• Journal of Animal Science and Technology
• /
• 제54권2호
• /
• pp.103-109
• /
• 2012

본 연구는 기존 단독배양 위주로 이루어져온 세포배양 연구의 방법학적 한계의 극복과 대안을 제시하고자 지방과 근육세포주의 단독 및 공동배양에서 배양기법에 따른 지방 및 근육세포의 분화에 미치는 영향을 비교 조사하고자 실시하였다. 3T3-L1 (지방세포) 및 L6 (근육세포) 세포주는 성장배지인 10% FBS/DMEM (1% Pen-Strep solution 및 0.1% Fungizone 첨가) 하에서 48h 동안 단독배양 후 5% FBS/DMEM에서 배양하였다. 분화를 위한 단독 및 공동배양에서는 지방 및 근육세포 모두 분화유도물질 없이 2% FBS/DMEM으로 배양하였고, 공동배양에서는 $0.4{\mu}m$ insert membrane을 사용하여 6 well plate 하단에 L6 cell을, 상단에는 3T3-L1 cell을 공생시켰다. 지방 및 근육세포 분화정도 측정은 세포별 형태학적 측정과 glycerol-3-phosphate dehydrogenase (GPDH) 및 creatine kinase (CK) 분석을 통해 조사되었다. 형태학적으로 볼때 3T3-L1 세포주는 공동배양보다 단독배양 시 분화가 더욱 잘 일어났고 L6 세포주의 경우 역으로 같았다. 세포물질 분석에서는 분화배지 처리일(day 0)과 비교해 단독 및 공동배양 모두 지방세포 내 GPDH의 활성도가 유의적으로(P<0.05) 증가했음을 확인할 수 있었고 단독배양이 공동배양보다 유의적으로(P<0.05) 높은 수준의 GPDH 활성도를 보였다. L6 역시 마찬가지로 분화배지 처리일에 비하여 단독 및 공동배양 모두 CK 활성도가 유의적으로(P<0.05) 높았고, CK 활성도가 공동배양에서 유의적으로(P<0.05) 높게 나타남을 확인할 수 있었다. 이러한 결과는 기존 연구에서 이용된 단독 배양을 통한 세포 분화 결과 등은 생체와 비교 시 방법학적 한계로 인해 실제 생체 내에서는 그 분화정도가 매우 다를 것으로 생각되며, 이것은 앞으로 정확한 세포배양 결과 확보를 위해서는 단독배양보다는 공동배양기법을 사용해야 함을 의미한다. 향후 다양한 조건과 분화조절 물질들의 첨가를 통한 추가적인 공동배양실험이나 지방분화관련 분자생물학적 물질분석 등 다양한 실험 수행 시 보다 현실적이고 대량의 기초자료 확보가 가능할 것으로 판단된다.

• The Korean Journal of Pain
• /
• 제7권2호
• /
• pp.211-216
• /
• 1994

Celiac plexus block is performed to relieve intractable upper abdominal cancer pain. Generally, celiac plexus blocks have been performed under control of X-ray fluoroscopy to determine the position of the needle tip and the spread of contrast media. During the period from March 1992 to February 1994, we have performed 21 cases of neurolytic celiac plexus block to alleviate pain of intra-abdominal malignancy. We retrospectively evaluated the location of the needle tip and the spread of contrast media. P-A views of simple abdomen demonstrated the locations of the needle tip: 66.7% of the left needle tips were in upper 3/1 of L1 (6 cases) and $T_{12}-L_1$ interspace (8 cases), 50% of the right needle tips were in upper 1/3 of $L_1$, (6 cases) and $T_{12}-L_1$ interspace (4 cases). Contrast media from the right needle spread upward to middle 1/3 of $T_{10}$ (5 cases) and middle 1/3 of $T_{11}$ (5 cases), downward to middle 1/3 of $L_1$ (6 cases) and lower 1/3 of $L_1$ (3 cases). Contrast media from the left needle were spread upward to middle 1/3 of $T_{10}$ (5 cases) and evenly to other spaces, downward to middle 1/3 of $L_1$, (4 cases) and $L_1-L_2$ interspace (6 cases). We analyze the spread of contrast media according to distance from needle tip by authors score system. Contrast media of right needle spread upward 6.1 and downward 3.4, that of left needle spread upward 6.5 and downward 3.7.

• 대한한방소아과학회지
• /
• 제18권1호
• /
• pp.11-25
• /
• 2004

Objectives: These experimental studies were designed to investigate the effects of antler's extracts on the expression of leptin, IGF-l and IGF-1 receptor on cultured 3T3-L1 cells. Methods: A mouse adipoblast cell line, 3T3-L1, was cultured with or without a differentiation medium containing Isobutylmethylxanthin, Dexametasone and Insulin before adding extracts of antler of various concentratio(10, 50, ]00, 200${\mu}g/ml$). The expression of leptin and IGF-1 receptor was measured by western blot assay, and expression of IGF-1 was determined by F ACS analysis. Results and Conclusion: The 3T3-L1 cells' differentiation did not show a significant induction by extracts of antler. The expression of leptin was significantly decreased depend on antler's concentration. The expression of IGF-1 showed a slightly increase by extracts of antler, whereas that of IGF-receptor showed a tendency to increase. The total amount of intracellular triglyceride showed a tendency to diminish as the concentration of antler's extract increase.

• 생명과학회지
• /
• 제32권7호
• /
• pp.523-531
• /
• 2022

본 연구에서는 한방복합추출물(마황, 창출, 석고, 카카오닙스)을 제조하여, 추출물에 대한 항산화 활성 및 지방세포형성억제 활성을 확인하고자 하였다. 한방복합물의 항산화 활성을 확인하기 위하여 DPPH, ABTS⁺ radical 소거능 및 xanthine oxidase 저해 활성을 측정한 결과 추출물 1,000 ㎍/ml 농도에서 각각 75.0, 100.8 및 79.5%로 높은 소거능을 나타내었다. 3T3-L1 지방전구세포에서 한방복합물에 의한 지방형성 및 지방세포 분화 억제를 조사한 결과 0~50 ㎍/ml 농도에서 3T3-L1 세포 생존율에 영향을 미치지 않았다. 3T3-L1 지방전구세포에서 25, 50 및 75 ㎍/ml의 한방복합물 처리는 농도 의존적으로 지질 축적을 억제하였다. Western blot 실험 결과 한방복합물은 MDI 유도 분화 3T3-L1 세포에서 분화 전사인자인 PPARγ, C/EBPα 을 75 ㎍/ml 농도에서 각 44.2, 76.6% 억제함을 나타내었다. 또한, 지방산 합성 조절 인자인 FAS의 발현도 억제하였다. 이와 같은 결과를 바탕으로 본 연구는 항비만 기능성 소재로서 한방복합추출물의 활용 가능성을 제시해 줄 수 있을 것으로 사료 된다.

• Food Science and Biotechnology
• /
• 제18권6호
• /
• pp.1500-1504
• /
• 2009

Effects of methanol extract from turmeric (Curcuma longa L.) (CME) on underlying mechanisms of lipolysis were investigated in 3T3-L1 adipocytes. Compared to the control, lipid accumulation with 72 hr treatment of CME at the concentration $20\;{\mu}g/mL$ was significantly decreased by 19.9% as quantified by Oil red O dye. Intracellular triglyceride (TG) content was also lowered by 19.3%. To determine the mechanism for TG content reduction, glycerol release level was measured. Incubation of 3T3-L1 adipocytes with 15 and $20\;{\mu}g/mL$ of CME significantly elevated the level of free glycerol released into the cultured medium by 20.4 and 28.6%, respectively. In subsequent measurements using quantitative real-time polymerase chain reaction (PCR), mRNA levels of hormone-sensitive lipase (HSL) and adipose triglyceride lipase (ATGL) were significantly increased by 21.2 and 24.9%, respectively, at the concentration $20\;{\mu}g/mL$. Results indicated that CME stimulated lipolysis through induction of HSL and ATGL mRNA expressions, resulting in increased glycerol release.

• 한국식품저장유통학회지
• /
• 제22권5호
• /
• pp.744-750
• /
• 2015

본 연구에서는 연화 열수 및 에탄올 추출물의 3T3-L1 지방세포 분화 및 ROS생성 저감효과를 구명하기 위하여 3T3-L1 전지방세포 분화과정 중 연화 열수 및 에탄올 추출물에 의한 지방축적과 ROS 생성을 관찰하였다. 연화 열수 및 에탄올 추출물은 XTT assay에서 100, 200 및 $400{\mu}g/mL$ 농도에서 세포 독성을 보이지 않았다. 지방세포 분화 중 세포 내 지방축적 및 ROS 생성량을 비교한 결과, 연화 열수 및 에탄올 추출물을 처리한 지방세포의 경우 지방축적량과 ROS 생성량 모두 유의적으로 억제되는 것으로 나타났다. 특히 연화 열수 및 에탄올 추출물을 처리함으로써 지방세포분화와 관련된 전사인자인 $PPAR{\gamma}$, $C/EBP{\alpha}$ 및 aP mRNA의 발현을 유의적으로 감소시켰으며, ROS의 생성과 관련이 있는 주요 유전자인 NOX4 및 catalase의 유전자발현 또한 유의적으로 감소하였다. 이 결과를 통해 연화 열수 및 에탄올 추출물이 3T3-L1 지방세포 내 중성지방의 축적 억제효과와 더불어 ROS 생성 억제에 효과적으로 작용함을 확인하였다. 따라서 연화 열수 및 에탄올 추출물은 비만과 같은 대사증후군 관련 질환의 개선을 위한 천연물 기능성 소재로의 활용이 기대된다.

• 동의생리병리학회지
• /
• 제18권2호
• /
• pp.451-456
• /
• 2004

Based on the data from our previous studies, four new diabetic remedies were composed with the addition of Coicis Semen into Okchun-san (OCH), Commelinae Herba into Gangsim-tang (GST) , Scrophulariae Radix into Sunki-san (SKS), and Erythrinae Cortex into Yukmijihuang-hwan (YMG). The water extracts of these new remedies were treated in 3T3-L1 fibroblasts and adipocytes in order to investigate insulin-like substances and insulin sensitizers, respectively. With and without differentiation inducers, unmodified SKS (SKS-O) treatment induced 3T3-L1 fibroblasts into adipocytes more than the control. However, without inducers, YMG treatment, but not SKS, induced the differentiation more than the control among modified remedies. Without inducers, SKS, OCH as well as YMG increased the induction of differentiation from 3T3-L1 fibroblasts into adipocytes, compared to the control. The treatment of OCH and YMG with 1 ng/mL insulin increased glucose uptake much more than only insulin 1 ng/mL treatment. Thus, OCH and YMG contained increased insulin actions. In conclusions, the modified remedies, OCH and YMG, contained insulin-like substances and insulin sensitizers, and they can be improved the hypoglycemic effects.

• Molecules and Cells
• /
• 제28권2호
• /
• pp.111-117
• /
• 2009

The CHRM3 gene is a member of the muscarinic acetylcholine receptor family that plays important roles in the regulation of fundamental physiological functions. The evolutionary mechanism of exon-acquisition and alternative splicing of the CHRM3 gene in relation to transposable elements (TEs) were analyzed using experimental approaches and in silico analysis. Five different transcript variants (T1, T2, T3, T3-1, and T4) derived from three distinct promoter regions (T1: L1HS, T2, T4: original, T3, T3-1: THE1C) were identified. A placenta (T1) and testis (T3 and T3-1)-dominated expression pattern appeared to be controlled by different TEs (L1HS and THE1C) that were integrated into the common ancestor genome during primate evolution. Remarkably, the T1 transcript was formed by the integration event of the human specific L1HS element. Among the 12 different brain regions, the brain stem, olfactory region, and cerebellum showed decreased expression patterns. Evolutionary analysis of splicing sites and alternative splicing suggested that the exon-acquisition event was determined by a selection and conservation mechanism. Furthermore, continuous integration events of transposable elements could produce lineage specific alternative transcripts by providing novel promoters and splicing sites. Taken together, exon-acquisition and alternative splicing events of CHRM3 genes were shown to have occurred through the continuous integration of transposable elements following conservation.

• 대한한의학방제학회지
• /
• 제14권2호
• /
• pp.76-85
• /
• 2006

Objectives : We Investigated the effect of Dioscoreae Rhizoma(山藥) on the change of the corticosterone and the rectal temperature(直腸溫渡) of the mice induced by starvation stress(創戰 스트레스). Methods : After administration of Dioscoreae Rhizoma (0.25g/kg, 0.5g, 1.0g/kg, 3g/kg) three times, mice were starved. The corticosterone and rectal temperature were measured after 36.5 hours starvation stress. Results : The plasma cortiosterone levels in the S-2, S-3 and S-4 group were decreased significantly comparing with the control group (P<0.01) after 36.5 hours starvation stress. and rectal temperature was decreased in the control goup comparing with the normal group, but there is no significant change in the Dioscoreae Rhizoma treated group. Conclusion : it might be recognized that Dioscoreae Rhizoma has preventive-effect against starvation stress and also it might be needed further study in various viewpoints. Objectives : This study was disegned to elucidate the short term effect of Rossa rugosae Radix on proliferation. differentiation and maturation of 3T3-L1 Preadipocyte. Methods: 3T3-L1 preadipocytes obtained from Korean Cell Line Bank were cultured in a D ulbecco’ s modified eagle medium(MEM) culture solution containing 10% fetal bovine serum(FBS) and various concentrations of aqueous extract of Rossa rugosae Radix.. The short term effect of the extract of Rossa rugosae Radix on proliferation. differentiation and maturation of 3T3-L1 preadipocytes were investigate after treatment for 24 hours by measuring MTT. Oil Red 0 and latate dehydrogenase activity.. Results: The Rossa rugosae Radix extract inhibited significantly the proliferation of 3T3-L1 preadipocytes and tended to increase latate dehydrogenase activity in the media of differentiated 3T3-L1 preadipocytes & matured 3T3-L1 preadipocytes. the extract also inhibit the lipid accumulation of differentiated 3T3-L1 preadipocytes & matuered 3T3-L1 preadipocytes. Conclusions: These results demonstrated that the Rossa rugosae Radjx extract inhibited the proliferation. differentiation and maturation of 3T3-L1 preadipocytes. suggesting that Rossa rugosae Radix has anti-obesity effect: however further in vivo study is needed to demonstrate its pharmacological effects.

• 한국식품저장유통학회지
• /
• 제30권3호
• /
• pp.502-513
• /
• 2023

본 연구에서는 영지버섯 균사체 발효 꾸지뽕 잔가지 추출물의 지방세포 분화 억제 및 염증 억제 효과를 확인하고자 하였다. 세포독성을 확인한 결과, 최대 1,000 ㎍/mL 농도까지 세포에 처리하여도 세포 생존율이 감소하지 않음을 확인되었다. 분화과정 동안 발효 꾸지뽕 잔가지 추출물을 처리하였을 때, 세포 내 지방 축적이 감소되었다. 분화과정에 관여하는 대표적인 adipokine인 leptin과 adiponectin의 생성량을 확인한 결과, 발효 꾸지뽕나무 잔가지 추출물에 의해 adiponectin의 생성 증가와 leptin의 생성 감소를 확인하였다. 지방세포 분화 관련 유전자의 발현은 분화 유도인자만 처리한 군에 비해 발효 꾸지뽕나무 잔가지 추출물이 함께 처리된 군에서 추출물의 농도가 높아질수록 지방분화 전사인자인 PPARγ와 C/EBPα의 발현량이 감소하는 것을 확인하였다. 분화된 3T3-L1 세포에서 LPS에 의해 분비되는 염증성 사이토카인(TNF-α, IL-6, MCP-1)의 생성량 변화를 측정한 결과, LPS 처리로 증가된 염증성 사이토카인의 생성을 억제하였으며 염증 관련 유전자인 iNOS, COX-2의 발현도 감소되었다. 또한, 발효 꾸지뽕나무 잔가지 추출물과 발효되지 않은 꾸지뽕나무 잔가지 추출물을 비교하였을 때, 발효 꾸지뽕나무 잔가지 추출물이 지방세포 분화 및 염증 억제 효과에서 더 높은 활성을 보였으며, 이들 결과를 종합적으로 볼 때, 영지버섯 균사체를 이용한 발효가 꾸지뽕나무 잔가지의 활성 증가에 기여하는 것으로 보인다. 따라서 발효 꾸지뽕나무 잔가지 추출물은 항비만, 항염증 소재로서 비만뿐만 아니라 대사성 질환 개선을 위한 기능성 소재로서 활용이 가능할 것으로 판단되며, 향후 발효 꾸지뽕나무 추출물의 명확한 항비만, 항염증 효능을 확인하기 위해서는 유용 물질 분리 및 작용기전 등 추가적인 연구가 필요할 것으로 판단된다.