Streptococcus pneumoniae is a major cause of invasive infection in young infants and older adults. There are currently 90 capsular serotypes identified and 23 serotypes (1, 2, 3, 4, 5, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19F, 19A, 20, 22F, 23F, and 33F) are responsible for about 90% of invasive disease. Among the more than 90 different S. pneumoniae serotypes, serotype 19A is globally very prevalent. A simplified purification procedure including adjustment of cell lysate pH to 4.5, fractionation with 50. 80% ethanol, and dialysis rendered capsular polysaccharide (CPS) in a yield of $31.32{\pm}3.11$ mg from 1 l culture (75% recovery after lyses). The product contained only 69.6 ${\mu}g$ of protein (99.78% purity) and 0.8mg (sum of the precipitants from 50~60%, 60~70%, and 70~80%) of nucleic acid (97.45% purity). The purified CPS was conjugated with bovine serum albumin; the product size ranged from 100 to 180 kDa.
Lee, Da-Young;Graves, Michael V.;Van Etten, James L.;Choi, Tae-Jin
The Plant Pathology Journal
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v.21
no.4
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pp.334-342
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2005
The prototype Chlorella virus PBCV-l encodes 11 tRNA genes and over 350 protein-encoding genes in its 330 kbp genome. Initial attempts to overexpress the recombinant A189/192R protein, a putative virus attachment protein, in E. coli strain BL21(DE3) SI were unsuccessful, and multiple protein bands were detected on Western blots. However, the full-length A189/192R recombinant protein or fragments derived from it were detected when they were expressed in E. coli BL21 CodonPlus (DE3) RIL, which contains extra tRNAs. Codon usage analysis of the a189/192r gene showed highly biased usage of the AGA and AVA codons compared to genes encoded by E. coli and Chlorella. In addition, there were biases of XXA/U($56\%$) and XXG/ C($44\%$) in the codons recognized by the viral tRNAs, which correspond to the codon usage bias in the PBCV-1 genome of XXA/U ($63\%$) over those ending in XXC/G ($37\%$). Analysis of the codon usage in the major capsid protein and DNA polymerase showed preferential usage of codons that can be recognized by the viral tRNAs. The Asn (AAC) and Lys (AAG) codons whose corresponding tRNA genes are duplicated in the tRNA gene cluster were the most abundant (i.e., preferred) codons in these two proteins. The tRNA genes encoded in the PBCV-l genome seem to play a very important role during the synthesis of viral proteins through supplementing the tRNAs that are frequently used in viral proteins, but are rare in the host cells. In addition, these tRNAs would help the virus to adapt to a wide range of hosts by providing tRNAs that are rare in the host cells.
Kim, Da Young;Yoo, Jung Sik;Cho, Yoon Ah;Yoon, Ho Sik;Kim, Cheol-Hyun
Food Science of Animal Resources
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v.41
no.4
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pp.687-700
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2021
This study performed to evaluate the applicability of functional dairy food materials by comparing the calcium solubilization ability and anti-inflammatory effects of hydrolyzed casein protein. Commercial enzyme (Alcalase®; Neutrase®; Protamex®; Flavourzyme®) was added to the 10% casein solution to prepare the casein hydrolysates. Samples obtained every hour [1:200 (w/v)]. According to results of measuring the degree of hydrolysis (DH), all of four enzymatic hydrolysates increased rapidly from 30 to 40 min, and after 150 min, there were no change. Protamex® and Neutrase® had the highest DH compared to others enzymatic hydrolysates. After that, peptides obtained throughout a preparative liquid chromatography system. In the calcium solubility experiments, neutrase fraction (NF) 4 and NF7 showed similar activities with casein phosphopeptide (CPP). In vitro cell experiments showed that no cytotoxicity except for NF6. Also, the production of nitric oxide (NO) inhibited as the concentration of fraction samples increased. The cytokine (IL-1α, IL-6, and TNF-α) production was lower than lipopolysaccharide (+) group significantly. Therefore, the possibility of anti-inflammatory activity found in the hydrolyzed samples. According to the above experiments, NF3 and Protamex Fraction (PF) 3 selected. Amino acids selected throughout an AccQ-Tag system. As a result, 17 species of amino acids and several species of unknown amino acids identified. Both fractions had the highest content of phenylalanine. This study identified the potential of biologically active and functional peptides derived from casein that affect the food and dairy industry.
Sea cucumber, Holothuria scabra, is a well-known traditional Asian medicine that has been used for suppressing inflammation, promoting wound healing, and improving immunity. Moreover, previous studies demonstrated that the extract from H. scabra contains many bioactive compounds with potent inhibitory effect on tumor cell survival and progression. However, the effect of the methanolic extract from the body wall of H. scabra (BWMT) on human prostate cancer cells has not yet been investigated. In this study, we aimed to investigate the effects and underlying mechanism of BWMT on prostate cancer cell viability and metastasis. BWMT was obtained by maceration with methanol. The effect of BWMT on cell viability was assessed by MTT and colony formation assays. The intracellular ROS accumulation was evaluated using a DCFH-DA fluorescence probe. Hoechst 33342 staining and Annexin V-FITC/PI staining were used to examine the apoptotic-inducing effect of the extract. A transwell migration assay was performed to determine the anti-metastasis effect. BWMT significantly reduced cell viability and triggered cellular apoptosis by accumulating intracellular ROS resulting in the upregulation of JNK and p38 signaling pathways. In addition, BWMT also inhibited the invasion of PC3 cells by downregulating MMP-2/-9 expression via the ERK pathway. Consequently, our study provides BWMT from H. scabra as a putative therapeutic agent that could be applicable against prostate cancer progression.
Lichenase is an enzyme mainly implicated in the degradation of polysaccharides in the cell walls of grains. Emerging evidence shows that a highly efficient expression of a thermostable recombinant lichenase holds considerable promise for application in the beer-brewing and animal feed industries. Herein, we cloned a lichenase gene (CelA203) from Bacillus subtilis B110 and expressed it in E. coli. This gene contains an ORF of 729 bp, encoding a protein with 242 amino acids and a calculated molecular mass of 27.3 kDa. According to the zymogram results, purified CelA203 existed in two forms, a monomer, and a tetramer, but only the tetramer had potent enzymatic activity. CelA203 remained stable over a broad pH and temperature range and retained 40% activity at 70℃ for 1 h. The Km and Vmax of CelA203 towards barley β-glucan and lichenan were 3.98 mg/ml, 1017.17 U/mg, and 2.78 mg/ml, 198.24 U/mg, respectively. Furthermore, trisaccharide and tetrasaccharide were the main products obtained from CelA203-mediated hydrolysis of deactivated oat bran. These findings demonstrate a promising role for CelA203 in the production of oligosaccharides in animal feed and brewing industries.
Kim, Dong Wook;Park, DaSom;Ko, Chang Hyun;Shin, Kwangsoo;Lee, Yun-Sung
Journal of Electrochemical Science and Technology
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v.12
no.2
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pp.237-245
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2021
Atomic layer deposition (ALD) enhances the stability of cathode materials via surface modification. Previous studies have demonstrated that an Ni-rich cathode, such as LiNi0.8Co0.1Mn0.1O2, is a promising candidate owing to its high capacity, but is limited by poor cycle stability. In this study, to enhance the stability of the Ni-rich cathode, synthesized LiNi0.8Co0.1Mn0.1O2 was coated with Al2O3 using ALD. Thus, the surface-modified cathode exhibited enhanced stability by protecting the interface from Ni-O formation during the cycling process. The coated LiNi0.8Co0.1Mn0.1O2 exhibited a capacity of 176 mAh g-1 at 1 C and retained up to 72% of the initial capacity after 100 cycles within a range of 2.8-4.3 V (vs Li/Li+. In contrast, pristine LiNi0.8Co0.1Mn0.1O2 presented only 58% of capacity retention after 100 cycles with an initial capacity of 173 mAh g-1. Improved cyclability may be a result of the ALD coating, which physically protects the electrode by modifying the interface, and prevents degradation by resisting side reactions that result in capacity decay. The electrochemical impedance spectra and structural and morphological analysis performed using electron microscopy and X-ray techniques establish the surface enhancement resulting from the aforementioned strategy.
Tae Jin Kim;Min Jae Kim;Bong Sin Kim;Ji Yeon Yoo;Yun Ji Kang;Jeong Hwan Kim
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.50
no.3
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pp.319-327
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2022
γ-Aminobutyric acid (GABA) is a multi-functional compound with broad applications for food industry. GABA producing bacteria were isolated from cabbage kimchi. Among them, B737 was the best GABA producer when culture supernatants were analyzed by TLC. B737 was identified as Levilactobacillus brevis by 16S rRNA gene sequencing. Its glutamate decarboxylase (GAD) gene was cloned by PCR and the nucleotide sequence determined. B737 GAD consisting of 485 amino acids is the largest in size among GADs reported from LAB so far. gadB from L. brevis B737 was overexpressed in Escherichia. coli BL21(DE3) using pET26b(+).pET26b(+). The recombinant GAD was purified and its size was 55 kDa by SDS-PAGE. Maximum GAD activity was observed at pH 5 and 40℃ and the activity was dependent on pyridoxal 5'-phosphate. Km and Vmax of recombinant GAD were 6.2 ± 0.06 mM and 0.34 ± 0.002 mM/min, respectively. L. brevis B737 can be used as a starter for fermented foods with high GABA contents.
The demand for energy is steadily rising because of rapid population growth and improvements in living standards. Consequently, extensive research is being conducted worldwide to enhance the energy supply. Transpiration power generation technology utilizes the vast availability of water, which encompasses more than 70% of the Earth's surface, offering the unique advantage of minimal temporal and spatial constraints over other forms of power generation. Various principles are involved in water-based energy harvesting. In this study, we focused on explaining the generation of energy through the streaming potential within the generator component. The generator was fabricated using sugar cubes, PDMS, carbon black, CTAB, and DI water. In addition, a straightforward and rapid manufacturing method for the generator was proposed. The PDMS generator developed in this study exhibits high performance with a voltage of 29.6 mV and a current of 8.29 µA and can generate power for over 40h. This study contributes to the future development of generators that can achieve high performance and long-term power generation.
This study was conducted to investigate the effects of watching a virtual reality (VR) forest video on stress reduction in adults. Experiments were performed in an artificial climate chamber where temperature, humidity and illumination were controlled. To cause stress in subjects, the subjects were asked to multiply two digit numbers by one digit numbers for two minutes. The subjects then watched a VR forest video for five minutes. During the experiment, the heart rate variability (HRV) and heart rate (HR) of subjects were continuously measured for evaluating their physiological state. After measuring the baseline and watching a VR forest video, their psychological state was evaluated using the profile of mood state (POMS), semantic differential (SD) method, and positive affect and negative affect schedule (PANAS). The results of physiological evaluation after watching a VR forest video showed a decrease in the stress index and HR, an increase in the activity of the parasympathetic nervous system, and the standard deviation of normal to normal RR intervals (SDNN). The results of psychological assessment confirmed that watching a VR forest video induced "comfort", "natural", and "soothed" feelings in subjects. In addition, watching a VR forest video decreased "tension-anxiety (T-A)", "depression-dejection (D)", "anger-hostility (A-H)", "fatigue (F)", "total mood disturbance (TMD)", and increased "vigor (V)" compared to the base line, and decreased "negative affect" and increased "positive affect." These results indicate that watching a VR forest video decreases adults' stress index, stabilizes physiological state, and has a positive impact on psychological state. The findings of this study can serve as a basis for providing forest welfare services to people in the blind spots of forest welfare, and can lay a foundation for the adoption of VR, one of the technologies of the fourth industrial revolution in forestry.
Lee, Geon Ho;Kang, Hyo Seok;Choi, Byoung Joon;Park, Sang Jun;Jung, Da Ee;Lee, Du Sang;Ahn, Min Woo;Jeon, Myeong Soo
The Journal of Korean Society for Radiation Therapy
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v.29
no.2
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pp.19-26
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2017
Objectives: In the Lung, the VMAT rotates continuously and examines radiation. That increases the low doses to normal lung. Due to that, the incidence of radiation pneumonia among radiation side effects may increase. The cause of radiation pneumonia is the lower dose area of the lungs. The H-VMAT was applied to patients who applied to reduce radiation in the lower doses of the lungs. We wanted to assess the usefulness of the H-VMAT by comparing the radiation doses to the low dose areas of the lungs and the normal organs. Materials and Methods: A total of 26 patients who applied for a H-VMAT procedure were applied to the patient. The prescription dose applied to total dose 44 Gy from 22 divisions. For each patient, a plan was implemented with Conventional RT, VMAT and H-VMAT. Conventional RT was carried out in four to five fields each, considering the size, location, shape, and location of the PTV. In the case of a VMAT plan, the two Half ARC, three Half ARC method and the two Full ARC were planned. The H-VMAT was planned by adding two Static fields in the VMAT, taking into account the dose of the lung and the tolerance dose of the organs. Results: In the NSCLC, the lung doses $V_5$ and $V_{10}$ of the lungs except for the treatment plan volume were the lowest with $55.40{\pm}13.39%$ and $32.05{\pm}11.37%$ of H-VMAT. And, in the SCLC, the lung doses of V5 and V10 were the lowest at $64.32{\pm}16.15%$ and $35.50{\pm}9.91%$, respectively. The spinal dose of VMAT in NSCLC was $21.15{\pm}4.02Gy$, which was 7.94 Gy lower than other treatment methods. The lowest spinal dose was delivered at $19.72{\pm}1.82Gy$ for SCLC. The mean dose delivered to the esophagus was also $17.44{\pm}2.04Gy$ and $17.84{\pm}9.20Gy$ in SCLC and NSCLC, respectively. Conclusion: When comparing the value of the surrounding normal organ dose, the VMAT showed that less doses were transmitted from the heart, esophagus and spinal cord than the rest of the treatment plan. However, it was similar to VMAT in normal organs except for the spinal cord. VMAT has increased doses of some normal organs but did not exceed the tolerance dose. It showed a low value in $V_5$, $V_{10}$. When comparing Conventional RT, VMAT, and H-VMAT, If the dose to the heart, esophagus and spinal cord is lower than the tolerance dose, it is thought to reduce the incidence of radiation pneumonia by applying H-VMAT that show the benefits of low doses of the lungs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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