This study evaluates the improved effect of photodynamic therapy (PDT) by subjecting pathogenic bacteria to a combination of 630 nm light-emitting diode (LED) and 5-aminolevulinic acid (ALA). Bacterial suspensions of 1.5×104 cells/mL were diluted and exposed to ALA concentrations of 10, 5, 2.5, 1.25, and 0.625 mg/mL, incubated for 30 minutes, followed by irradiation with 630 nm LED (18 J/cm2 ). The non-irradiated P. aeruginosa group and the group administered only LED light averaged 415 and 245 colonies, respectively. Conversely, the PDT group showed an average of 109, 225, 297, and 285 colonies at concentrations of 10, 5, 2.5, and 1.25 mg/mL of ALA. Evaluating the effect on E. faecalis revealed an average of 8,750 and 8,000 colonies in the group that did not receive the control photosensitizer and the group exposed to light alone, respectively. However, an average of 0, 2350, 4825, and 7475 colonies at concentrations of 5, 2.5, 1.25, and 0.625 mg/mL ALA were determined for the PDT groups. In conclusion, better inhibitory effects were observed for E. faecalis than for P. aeruginosa. Moreover, our results validate the possibility of improved PDT efficacy using a combination of ALA and 630 nm LED.
We investigated photodynamic stress-induced antioxidant responses in transgenic rice overexpressing Bradyrhizobium japonicum 5-aminolevulinic acid synthase (ALA-S) coding sequence lacking plastidal transit sequence. High light of $350{\mu}mol\;m^{-2}\;s^{-1}$ decreased the quantum yield in the transgenic lines, C4 and C5, compared to that of wild-type line. By contrast, non-photochemical quenching (NPQ) levels of C4 and C5 under high light were higher than those of the transgenic lines under low light of $150{\mu}mol\;m^{-2}\;s^{-1}$ as well as wild-type line under low and high light. Greater levels of NPQ in the transgenic lines exposed to high light were in a close correlation with increases in the xanthophyll pigment, zeaxanthin. Under high light, levels of neoxanthin, violaxanthin, lutein, and ${\beta}$-carotene in the transgenic lines were lower than those in wild-type line. Taken together, nonphotochemical energy dissipation and photoprotectant xanthophyll pigments play a critical role to deal with the severe photodynamic damage in the transgenic rice plants, although they could not overcome the photodynamic stress, leading to severe photobleaching symptoms.
A photosynthetic bacterium strain KUP-74 producing high amount of S-amino-levulinic acid(ALA) was isolated from soils, which was identified as Rhodocyclus gelatinosus. After 10 days cultivation under anaerobic-light condition at $30^{\circ}C$, 4 Klux and pH 6.8, 5 mg/l of ALA was formed extracellularly. ALA productions were increased up to 8 mg/l and 12 mg/l in cell cultivations either by the addition of 0.5% glycerol (v/v) or 10 mM of glycine and succinic acid, respectively, using Lascelles basal medium eliminated L-glutamic acid. By cultivation in the presence of 30 mM each D,L-glutamic acids and D,L-glutamines the yield of ALA showing a late induction phenomenon was reached the maximum value of 21 mg/l. Different culture times were needed to generate maximum ALA yields by the addition of initial precursors of $C_4$ and $C_5$ pathways in basal medium, as being 107 h and 262 h, respectively. 40 mg/l yield of ALA was observed by cell cultivation with the basal medium containing each 10 mM levulinic acid(LA) and glycine simultaneously.
ALA (5-aminolevulinic acid) has been proposed as a tetrapyrrole-dependent photodynamic herbicide by the action of the protoporphyrinogen IX oxidase (Protox IX). A study was conducted to determine photodynamic herbicidal effect of ALA on seedling growth of rice (Oryza sativa L.) and barnyard grass (Echinochloa crus-galli Beauv. var. oryzicola Ohwi) under dry and wet conditions. ALA effect on early plant growth of rice and barnyardgrass was greatly concentration dependant, suggesting that it promotes plant growth at very low concentration and inhibits at high concentration. No significant difference in herbicidal activity of biologically and synthetically produced ALAs on plant lengths of test plants was observed ALA exhibited significant photodynamic activity regardless of PSDIP and its duration. Significant shoot growth inhibition by ALA soaking treatment exhibited apparently, indicating that ALA absorbed through root system was translocated into shoot part of plants. ALA reduced plant heights of rice and barnyardgrass seedlings by 6% and 27%, respectively, showing more tolerant to ALA in rice under wet condition. Leaf thickness was reduced markedly by ALA with increasing of ALA concentration, due to mainly membrane destruction and severe loss of turgidity in mesophyll cells, although the epidermal was little affected. It was observed that photodynamic herbicidal activity of ALA applied by pre-and post-emergence application exhibited differently on plant species, and that the activity of ALA against susceptible plants was highly correlated with growing condition.
The present study was conducted to determine plant growth and physiological responses of corn, barnyardgrass, and soybean to ALA (5-aminolevulinic acid). ALA effect on early seedling growth of test plants was greatly concentration dependant, suggesting that it inhibits at higher concentrations. No significant difference in herbicidal activity of two types of ALA on plant height and weight of test plants was observed. Barnyardgrass was the most sensitive to ALA and followed by corn and soybean, indicating that both crop plants were less affected by ALA concentration as well as different growth stages than barnyardgrass. Greatly reduced chlorophyll contents from leaves of three plant species were observed with increasing of ALA concentration. Compared with untreated controls, higher amounts of three tetrapyrroles were detected from three crop plants, indicating more accumulation in ALA-treated plants. The differential selectivity among plant species would be explained with the differences in tetrapyrrole accumulating capabilities, the susceptibility of various greening groups of plant species to the accumulation of various tetrapyrroles, and their metabolism in various plant tissues. The results indicate that negative biological potential of ALA exhibited differently on plant species, and that the photodynamic herbicidal activity against susceptible plants highly correlated with the extent of tetrapyrrole accumulation by the species.
Journal of the Korea Organic Resources Recycling Association
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v.5
no.1
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pp.25-32
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1997
The effect of levulinic acid (LA) and biosynthetic precursors of ${\delta}$-aminolevulinic acid (ALA) on the production of extracellular ALA was examined for the cells of soil derived Rhodospirillum rubrum N-1 belonged to the genus Rhodospirillaceae. The extracellular yield of ALA was increased to 23 fold (45 mg/l) from the basal condition (Lascelles' medium without L-glutamate) by successive addition of LA at initial (10 mM) and mid-log stage (30 mM) of cell cultivation. In addition to initial/mid-log mutual supplementations of LA (10 mM/30 mM) and glutamate (30/30 mM), respectively, by means of alternative feeding 10 mM $C_4$-precursors at mid-log phase of culture the extracellular ALA content was reached to 75 mg/l (40 fold).
Objective: This study investigated the effects of 5-aminolevulinic acid (5-ALA) on the motility parameters, mitochondrial membrane depolarization, and ATP levels in chicken sperm. Methods: The pooled semen from Barred Plymouth Rock males was used. In the first experiment, the semen was diluted 4-times with phosphate-buffered saline (PBS (-)) containing various concentrations (0, 0.01, 0.05, and 0.1 mM) of 5-ALA, and then the sperm motility parameters after incubation were evaluated by computer-assisted sperm analysis (CASA). In the second experiment, the semen was diluted 4-times with PBS (-) containing 0.05 mM 5-ALA, and then sperm mitochondrial membrane depolarization and ATP levels after 1.5 h of incubation were analyzed with the MitoPT® JC-1 Assay and ATP Assay kits, respectively. In the third experiment, the semen was removed from the seminal plasma and resuspended with the mediums of PBS (-), PBS (-) supplemented with CaCl2 and MgCl2 (PBS (+)) + 5-ALA, PBS (+) + caffeine, and PBS (+) + caffeine + 5-ALA. Then, the sperm motility parameters after incubation were evaluated by CASA. In the last experiment, the semen was treated with the mediums of PBS (-), PBS (-) + 5-ALA, 5.7% glucose, 5.7% glucose + 5-ALA after removing the seminal plasma, and then the sperm motility parameters were evaluated by CASA. Results: The addition of 0.05 mM 5-ALA significantly increased the chicken sperm motility, progressive motility, linearity, average path velocity, curvilinear velocity, straight-line velocity, and the wobble. The sperm mitochondrial membrane depolarization was also increased by the 5-ALA treatment. The 5-ALA treatment decreased the sperm ATP levels. Both the caffeine treatment and glucose treatment decreased the sperm motility during incubation period. Conclusion: 5-ALA might increase sperm mitochondrial membrane depolarization to utilize the ATP for enhancing sperm movement.
${\delta}$-Aminolevulinic acid (ALA) is an endogenous metabolite formed in the mitochondria from succinyl-CoA and glycine, and plays a key role in the living body as an intermediate of the compound in the porphyrin biosynthesis pathway. ALA has been commonly used in photodynamic therapy for several years, because ALA is of interest as a biodegradable mediator, a growth regulator, and an effective agent used in dermatology. Here, we determined which ALA derivatives were the most effective for the inhibition of the cell proliferation and growth of human fibroblast. As a result, we found that the treatment of ALA derivatives including ALA, ALAP (ALA phosphate salt), MAL (Methyl 5-aminolevulinate hydrochloride salt), PBGL (phophobilinogen lactam) and PBGH (phophobilinogen-HCl) could attenuate cell proliferation of human fibroblast cells. Among them, PBGH was the most effective derivative. In addition, PBGH treatment could induce mitochondrial membrane depolarization, leading to cell death of human fibroblast. These results suggest that mitochondrial membrane depolarization induced by ALA and PBGH treatment might be responsible for inhibition of cell proliferation and death. Taken together, our results propose the possibility that PBGH can be used as one of the effective drugs in human skin disease, psoriasis.
Herbicidal activity of $\delta$-aminolevulinic acid(ALA), an intermediate for the biosynthesis of tetrapyrroles such as chlorophyll, heme, bacteriochlorophyll, and vitamin $\textrm{B}_{12}$ analogues, was examined to determine the variation in phytotoxic potential against different plant species as affected by different application methods. Seed-soaking treatment, ALA at low concentrations did not affect shoot and root lengths of test plants while at highest concentration reduced them by 20 to 30%. Alfalfa showed the most tolerant response to ALA in both pre- and post-emergence application, and followed by rice. When applied with pre-emergence, cotyledons of Chinese cabbage were severely bleached with 0.5 mM of ALA at 24 hrs after application, and root growth of rice, barnyard grass, and alfalfa was significantly inhibited with increasing of concentration. With post-emergence application, ALA at 2 to 4 mM reduced shoot and root growths of Chinese cabbage and barnyard grass completely. Herbicidal effects of ALA were more enhanced in the treatment combined with 2,2-dipyridyl sthan single application in barnyard grass and Chinese cabbage. The results suggest that alfalfa was the most tolerant to ALA among the tested plants, and that post-emergence application of ALA exhibited greatest photodynamic activity against tested plants.
Kim, Myung-Hwa;Kim, Jung-Mi;Kim, Hyun-Jeong;Lee, In-Seon;Kim, Kyung-Chan;Lee, Chang-Seop
KSBB Journal
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v.22
no.3
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pp.168-173
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2007
To clarify the usefulness of fluorescent diagnosis for cancer, we investigated the optimal method of administrating 5-aminolevulinic acid (5-ALA), 5-aminolevulinic acid methyl ester (ALA-methyl ester) by analyzing fluorescence signal of Protoporphyrin IX (PpIX) in the cultured normal and cancer cells. 5-ALA and ALA-methyl ester was injected as a photosensitizer to the cancer liver cells (HepG2) and normal liver cells (Chang). Chang and HepG2 cells were incubated with various concentrations of 5-ALA and ALA-methyl ester (0-800 ${\mu}g/mL$). The accumulation of PpIX induced by 5-ALA and ALA-methyl ester was in HepG2 and Chang. The cell viability was measured by MTT assay. Fluorescence of PpIX in HepG2 cell was excited at a wavelength ($\lambda$ = 410 nm) and showed an emission spectrum at 603.2 nm, 660.8 nm and 603.2 nm, 661.4 nm which could be related to the PpIX generation induced by the applied 5-ALA and ALA-methyl ester, respectively. The experimental results showed that fluorescence signal of PpIX was proportional to the concentration of 5-ALA and ALA-methyl ester in tumor cells, but measured with low concentration in normal cells. Another results showed that the PpIX formation rate induced by ALA-methyl ester is higher than that of 5-ALA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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