Lee Hyo-Jin;Cui Cheng-Bi;Choi Hyung-Taek;Kim Soo-Hyun;Ham Young-An;Lee Deuk-Sik;Ham Seung-Shi
Food Science and Preservation
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v.12
no.2
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pp.179-183
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2005
This study was performed to determine the antioxidative, antimutagenic, and anticancer effects of vaporized liquid of water-boiled pine needle(VLP) using DPPH free radical donating method, Ames test, and cytotoxicity. VLP showed the highest electron donating activities $(18.4\;{\mu}L)$. The inhibition rate of VLP $(200\;{\mu}L/plate)$ in the Salmonella. typhimurium TA100 strain showed $45.9\%$ inhibition against the mutagenesis induced by MNNG. In addition, the suppression of with same concentration of VLP in the S. typhimurium TA100 strains showed $85.5\%$ inhibition against 4NQO, respectively. The suppressions under the same condition against Trp-P-1 in the TA98 and TA100 strains were $91.0\%$ and $62.1\%$, respectively. The cytotoxic effects of VLP against the cell lines with human lung carcinoma (A549), human hepatocellular carcinoma (HepG2) , human gastric carcinoma (AGS), human breast adenocarcinoma (MCF-7) and human cervical adenocarcinoma (HeLa) were inhibited with increase of the VLP concentration. The treatment of $50\;{\mu}L/well$ VLP showed strong cytotoxicities of $78.7\%,\;90.3\%,\;90.8\%,\;62.3\%$ and $93.7\%$ against A549, HepG2, AGS, MCF-7 and HeLa, respectively.
The biological activities of Smilax china L. rhizome (SCR), hot water (SCRW) and 70% ethanol extract (SCRE) were analyzed. The total phenolic contents of SCRW and SCRE were 51.7 and 100.5 mg/g, respectively. The measured flavonoid content of SCRW ($67.7{\mu}g/g$) was almost double that of SCRE ($31.7{\mu}g/g$). SCRE ($IC_{50}=42.4{\mu}g/mL$) exhibited stronger antioxidant activity in the DPPH system than the positive control ${\alpha}$-tocopherol ($71.3{\mu}g/mL$) or butylated hydroxy anisole ($53.8{\mu}g/mL$) did. SCRE ($IC_{50}=50.3{\mu}g/mL$) also showed stronger ABTS radical scavenging activity, as did ${\alpha}$-tocopherol ($67.1{\mu}g/mL$). The SOD-like activity and Tyrosinase inhibition activity of SCRW and SCRE showed almost the same pattern. The best SOD-like activity and tyrosinase inhibition activity were measured as 24.9% and 20.3% in SCRW at $1,000{\mu}g/mL$, respectively. The cytotoxic effects of the SCR extracts were analyzed via MTT assay on human cancer and normal cells. SCRW and SCRE did not show cytotoxicity up to the concentration of $1,000{\mu}g/mL$ against the normal human cell line HEK293. Against human breast cancer cells (MCF-7), SCRW inhibited MCF-7 growth (by 27.6%) better than the anticancer drug cyclophosphamide (15.5%) at $1,000{\mu}g/mL$. SCRE ($1,000{\mu}g/mL$) inhibited the growth of human lung cancer cells A549 (37.6%) and human stomach cancer cells AGS (53.6%) more effective than did SCRW (21.0% and 35.4%) or CPA (22.2% and 31.7%). These results suggest the potential use of SCRE and SCRW as an excellent antioxidant and antiproliferative substance, respectively.
Physiological activities of 40% ethanol extracts of Phellinus ribis were studied by employing several biological and biochemical assays. The extracts of Phellinus ribis displayed nitrate-scavenging activities (NSA) at pH 1.2 as with 64% NSA with 1.0 mg/mL of the extracts. They also had 91% 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activities at the concentration of 1.0 mg/mL. Antioxidant activities of the extracts (at 0.5 mg/mL) on the autoxidation of linoleic acid (p<0.001) were also observed.. The inhibitory effect of the extracts on angiotensin converting enzyme was 11%. Cytotoxic effects of Phellinus ribis extracts against human cancer cell tines were also examined using MTT assay. The extracts (at 50 mg/mL) had severe growth inhibitory effects on A549, Hela, AGS, and SK-Hep-1, which were 8, 44, 76 and 42%, respectively. Ames test indicated that the extracts had no mutating effects on Salmonella typhimurium TA98 and TA100.
This study isolated and purified the antimicrobial peptide McSSP-31 from an acidified hemocyte extract of a Mytilus coruscus. The antimicrobial peptide was purified by using a $C_{18}$ reversed-phase high-performance liquid chromatography (HPLC). The peptide was determined to be 3330.549 Da by matrix assisted-laser desorption ionization time-of-flight mass spectrophotometer (MALDI-TOF/MS). The N-terminus of a 14 amino-acid sequence was identified as P-S-P-T-R-R-S-T-S-R-S-K-S-R by Edman degradation method. The acquired sequence showed a 93% similarity with the sperm-specific protein Phi-1, which is from M. californianus. The identified open-reading frame (ORF) of peptide was 306 bp encoding 101 amino acids, which was analyzed by rapid amplification of cDNA ends (RACE), cloning and sequencing analysis. We compared the full sequence with other known proteins that reveal the sperm-specific protein Phi-1 (93.5%) of M. californianus. Synthesized antimicrobial peptide (McSSP-31) showed antibacterial activity against gram-positive bacteria including B. subtilis, S. mutans, S. aureus and gram-negative bacteria including E. coli, K. pneumoniae, P. mirabilis, P. aeruginosa and fungi, C. albicans. Also, synthesized peptide showed strong antibacterial activity against antibiotic-resistant strains, including S. aureus. The cytotoxicity of the peptide was determined by using the HUVEC human cell line. The peptide did not exhibit any significant cytotoxic effects on the normal human cell line, and it had very low hemolytic activity with flounder hemoglobin. The results demonstrated that peptide purified from the hemocyte of a M. coruscus exhibits antibacterial activity against various bacteria and has the potential to be an alternative antibiotic agent.
The effects of erlotinib combined with celecoxib in a lung cancer xenograft model were here explored with a focus on possible mechanisms. A xenotransplanted lung cancer model was established in nude mice using the human lung cancer cell A549 cell line and animals demonstrating tumour growth were randomly divided into four groups: control, erlotinib, celecoxib and combined (erotinib and celecoxib). The tumor major axis and short diameter were measured twice a week and after 40 days tissues were collected for immunohistochemical analyses of Bcl-2 and Bax positive cells and Western-blotting analyses for the epidermal growth factor recepto (EGFR), P-EGFR, and cyclooxygenase-2 (COX-2). Tumor size in the combined group was smaller than in the others (p<0.01) and the percentage of Bcl-2 positive cells was fewer in most cases (p<0.01), while that of Bax positive cells was greater than in the erlotinib and celecoxib groups (P>0.05). Western blotting showed decreased expression of P-EGFR and COX-2 with both erlotinib and celecoxib treatments, but most pronouncedly in the combined group (P<0.05). Simultaneous blockage of the EGFR and COX-2 signal pathways exerted stronger growth effects in our human xenotransplanted lung cancer model than inhibition of either pathway alone. The anti-tumor effects were accompanied by synergetic inhibition of tumor cell apoptosis, activation of p-EGFR and expression of COX-2.
Yoon, Mi So;Kim, Do Yoon;Yu, Ho Jin;Park, Joo-Hoon;Jang, Sang Hee;Won, Kyung-Jong;Kim, Bokyung;Lee, Hwan Myung
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.26
no.5
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pp.687-692
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2012
Schizandra chinensis extract has been known to possess a variety of efficacy including antitumor. However, it remains unclear how schizandrin, which is a major biological active ingredient of Schizandra chinensis, exerts antitumor effect. This study was designed to investigate the mechanism by which schizandrin inhibits tumor growth and metastasis. In in vivo test using tumor model mice injected with B16BL6 cell line, mice treated with 10 and 100 ${\mu}g/ml$ schizandrin showed a significant inhibition by $73.79{\pm}6.43%$ and $90.46{\pm}1.72%$, respectively, compared with positive tumor controls. Schizandrin did not exert a significant toxicity for the normal cells (HUVECs) and tumor cell lines (A549, B16BL6, Du145, Huh7). Treatment with schizandrin at 10 and 100 ${\mu}g$/head significantly inhibited the tumor-induced angiogenesis by $68.04{\pm}32.21%$ and $103.8{\pm}34.99%$ compared with the positive control group, respectively. Using in vivo lung metastasis model, tumor metastasis assay revealed that 10 and 100 ${\mu}g$/head schizandrin significantly decreased the metastatic lung tumor by $37.51{\pm}8.15%$ and $75.53{\pm}4.38%$ compared with positive controls, respectively. On the other hand, schizandrin did not affect the adherence of B16BL6 cell line to extracellular matrix protein. These results demonstrate that schizandrin exerts inhibitory effect on tumor growth and metastasis by inhibiting angiogenesis. This study thus suggest that schizandrin may be a candidate molecule target for cancer drug development.
The immune activities of Ganoderma lucidum Mycelium added garlic extracts (GAM), Ganoderma lucidum Mycelium (GM), garlic extracts (GS) and standard $({\beta}-glucan)$ were compared. GAM enhanced the growth of human immune T cell up to $1.25{\sim}1.46$ times, compared to control group. GAM showed relatively lower cytotoxicity in using normal human lung cell, while GAM showed the most potent inhibitory effect on the human lung carcinoma, compared to GM and GS. The selectivity of GAM was also higher than that of GM and GS. GAM increased the secretion of cytokines, IL-6 and TNF- from human B cell as well as the growth of human immune cells. It can imply that GAM has higher immune activity than GM or GS.
Oh, Yoon Jung;Kim, Young Sun;Choi, Young In;Shin, Seung Soo;Park, Joo Hun;Choi, Young Hwa;Park, Kwang Joo;Park, Rae Woong;Hwang, Sung Chul
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.58
no.1
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pp.31-42
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2005
Background : Peroxiredoxins (Prxs) are a relatively newly recognized, novel family of peroxidases that reduce $H_2O_2$ and alkylhydroperoxide into water and alcohol, respectively. There are 6 known isoforms of Prxs present in human cells. Normally, Prxs exist in a head-to-tail homodimeric state in a reduced form. However, in the presence of excess $H_2O_2$, it can be oxidized on its catalytically active cysteine site into inactive oxidized forms. This study surveyed the types of the Prx isoforms present in the pulmonary epithelial, macrophage, endothelial, and other cell lines and observed their response to oxidative stress. Methods : This study examined the effect of exogenous, excess $H_2O_2$ on the Prxs of established cell lines originating from the pulmonary epithelium, macrophages, and other cell lines, which are known to be exposed to high oxygen partial pressures or are believed to be subject to frequent oxidative stress, using non-reducing SDS polyacrylamide electrophoresis (PAGE) and 2 dimensional electrophoresis. Result : The addition of excess $H_2O_2$ to the culture media of the various cell-lines caused the immediate inactivation of Prxs, as evidenced by their inability to form dimers by a disulfide cross linkage. This was detected as a subsequent shift to its monomeric forms on the non-reducing SDS PAGE. These findings were further confirmed by 2 dimensional electrophoresis and immunoblot analysis by a shift toward a more acidic isoelectric point (pI). However, the subsequent reappearance of the dimeric Prxs with a comparable, corresponding decrease in the monomeric bands was noted on the non-reducing SDS PAGE as early as 30 minutes after the $H_2O_2$ treatment suggesting regeneration after oxidation. The regenerated dimers can again be converted to the inactivated form by a repeated $H_2O_2$ treatment, indicating that the protein is still catalytically active. The recovery of Prxs to the original dimeric state was not inhibited by a pre-treatment with cycloheximide, nor by a pretreatment with inhibitors of protein synthesis, which suggests that the reappearance of dimers occurs via a regeneration process rather than via the de novo synthesis of the active protein. Conclusion : The cells, in general, appeared to be equipped with an established system for regenerating inactivated Prxs, and this system may function as a molecular "on-off switch" in various oxidative signal transduction processes. The same mechanisms might applicable other proteins associated with signal transduction where the active catalytic site cysteines exist.
Objective : Chemokines are important for the recruitment of leukocytes, which is essential in host defense to the sites of infection. The thymus and activation-regulated chemokine (TARC) is a CC chemokine which potentially plays a role via a paracrine mechanism in the development of allergic respiratory diseases. Methods : The objective of this study is to investigate the effect of Pinelliae Rhizoma Herbal Acupuncture Solution (PHS) on the secretion of TARC of human bronchial epithelial cell. Methods : Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was performed to detect the secretion of TARC. The cytotoxicity was measured by MTT assay. Results : PHS significantly inhibited the secretion of TARC with a dose-dependant manner. The effective dosage did not have the cytotoxicity on human bronchial epithelial cell by MTT assay. Conclusion : Results of our study imply that PHS would play an important role in modulation of TARC in Human bronchial epithelial cells.
Yawut, Natpaphan;Kaowinn, Sirichat;Cho, Il-Rae;Budluang, Phatcharaporn;Kim, Seonghye;Kim, Suhkmann;Youn, So Eun;Koh, Sang Seok;Chung, Young-Hwa
BMB Reports
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v.55
no.2
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pp.98-103
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2022
Increased mRNA levels of cancer upregulated gene (CUG)2 have been detected in many different tumor tissues using Affymetrix microarray. Oncogenic capability of the CUG2 gene has been further reported. However, the mechanism by which CUG2 overexpression promotes cancer stem cell (CSC)-like phenotypes remains unknown. With recent studies showing that pyruvate kinase muscle 2 (PKM2) is overexpressed in clinical tissues from gastric, lung, and cervical cancer patients, we hypothesized that PKM2 might play an important role in CSC-like phenotypes caused by CUG2 overexpression. The present study revealed that PKM2 protein levels and translocation of PKM2 into the nucleus were enhanced in CUG2-overexpressing lung carcinoma A549 and immortalized bronchial BEAS-2B cells than in control cells. Expression levels of c-Myc, CyclinD1, and PKM2 were increased in CUG2-overexpressing cells than in control cells. Furthermore, EGFR and ERK inhibitors as well as suppression of Yap1 and NEK2 expression reduced PKM2 protein levels. Interestingly, knockdown of β-catenin expression failed to reduce PKM2 protein levels. Furthermore, reduction of PKM2 expression with its siRNA hindered CSC-like phenotypes such as faster wound healing, aggressive transwell migration, and increased size/number of sphere formation. The introduction of mutant S37A PKM2-green fluorescence protein (GFP) into cells without ability to move to the nucleus did not confer CSC-like phenotypes, whereas forced expression of wild-type PKM2 promoted such phenotypes. Overall, CUG2-induced increase in the expression of nuclear PKM2 contributes to CSC-like phenotypes by upregulating c-Myc and CyclinD1 as a co-activator.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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