Kim, Seon Woong;Park, Arom;Ahn, Dong Gyu;Kim, Soon Young
한국자원식물학회지
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제31권6호
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pp.597-603
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2018
Inhibitory effect of colchicine on growth and gravitropic responses in Arabidopsis root was explored to find whether there was an involvement of ethylene production. It has been known that cytoskeleton components are implicated in sedimentation of statoliths to respond to gravitropism and growth. The root growth was inhibited by 25% and 40% over control for 8 hr treatment of colchicine at a concentration of $10^{-5}M$ and $10^{-7}M$, respectively. The roots treated with colchicine at the concentration of $10^{-7}M$ showed the same pattern as control in 3 hr, however, gravitropic response was decreased in the next 5 hr. The colchicine treatment at the concentration of $10^{-5}M$ inhibited the gravitropic response resulting in $60^{\circ}$ of curvature. In order to better understand the role of colchicine, the production of ethylene was measured with and without the treatment of colchicine. Colchicine increased the ethylene production by 20% when compared to control via the activation of ACC oxidase and ACC synthase activity. These results suggest that the inhibition of the growth and gravitropic responses of Arabidopsis roots by the treatment of colchicine could be attributed to the rearrangement of microtubule, and increase of ethylene production.
Kyoung Kon Kim;Hye Rim Lee;Sun Min Jang;Tae Woo Kim
Nutrition Research and Practice
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제18권2호
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pp.180-193
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2024
BACKGROUND/OBJECTIVES: Obesity is a major cause of metabolic disorders; to prevent obesity, research is ongoing to develop natural and safe ingredients with few adverse effects. In this study, we determined the anti-obesity effects of Rosa multiflora root extract (KWFD-H01) in 3T3-L1 adipocytes and Sprague-Dawley (SD) rats. MATERIALS/METHODS: The anti-obesity effects of KWFD-H01in 3T3-L1 adipocytes and SD rats were examined using various assays, including Oil Red O staining, gene expression analyses, protein expression analyses, and blood biochemical analyses. RESULTS: KWFD-H01 reduced intracellular lipid accumulation and inhibited the mRNA expression of peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ), cytidine-cytidine-adenosine-adenosine-thymidine (CCAAT)/enhancer binding proteins (C/EBPα), sterol regulatory element-binding transcription factor 1 (SREBP-1c), acetyl-CoA carboxylase (ACC), and fatty acid synthase (FAS) in 3T3-L1 cells. KWFD-H01 also reduced body weight, weight gain, and the levels of triglycerides, total and LDL-cholesterol, glucose, and leptin, while increasing high-density lipoprotein-cholesterol and adiponectin in SD rats. PPARγ, C/EBPα, SREBP-1c, ACC, and FAS protein expression was inhibited in the epididymal fat of SD rats. CONCLUSION: Overall, these results confirm the anti-obesity effects of KWFD-H01 in 3T3-L1 adipocytes and SD rats, indicating their potential as baseline data for developing functional health foods or pharmaceuticals to control obesity.
암을 유발하는 phorbol ester로 알려진 Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)는 동물세포에서 신호전달 효소의 하나인 protein kinase C (PKC)를 활성화시킨다. 본 연구에서는 옥수수 일차뿌리에서 PMA가 에틸렌 생성을 통하여 굴중성 반응을 조절하는 효과를 연구하였다. PMA는 8시간 동안 $10^{-6}$ M과 $10^{-4}$ M에서 농도 의존적으로 뿌리 생장과 굴중성 반응을 촉진시켰다. 이러한 촉진 효과는 PKC의 억제제인 staurosporine (STA)에 의해 상쇄되었다. 이 결과는 굴중성 반응이 신호전달 체계에 관여하는 protein kinase C를 통하여 조절될 가능성을 제시하고 있다. 식물호르몬인 에틸렌도 뿌리 생장과 굴중성 반응에 중요한 역할을 한다고 알려져 있다. 에틸렌 생성은 $10^{-6}$ M과 $10^{-4}$ M PMA에 의하여 각각 26%와 37% 증가하였다. PMA는 또한 ACC synthase (ACS) 활성을 촉진시켰다. 또한 이 증가 효과는 STA에 의하여 상쇄되었다. 이 결과는 옥수수 뿌리에서 굴중성 반응은 에틸렌 생성을 거쳐 protein kinase를 통하여 조절될 가능성을 제시하고 있다.
Objectives: This study was performed to investigate the effects of two herbal medicines, Agastachis Herba and Lysimachiae Herba, on a cellular model of non-alcoholic fatty liver diseases (NFLDs). Methods: HepG2 cells were treated with palmitic acid and with various concentrations of Agastachis Herba (AH) or Lysimachiae Herba (LH) extract in water. The lipotoxicity was assessed using EZ-cytox, and the lipoapoptosis was assessed using cell death detection ELISA. Intracellular lipids were measured by oil red O staining. The efficacy of AH and LH on sterol regulatory element-binding transcription factor-1c (SREBP-1c), fatty acid synthase (FAS), and acetyl-CoA carboxylase (ACC) in HepG2 cells was measured by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Results: Both AH and LH extracts increased lipoapoptosis and decreased lipotoxicity and levels of SREBP-1c, ACC, and FAS (SREBP-1c, ACC, and FAS are factors in lipid synthesis). In the oil red O staining experiment, both extracts also reduced intracellular lipid accumulation; in this instance, LH's efficacy was superior to that of AH. Conclusions: According to the results, both AH and LH are likely to contribute to non-alcoholic fatty liver disease, as both interfere with lipid synthesis.
식물생장과 발달에 중요한 역할을 하는 phytochrome이 ethylene 생합성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 여러 빛 조건에서 키운 phyA, phyB, phyAB에서 ethylene 생합성과 생합성에 관여하는 enzyme activity를 측정하였다. White light에서 키웠을 때 모든 mutant에서 ethylene 생합성이 감소되었다. 특히 double mutant에서는 wild type과 비교하여 37%가 감소하였다. Dark에서 키웠을 때에는 wild type만 감소하였고, mutant에서는 감소효과가 나타나지 않았다. Red light에서 키웠을 때 double mutant에서 급격한 감소가 일어났다. Far-red light 에서 키웠을 때는 phyB만 감소가 일어나지 않았다. Ethylene 생합성에 관여하는 enzyme인 ACO 활성 패턴과는 달리ACS 활성 패턴은 ethylene 생성 패턴과 유사하게 나타났다. 이 결과를 바탕으로 ethylene 생합성에는 phytochrome A와 B 모두 중요한 작용을 하며 특히 $P_r$ 형태의 phytochrome이 ethylene 생성량을 조절한다는 것을 제시한다. 또한 phytochrome은 ethylene 생합성 단계에서 AdoMet가 ACC로 전환되는 단계에서 조절하는 것을 제시한다.
간의 지질 축적과 인슐린 저항성은 비알콜성 지방간 환자에게서 증가한다. Piperine은 후추(Piper nigrum)와 필발(인도산 후추, P. longum)의 주요 성분으로 항암, 항비만, 항 당뇨병, 항염증 및 항산화 등의 생리활성이 보고되었다. 그러나 piperine의 인간 간세포 HepG2 세포에서 지질 축적과 인슐린 저항성의 억제제로서의 연구는 보고된 바가 없다. 본 연구의 목적은 지질 축적 및 인슐린 저항성에 대한 piperine의 효과를 palmitate처리된 HepG2 세포에서 잠재적인 분자 기전을 밝히는 것이다. 그 결과 piperine처리군은 지질 함량을 감소시켰고, 지방 형성 표적 유전자인 SREBP-1c와 FAS의 발현을 억제함으로써 palmitate처리된 세포내 지질 축적을 감소시켰다. 게다가 piperine처리군은 지방산 산화에 관련된 CPT-1과 인산화된 ACC 및 인산화된 IRS-1 (Tyr632)와 Akt의 레벨을 증가시켰다. 또한, piperine처리군은 인산화된 IRS-1 (Ser307)의 레벨을 감소시켰다. 결론적으로 palmitate처리된 HepG2 세포에서 piperine은 SREBP-1와 FAS발현의 감소 및 CPT-1과 ACC 인산화의 증가 및 인산화된 IRS-1(Try632)와 Akt 신호전달 경로를 조절함으로써 지질 축적 및 인슐린 저항성을 개선함을 확인하였다. 따라서 piperine의 지질 축적 및 인슐린 저항성을 예방하는 약물로써 가능성이 제시되었다.
진핵생물의 유전자 발현 과정에서 생성된 단백질은 전사후 변형 과정을 통해 소포체와 골지체에서 당질화가 일어난다. 당질화된 당단백질은 접힘의 오류가 있는 경우를 비롯하여 식물의 분화 조절 등의 경우 당단백질이 분해되며, 이 때 PNGase에 의해 N-당사슬이 단백질의 아스파라긴산 잔기로부터 절단된다. 그러나 식물의 발달과 분화 과정에서 PNGase의 발현 조절에 대해서는 거의 알려진 바가 없다. 기존에 보고된 유전적 정보를 활용하여 토마토의 잎에서 제조된 cDNA library에서 nested RT-PCR을 통하여 PNGase T의 유전자(GenBank Accession number KM401550)를 분리하였는데 이의 ORF는 1,767 bp, 588개의 이미노산으로 이루어졌으며, 분자량은 65.8 KDa이었다. PNGase T의 유전자는 토마토 과육에서 높은 수준으로 항시적으로 발현되었으며, 특히 녹색과보다는 오렌지색으로 숙성되는 과정에서 PNGase T의 전사체량이 크게 증가하였다. 이러한 발현 패턴은 토마토 과육에서 세포죽음의 과정에서 증가하는 단백질 가수분해 효소인 metacaspase의 전사체 증가 페턴과 유사하였으며, 이 시기에는 에틸렌의 생합성 효소 중 노화관련 ACC synthase의 유전자 members (LeACS2, LeACS4, LeACS6)의 발현 패턴과도 유사하였다. 따라서 토마토 과육에서 PNGase T의 유전자 발현은 거대분자가 분해되는 시기에서 과육의 숙성과 노화 과정에서 특이적인 생리적 기능을 나타내는 것으로 판단된다. 향 후 고가의 의약용 재조합단백질의 면역부작용을 완화하기 위하여 식물체 유래의 당단백질의 탈당질화과정에서 PNGase T를 활용함으로써 식물생명공학 분야에서 활용가치가 높을 것으로 사료된다.
The objective of the current study was to investigate the effects of dietary ${\omega}-6/{\omega}-3$ polyunsaturated fatty acid (PUFA) ratios on lipid metabolism in goslings. One hundred and sixty 21-day-old Yangzhou geese of similar weight were randomly divided into 4 groups. They were fed different PUFA-supplemented diets (the 4 diets had ${\omega}-6/{\omega}-3$ PUFA ratios of 12:1, 9:1, 6:1, or 3:1). The geese were slaughtered and samples of liver and muscle were collected at day 70. The activities and the gene expression of enzymes involved in lipid metabolism were measured. The results show that the activities of acetyl coenzyme A carboxylase (ACC), malic enzyme (ME), and fatty acid synthase (FAS) were lower (p<0.05), but the activities of hepatic lipase (HL) and lipoprotein lipase (LPL) were higher (p<0.05), in the liver and the muscle from the 3:1 and 6:1 groups compared with those in the 9:1 and 12:1 groups. Expression of the genes for FAS (p<0.01), ME (p<0.01) and ACC (p<0.05) were higher in the muscle of groups fed diets with higher ${\omega}-6/{\omega}-3$ PUFA ratios. Additionally, in situ hybridization tests showed that the expression intensities of the high density lipoprotein (HDL-R) gene in the 12:1 and 9:1 groups were significantly lower (p<0.01) than that of the 3:1 group in the muscle of goslings. In conclusion, diets containing lower ${\omega}-6/{\omega}-3$ PUFA ratios (3:1 or 6:1) could decrease fat deposition by inhibiting fat synthesis in goslings.
The gaseous hormone ethylene influences many aspects of plant growth, development, and responses to a variety of stresses. The biosynthesis of ethylene is tightly regulated by various internal and external stimuli, and the primary target of the regulation is the enzyme 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid (ACC) synthase (ACS), which catalyzes the rate-limiting step of ethylene biosynthesis. We have previously demonstrated that the regulation of ethylene biosynthesis is a common feature of most of the phytohormones in etiolated Arabidopsis seedlings via the modulation of the protein stability of ACS. Here, we show that various phytohormones also regulate ethylene biosynthesis from etiolated rice seedlings in a similar manner to those in Arabidopsis. Cytokinin, brassinosteroids, and gibberellic acid increase ethylene biosynthesis without changing the transcript levels of neither OsACS nor ACC oxidases (OsACO), a family of enzymes catalyzing the final step of the ethylene biosynthetic pathway. Likewise, salicylic acid and abscisic acid do not alter the gene expression of OsACS, but both hormones downregulate the transcript levels of a subset of ACO genes, resulting in a decrease in ethylene biosynthesis. In addition, we show that the treatment of the phytohormones results in distinct etiolated seedling phenotypes, some of which resemble ethylene-responsive phenotypes, while others display ethylene-independent morphologies, indicating a complicated hormone crosstalk in rice. Together, our study brings a new insight into crosstalk between ethylene biosynthesis and other phytohormones, and provides evidence that rice ethylene biosynthesis could be regulated by the post-transcriptional regulation of ACS proteins.
Objectives: This study was performed to investigate the anti-lipogenic effect and the mechanism of Jungmanbunso-hwan extract (JMBSH) on a cellular model of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) caused by palmitate in HepG2 cells.Methods: The JMBSH was prepared, andHepG2 cells were treated with various concentrations of JMBSH in order to perform an MTT assay. The HepG2 cells were cultivated in palmitate-containing media with or without extract of JMBSH. The intracellular lipid content in the HepG2 cells was examined. The effects of JMBSH on sterol regulatory element-binding transcription factor-1c (SREBP-1c), acetyl-CoA carboxylase (ACC), fatty acid synthase (FAS), stearoyl-CoA desaturase-1 (SCD-1), and AMP-activated protein kinase (AMPK) activation in HepG2 cells were measured.Results: JMBSH did not reduce HepG2 cell viability under 1,000 μg/mL. JMBSH considerably decreased intracellular lipid accumulation caused by palmitate in HepG2 cells. JMBSH repressed expression of SREBP-1c, which mediates the induction of lipogenic genes (ACC, FAS, and SCD-1). JMBSH also activated AMPK, which plays animportant role in the regulation of hepatic lipid metabolism.Conclusions: This study suggested that JMBSH relieves hepatic steatosis by repressing SREBP-1c, which mediates the induction of lipogenic genes. The anti-lipogenic effect of JMBSH may also be related to the activation of AMPK. Therefore, JMBSH could potentially be applied to NAFLD treatment after further clinical studies.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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