• 제목/요약/키워드: 28S rDNA sequence

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융합단백질로 발현된 톡소포자충의 주요막단백질(p30) 절편의 항원성 (Analysis of antigenic domain of GST fused major surface protein (p30) fragments of Toxoplasma gondii)

  • 남호우;임경심
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제34권2호
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    • pp.135-142
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    • 1996
  • 톡소포자충(Toxoplosma gondii) 주요막단백질의 하나인 30 kDa 단백질(p30)의 항원부위를 결정하고자 p30의 아미노산 분석에 따른 친수성 부위 및 혐수성 부위에 맞게 유전자를 증폭하고 발현시켜 항원성을 검토하였다 p30의 절편으로는 p30 전체 p30의 N-말단 Signal Sequence와 C- 탈단의 혐수성 부위를 제거한 S28. S28의 N-말단 2/3부위인 Al9. S28의 C-말단 2/3부위인 Pl9. 528의 N-탈난 1/3부위인 X9 중앙 1/3부위인 Y10 및 C-말단 1/5부위인 Z9로 구성하였다. 각절편에 대한 primer에는 EcoR I의 clampsequence를 포함시켜 중합효소반응으로 증폭시켰으며 G57를 발현하는 pGEX-4T-1 vector에 삽입시킨 후 Eschericha coli(.JM105 strain)에 형질변형시키고 IgG로 각 절편이 GST와 융합단백질로 발현되도록 하였다 SDS-PAGE상에서 p30은 63 kDa. S28는 54 kDa Al9과 Pl9은 각각 45 kDa. X9은 35 kDa. Y10은 36 kDa 및 29은 35 kDa 단백질로 발현되었다. 각각의 단백질은 westemblot상에서 GSTdetectionkit와 잘 반응하여 융합단백질임을 확인하였다. 톡소포자충증 환자 혈청과 westem blot에서 p30. S28 및 Al9은 반응하여 항원성이 인정되었으나 Pl9 . X9, Y10 및 Z9는 반응하지 않았다 따라서. p30의 중간 1/3 부위의 존재하에 N-말단 1/3부위가 항원성을 나타내는 구조적 항원이거나. 첫 1/3부위와 중 간 1/3부위의 경계에 위치한 polypeptide가 항원성을 발현하는 것으로 추정되었다.

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Morphological and Multigene Sequence Characteristics of Talaromyces variabilis Isolated from Soil in Korea

  • Adhikari, Mahesh;Kim, Sang Woo;Lee, Hyang Burm;Lee, Youn Su
    • 한국균학회지
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    • 제49권1호
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    • pp.11-19
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    • 2021
  • In 2017, Talaromyces variabilis was isolated during a survey of fungal diversity in field soils in Korea. This isolate was described based on its morphological and molecular characteristics and it was identified molecularly using the partial 18S-ITS1-5.8S-ITS2-28S rDNA region and calmodulin (CaM)-encoding gene sequence data. Thus, this study reported morphological and multigene sequence characterization of T. variabilis.

Identification of Aspergillus Strain with Antifungal Activity Against Phytophthora Species

  • KANG SUNG WOO;HONG SUK IN;KIM SEUNG WOOK
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제15권2호
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    • pp.227-233
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    • 2005
  • Fungal strain CGF was isolated from the soil of ChungNam Province, South Korea. Based on the 28S rDNA sequence analysis and the sequence of the internal transcribed spacer (ITS) region of ribosomal DNA, together with morphological and cultural characteristics, this strain was identified as Aspergillus sclerotiorum and renamed Aspergillus sclerotiorum CGF. This is the first strain of Aspergillus sclerotiorum identified in Korea. When the antifungal activity of A. sclerotiorum CGF was evaluated, among the phytopathogenic fungi, mycelial growth of only Phytophthora species was inhibited. Oermination of P. capsid zoospore was also inhibited. The bioactive compound of A. sclerotiorum CGF was highly thermo- and pH-stable.

Morphological and genetic characterization and the nationwide distribution of the phototrophic dinoflagellate Scrippsiella lachrymosa in the Korean waters

  • Lee, Sung Yeon;Jeong, Hae Jin;You, Ji Hyun;Kim, So Jin
    • ALGAE
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    • 제33권1호
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    • pp.21-35
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    • 2018
  • The phototrophic dinoflagellate genus Scrippsiella is known to have a worldwide distribution. Here, we report for the first time, the occurrence of Scrippsiella lachrymosa in Korean waters. Unlike the other stains of S. lachrymosa whose cultures had been established from cysts in the sediments, the clonal culture of the Korean strain of S. lachrymosa was established from motile cells. When the sulcal plates of S. lachrymosa, which have not been fully described to date, were carefully examined using scanning electron microscopy, the Korean strain of S. lachrymosa clearly exhibited the anterior sulcal plate (s.a.), right sulcal plate (s.d.), left sulcal plate (s.s.), median sulcal plate (s.m.), and posterior sulcal plate (s.p.). When properly aligned, the large subunit (LSU) rDNA sequence of the Korean strain of S. lachrymosa was ca. 1% different from those of two Norwegian strains of S. lachrymosa, the only strains for which LSU sequences have been reported. The internal transcribed spacer (ITS) rDNA sequence of the Korean strain of S. lachrymosa was also ca. 1% different from those of the Scottish and Chinese strains and 3% different from those of the Canadian, German, Greek, and Portuguese strains. Thus, the Korean S. lachrymosa strain has unique LSU and ITS sequences. The abundances of S. lachrymosa in the waters of 28 stations, located in the East, West, and South Sea of Korea, were quantified in four seasons from January 2016 to October 2017, using quantitative real-time polymerase chain reaction method and newly designed specific primer-probe sets. Its abundances were >$0.1cells\;mL^{-1}$ at eight stations in January and March 2016 and March 2017, and its highest abundance in Korean waters was $26cells\;mL^{-1}$. Thus, S. lachrymosa has a nationwide distribution in Korean waters as motile cells.

부산 기장에서 채집된 말미잘의 분자생물학적 방법을 이용한 동정 (Molecular Identification of a Sea Anemone (Cnidaria: Anthozoa: Actiniaria) Obtained in Gijang, Busan)

  • 유상준;김도형
    • 한국수산과학회지
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    • 제50권4호
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    • pp.447-452
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    • 2017
  • In this study, we tried to identify a sea anemone collected from the coast of Gijang, Busan. The anemone was morphologically similar to species belonging to the genus Anthopleura, but its morphological characteristics did not allow for confirmed identification to species level. Multiple genes from mitochondrial cytochrome oxidase III, 12S and 16S rRNA, and nuclear 18S and 28S rRNA, were amplified for multilocus sequence typing (MLST) analysis using genomic DNA extracted from the sampled anemone and a different primer set. Based on the MLST analysis, the anemone obtained in this study was identified as Anthopleura artemisia. Also, the sequence of internal transcribed spacer-2 was most closely related to A. artemisia, indicating that this single region might be useful for anemone identification. This study shows significance of molecular identification for sea anemones, and will be helpful in studies of sea anemone identification using genotyping-by-sequencing.

느티만가닥버섯에서 감마선에 의한 돌연변이체들의 유전적 변이 (Genetic Variation in Mutants Induced by Gamma Ray in Hypsizigus marmoreus)

  • 김종봉;유동원
    • 생명과학회지
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    • 제24권11호
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    • pp.1174-1179
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    • 2014
  • 본 연구는 감마선이 새로운 품종의 버섯을 개발하는데 이용 될 수 있는지 평가하기 위하여 수행하였다. 본 연구를 한국, 일본, 대만 등의 느티만가닥버섯 20종류, 한국 잿빛느티만가닥버섯 5종류, 일본 땅지만가닥버섯 등의 3품종과 돌연변이체의 유전적 변이를 분석하였다. 50~2,000 Gy의 감마선을 느티만가닥버섯 포자에 조사하였다. 포자를 이용한 돌연변이 유발의 감마선 적정선량은 50~500 Gy의 저준위선량이었다. 돌연변이 단핵균사를 교배하여 이핵균주를 만들었다. 돌연변이 균주와 재래종의 버섯들로부터 DNA를 추출하여 16S ribosomal DNA, ITS의 전부분 28S ribosomal DNA의 일부분이 포함된 ITS서열을 분석을 하였다. 분석한 ITS서열의 길이는 1,052~1,143 뉴클레오티드였다. Nei-Li's 방법에 의해 유전적 유연 관계계를 분석하였다. 느티만가닥버섯 품종들간의 비유사도는 0~3.5%였다. 또한 Neighbor-Joining (NJ)방법에 의해 계통수를 작성하였다. 그 결과 느티만가닥버섯의 품종간의 비유사도는 0~3.5%였다. 또한 23품종과 5 돌연변이 이 그룹의 ITS서열을 바탕으로 한 계통순는 12 cluster를 나타내었다. 돌연변이 균주들은 서로 다른 cluster를 형성하였다. 무작위적인 돌연변이가 발생하였음을 알 수 있었다. 이상의 연구결과들을 감마선이 버섯의 품종개량을 위한 수단이 될 수 있음을 보여주었다.

rDNA의 ITS II 부위의 염기서열분석에 의한 느타리버섯 종간의 근연관계 (Phylogenetic Relationships Among Pleurotus species Inferred from Sequence Data of PCR Amplified ITS II Region in Ribosomal DNA)

  • 배신철;성기영;이신우;고승주;은무영;이인구
    • 한국균학회지
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    • 제24권2호통권77호
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    • pp.155-165
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    • 1996
  • 느타리 버섯속 6종 23균주에 대한 rDNA의 ITS II 부위의 DNA 염기서 열을 비교 분석함으로서 종간 및 종내의 근연관계를 조사하였다. rDNA의 ITS II 부위를 증폭하고자 5.8S rDNA의 3'말단 부위와 285 rDNA의 5'말단 부위에 두개 프라이머를 이용하여 PCR증폭을 행하였다. 느타리버섯 6종의 게놈 DNA로 부터 ITS II 부위를 증폭한 결과 종에 따라 밴드 길이에 차이가 있었으며 ITS II 부위의 길이 차이로 느타리 버섯 6종을 구분할 수 있었다. 같은 종내 개체간 구분을 위하여 느타리 버섯 6종 23균주의 PCR 증폭 결과는 느타리버섯(P. ostreatus) ASI 2096, ASI 2025와 노랑 느타리 버섯(P. cornucopiae) ASI 2038 균주외에 동일 종내 균주의 ITS II 길이는 동일한 양상을 보였다. 느타리 버섯 6종 및 ASI 2095, ASI 2025 그리고 ASI 2038에 대한 ITS II 부위의 염기서열을 비교해 보면 염기서열의 변이가 ITS II 부위가 시작되는 부분과 말단 부분에서 주로 존재하였다. ASI 2095와 ASI 2025 균주들은 동일 종내 느타리 버섯(P. ostreatus, ASI 2001) 균주와 ASI 2038와 ITS II 부위의 DNA 염기서열에 차이를 보였다. 이들 염기서열을 기초로 하여 Neighbor program을 이용한 균주간 유연관계는 느타리 버섯(P. ostreatus), 사철 느타리 버섯(P. florida), 여름 느타리 버섯(P. cornucopiae) 그리고 맛 느타리 버섯(P. eryngii)들이, 노랑 느타리 버섯(P. cornucopiae)과 호고 느타리 버섯(P. cystidious)이 각각 서로 가까운 유연관계를 나타내었으나 ASI 2025와 ASI 2038 균주 들은 특이한 계통분지를 나타내었다.

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16S rDNA 염기서열 분석에 의한 옥돔(Branchiostegus japonicus)의 장내미생물 군집의 다양성 조사 (Research on the Diversity of Intestinal Microbial Communities of Red tilefish (Branchiostegus japonicus) by 16S rDNA Sequence Analysis)

  • 김민선;이승종;허문수
    • 생명과학회지
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    • 제28권3호
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    • pp.361-368
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    • 2018
  • 본 연구는 제주연안에서 채집한 옥돔(Branchiostegus japonicus)의 장내기관으로부터 장내미생물의 분리하여 다양성을 조사하였다. 1차로 1.5% BHIA, MA, TSA 및 R2A agar 배지상 순수분리한 결과, 1.5% BHIA에서 가장 많은 colony개수를 나타냈다. 호기성, 혐기배양은 평균 $1.7{\times}10^6CFU/g^{-1}$, $1.1{\times}10^5CFU/g^{-1}$로 나타났으며 총 147개의 순수 colony가 분리되었다. 16S rDNA염기서열 분석결과 58속 74종으로 나타났으며 기본균주와 95-100%의 유사도를 나타내었다. 크게 5문(Phylum)으로 나뉘었으며, 주요 계통군으로 Proteobacteria 문이 50%로 Moraxellaceae, Rhodobacteraceae, Shewanellae, Halomondaceae, Enterobacteriaceae, Vibrionaceae, Hahellaceae, Pseudomonadaceae, Erythrobacteraceae 총 9과 35속 35종으로 우점도가 제일 높게 나타났다. Actinobacteria문은 24%, Microbacteriaceae, Intrasporangiaceae, Dietziaceae, Dermabacteraceae, Dermacoccaceae, Nocardiodaceae, Brevibacteriaceae, Propionobacteriacea 총 8과 11속 17종, Frimicutes문은 16%, Bacillaceae, Staphylcoccaceae, Planococcaceae, Streptococcaceae, Paenibacillaceae, Clostridiaceae 총 6과 8속 17종, bacteroidetes문은 6%, Cyclobacteriaceae, Flavobacteriaceae 총 2과 3속 4종을, Deinococcus-thermus문은 4%로 Deinococcaceae 단일 1과 1속 1종으로 나타났다.

Single-cell PCR을 이용하여 분석한 득량만 Chattonella 종 (Raphidophyceae)의 분자계통학적 특성 (Molecular Phylogeny of Chattonella (Raphidophyceae) Species from Deungnyang Bay, Korea Using Single-Cell PCR)

  • 김진주;송선영;박태규
    • 해양환경안전학회지
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    • 제24권7호
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    • pp.967-972
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    • 2018
  • 최근 우리나라 연안에서 출현빈도가 점차 늘어나고 있는 침편모조류에 속하는 Chattonella는 대표적인 유해조류 중 하나로, 이들 종은 세포벽이 없어, 단순히 세포의 형태나 크기 등 광학현미경 관찰만으로는 정확하게 동정하는 것이 어렵다. 따라서 본 연구에서는 2017년 득량만에서 발생한 Chattonella 적조 시료를 대상으로 단일 세포를 분리하고, 이들 시료의 28s rDNA, rbcL, psaA 영역을 대상으로 single-cell PCR 기법을 이용하여 종 동정을 실시하였다. 현미경 관찰 결과 장축은 평균 $74.0{\pm}10.1{\mu}m$이고 단축은 평균 $33.1{\pm}3.6{\mu}m$로 일반적인 Chattonella의 형태적 특징을 보였다. 28s rDNA, rbcL, psaA 영역을 대상으로 한 염기서열 비교 결과에서는 세 영역 모두에서 하나의 종으로 명확히 구분되지는 않았다. 하지만 C. marina, C. marina var. antiqua, C. marina var. ovata 그룹과 99~100 % 높은 서열 유사성을 보였다.

Puccinia jogashimensis에 의한 갯기름나물 녹병 (Occurrence of Rust on Peucedanum japonicum Caused by Puccinia jogashimensis in Korea)

  • 고숙주;김효정;명인식;엄미정;최인영
    • 식물병연구
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    • 제21권4호
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    • pp.337-340
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    • 2015
  • 2014년 7월 중순부터 11월까지 전라남도 여수시 금오도의 농가포장에 갯기름나물 녹병이 발생되었다. 녹병은 새로운 잎보다는 아래로 늘어진 오래된 잎에서 주로 발병되었는데, 병징은 잎 앞면과 뒷면, 그리고 잎자루에 주황색 모양의 여름포자퇴를 만들었으며, 그 안에는 대량의 포자를 가지고 있었다. 그러나 갯기름나물 꽃에는 녹병이 관찰되지 않았다. 녹병에 심하게 감염된 식물체는 여름포자퇴 주변에서 갈색형태의 반점을 보였으며, 잎이 황화되거나 고사되고 조기 노화를 가져왔다. 녹병균의 여름포자퇴는 잎 표면의 앞 뒷면과 잎자루에 발생하였으며, 개별적으로 형성되거나 때때로 군집하여 형성되기도 하였다. 둥근 원형에서 길쭉한 반구 형태로 표피로 덮여 있거나, 벗겨진 표피로 둘러 쌓여진 형태로 직경은 0.1-4 mm이며, 분말형태의 구릿빛 갈색을 띄고 있었다. 여름포자는 달걀모양에서 타원형으로 겉 표면에 가시 같은 돌기가 있는 밝은 갈색으로 $20-45{\times}15-35{\mu}m$이며, 벽의 두께는 $2-4{\mu}m$이었다. 28S rDNA의 염기서열을 NCBI에서 BLAST search한 결과 등록된 GenBank accession number는 없는 것으로 확인되었다. 따라서 녹병의 발생생태, 균학적 특징, 28S rDNA의 D1/D2의 염기서열 분석 등의 결과를 바탕으로 기존의 보고된 P. jogashimensis에 의한 갯기름나물 녹병을 다시 보완하고자 한다.