 양모의 스케일을 화학적으로 개질하여 두 방향의 마찰계수의 차를 감소시키면 양모의 수축을 감소시킬 수 있다. 이와 같은 원리로 방축효과를 주는 양모의 방축 가공제로는 90% 이상이 염소 또는 염소를 발하는 물질인데 이 가공으로 인한 폐수는 환경문제를 일으키는AOX를 함유하고 있어서 이를 대체하고자 하는 연구가 여러 곳에서 진행되고 있다. (중략)

• Environmental Engineering Research
• /
• 제9권6호
• /
• pp.279-287
• /
• 2004

• BMB Reports
• /
• 제45권6호
• /
• pp.342-347
• /
• 2012

Plant mitochondria possess alternative respiratory pathways mediated by the type II NAD(P)H dehydrogenases and alternative oxidases. Here, E3 SUMO ligase was shown to regulate alternative respiratory pathways and to participate in the maintenance of carbon and nitrogen balance in Arabidopsis. The transcript abundance of the type II NAD(P)H dehydrogenases NDA2 and NDB2 and alternative oxidases AOX1a and AOX1d genes was low in siz1-2 mutants compared to that in wild-type. The addition of nitrate or ammonium resulted in a decrease or an increase in the expression of the same gene families, respectively, in both wild-type and siz1-2 mutants. The amount of free sugar (glucose, fructose and sucrose) was lower in siz1-2 mutants than that in wild-type. These results indicate that low nitrate reductase activity due to the AtSIZ1 mutation is correlated with an overall decrease in alternative respiration and with a low carbohydrate content to maintain the carbon to nitrogen ratio in siz1-2 mutants.

• 한국생물물리학회:학술대회논문집
• /
• 한국생물물리학회 2001년도 학술 발표회 진행표 및 논문초록
• /
• pp.41-41
• /
• 2001

Ascorbate peroxidase catalyze the oxidation of ascorbic acid through the reaction with hydrogen peroxide. Ascorbic acid are utilized as a substrate in oxidative stress. In Candida albieans, ascorbic acid is used as antioxidants, so called D-erythroascorbic acid (EASe). Oxidative stress change concentrations of EASC resulting in interaction with alternative oxidase (AOX).(omitted)

• Journal of Crop Science and Biotechnology
• /
• 제11권2호
• /
• pp.127-134
• /
• 2008

Tobamoviruses are the major viral pathogens of tomato and bell pepper. The preliminary results showed that Acibenzolar-Smethyl(ASM; S-methylbenzo(1,2,3) thiadiazole-7-carbothiate) pre-treatment to tomato and tobacco plants reduces the concentration of Tomato mosaic tobamovirus(ToMV) and Tobacco mosaic tobamovirus(TMV) in tomato and bell pepper seedlings, respectively. Pre-treatment of the indicator plant(Nicotiana glutinosa) with the ASM followed by challenge inoculation with tobamoviruses produced a reduced number and size of local lesions(67 and 79% protection over control to TMV and ToMV inoculation, respectively). In order to understand the mechanism of resistance the gene expression profiles of antiviral genes was examined. RT-PCR products showed higher expression of two viral resistance genes viz., alternative oxidase(AOX) and RNA dependent RNA polymerase(RdRp) in the upper leaves of the ASM-treated tomato plants challenge inoculation with ToMV. Further, the viral concentration was also quantified in the upper leaves by reverse transcription PCR using specific primer for movement protein of ToMV, as well as ELISA by using antisera against tobamoviruses. The results provided additional evidence that ASM pre-treatment reduced the viral movement to upper leaves. The results suggest that expressions of viral resistance genes in the host are the key component in the resistance against ToMV in the inducer-treated tomato plants.