Callus formation and plant regeneration from the seeds of zoysiagrass cv. Zenith was tested on MS basal medium supplemented with various concentrations of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid(2,4-D) and of several cytokinins. A concentration of 1mg/L 2,4-D on medium stimulated callus formation. In the presence of 5mg/L 2,4-D, addition of 1mg/L kinetin significantly enhanced callus formation and plant regeneration over 2,4-D alone. To transfer foreign DNA into turfgrass, parameters for the bombardment of embryogenic callus with the particle bombardment were partially optimized using transient expression assay of a $chimeric \beta$-glucuronidase(GUS) gene driven by the CaMV 35S promoter. GUS gene was strongly expressed at helium pressure 1,100 psi and 6~9cm target distance.
Mature embryos of five oat genotypes were cultured to develop an efficient method of callus induction and plant regeneration. Murashige and Skoog(MS) and N6 media supplemented with 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and kinetin were used for callus induction. Percentage of callus induction showed significant among the combinations of plant growth regulators. Callus induction showed high efficiency in medium containing 3 mg/$\ell$ of 2,4-D. The high frequency of callus induction was obtained in Gwiri37. For plant regeneration, calli induced from mature embryos were transferred onto MS and N6 media supplemented with combinations of 6-benzyladenine (BA) and naphthaleneacetic acid (NAA) for 5 weeks. Percentage of plant regeneration showed high in MS medium containing 0.2 mg/$\ell$ of NAA and 1 mg/$\ell$ of BA. The callus initiation medium affected the subsequent plant regeneration. Treatment with 3 mg/$\ell$ of 2,4-D, and 3 mg/$\ell$ of 2,4-D and 3 mg/$\ell$ of kinetin in callus induction media showed high frequency for plant regeneration. Plant regeneration frequency among the genotypes showed significant. Especially, Gwiri37 showed high regeneration frequency. Regenerated shoots were treated with 200, 350 and 500 mg/$\ell$ of indole-3-butyric acid (IBA) transferred onto half-strength MS medium without plant growth regulators. Treatment of shoots with IBA induced root formation rapidly.
The microbial organisms named "Pseudomonas sp. LK-14" were isolated from farm land and shallow river sediment, activated, augmented and identified; which were using 2,4-D (2,4-Dichlorophenoxyacetic acid) as a sole carbon source and energy source. 2,4-D removal efficiency of LK-14 with 2,4-D sole carbon source (reactor S) were higher than that of Activated Sludge with 2,4-D sole carbon source (reactor A). Dynamic bioligical reaction kinetic parameters (sole carbon source was 2,4-D) obtained from batch reactor experiments were ${\mu}_{max}$$0.105hr^{-1}$, $K_{s,24D}$ 15.64mg/L, $K_{i,24D}$$1.94h^{r-1}$, $Y_{24D}$ 0.39 for LK-14 and ${\mu}_{max}$$0.008hr^{-1}$, $K_{s,24D}$ 26.95mg/L, $K_{i,24D}$$1.75hr^{-1}$, $Y_{24D}$ 0.10 for Activated Sludge. Using these parameters, we could predict the behaviors of 2,4-D substrate utilized by LK-14 and Activated Sludge in batch reactors. The kinetic parameters are enable to predict the 2,4-D substrate and microbial population behavior entering into wastewater treatment plants by using unsteady states dynamic simulation modeling technique.
The Korean radish cationic peroxidase (KRCP) promoter, comprising nucleotides -471 to +704 relative to the transcriptional initiation site, was fused to the GUS gene and transformed to tobacco BY-2 cells. We examined how auxin (2,4-dichlorophenoxyacetic acid, 2,4-D), cytokinin (6-benzylaminopurine, BAP), gibberellic acid ($GA_3$), abscisic acid (ABA), methyl jasmonate (MeJA), and phosphatidic acid (PA) affect the GUS expression in the presence or absence of 2,4-D in a modified LS medium. Exogenous 2,4-D or BAP greatly decreased the GUS expression regulated by the KRCP promoter in a modified LS medium containing 0.2 mg/l 2,4-D. $GA_3$ increased the GUS expression and ABA completely reduced the inductive effect of $GA_3$. The GUS expression was also increased dose-dependently by plant defense regulators, MeJA and PA. In contrast to the above results, auxin deprivation from the modified LS medium increased the GUS expression after treatment with exogenous 2,4-D whereas BAP still greatly decreased the GUS expression dose-dependently. $GA_3$ or MeJA slightly decreased the GUS expression. The data suggest that auxin deprivation changes the sensitivity of the suspension cells to exogenous chemicals and that the regulation of the KRCP promoter by 2,4-D, $GA_3$, and MeJA is dependent on auxin, whereas the regulation by BAP is not. This study will be valuable for understanding the function and expression mode of the Korean radish cationic peroxidase in Korean radish.
Kim Kyung-Hee;Moon Jung-Hun;Lee Sang-Kyu;Lee Byung-Moo
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.49
no.4
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pp.349-353
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2004
Mature embryo and leaf base segment of Korean oat were used as materials in an experiment to check plant regeneration efficiency. MS media supplemented with 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), kinetin, and picloram were used for callus induction from mature embryos and leaf base segments. Three mg/l of 2,4D and 3 mg/l of picloram in callus induction medium showed high frequency for plant regeneration from mature embryos. Leaf base segments were transferred to callus induction medium and incubated at $25^{\circ}C$ in 16/8 hr light/dark cycle for 3 weeks. Callus induction from leaf base segments of Malgwiri showed high efficiency in medium containing 3 mg/l of 2,4-D and 1 mg/l of kinetin $(91.8\%)$. In case of Samhangwiri, the combinations of phytohormones did not show significant difference. Regeneration from leaf base segments showed high frequency in shoot medium containing 1 mg/l of antiauxin, tri-iodobenzoic acid (TIBA) and 1 mg/l of 6-benzyladenine (BA). Calli induced from leaf base segments of Samhangwiri and Malgwiri in media containing 3 mg/l of 2,4-D and 3 mg/l of picloram showed high regeneration frequency. It appears that the callus initiation medium may be an important factor for subsequent plant regeneration.
This study describes a simple and rapid method for quantitative determination of $\gamma$-aminobutyric acid (GABA) using $^1H$ NMR spectroscopy from whole cell extracts of plant suspension cultures. When 9 cell lines derived from 8 species of higher plants maintained in liquid Marashige and Skoog (MS) medium supplemented with 1 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) were subjected to $^1H$ NMR, a cell line of Coriandrum sativum L. exhibited the highest level of GABA. The level reached up to 16.9 mg/dry wt when cells were cultured in MS medium supplemented with 0.5 mg/L 2,4-D after 3 weeks of incubation. The method for quantitative determination of GABA using $^1H$ NMR established in this study could be applied to high-throughput screening of various plant resources for GABA production and the cell suspension culture system of C. sativum could be further developed for commercial production of GABA.
The chemical warfare agents (CWAs) have been developed for offensive or defensive purposes and used as chemical weapons in war and terrorism. The CWAs are exposed to the natural environment, transported through the water system and then eventually contaminate soil and groundwater. Therefore, effective decontamination technology to remediate CWAs are needed. The CWAs are extremely dangerous and prodution is strictly prohibited, therefore, it is difficult to use CWAs even in experimental purpose. In this study, 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) was chosen as a model representative CWA because it is a simulant of anti-plant CWAs and one of the major component of agent orange. The optimum degradation conditions such as oxidant:activator ratio were determined. The effects of hydroxylamine and chelating agents such as citric acid (CA), oxalic acid (OA), malic acid (MA), and EDTA addition to increase Fe2+ activation were also investigated. Scavenger experiments using tert-butyl alcohol (TBA) and ethanol confirmed that although both sulfate (SO4•-) and hydroxyl radical (•OH) existed in Fe2+-persulfate system, sulfate radical was the predominant radical. To promote the Fe2+ activator effect, the effect of hydroxylamine as a reducing agent was investigated. In chelating agents assisted Fe2+-persulfate oxidation, the addition of 2 mM of CA and MA enhanced 2,4-D degradation. In contrast, EDTA and OA inhibited the 2,4-D removal due to steric hindrance effect.
Proceedings of the Korean Society for Applied Microbiology Conference
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2000.04a
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pp.116-123
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2000
The purpose of this work was to investigate the induction of stress shock proteins (SSPs) in Burkholderia sp. YK-2 in response to 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), and Pseudomonas sp. DJ-12 to benzoate, 4-chlorobenzoate (4-CBA), 4-hydroxybenzoate, and biphenyl. The SSPs, which contribute to the resistance of the cytotoxic effect of the toxic aromatic compounds including 2,4-D and 4-CBA, were induced at different concentrations of the compounds in exponentially growing cultures of Burkholderia sp. YK-2 or Pseudomonas sp. DJ-12. This response involved the induction of a 43 kDa DnaK and 41 kDa GroEL proteins in Burkholderia sp. YK-2, characterized by SDS-PAGE and Western blot using the anti-DnaK and anti-GroEL monoclonal antibodies. In Pseudomonas sp. DJ-12, 70 kDa DnaK and 60 kDa GroEL proteins was induced as SSPs, respectively. The total SSPs were analyzed by 2-D PAGE. Survival of Burkholderia sp. YK-2 or Pseudomonas sp. DJ-12 with time in the presence of different concentrations of the compounds was monitored, and viable counts paralleled the induction of the SSPs in these strains. Cells treated with the increased concentrations of toxic compounds showed some destructive openings on the cell envelopes.
Plant regeneration from the stem tissue of Orostachys japonicus A. Beiger was investigated. The calli derived from shoot apex when apex when cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 4mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D)and 2 mg/L benzyl aminopurine (BAP). The calli were developed into shoot to MS medium with 0.5mg/L NAA and 2mg/L and into root with 1mg/L kinetin. The reddish pigment which might be essential for the rootregeneration was observed in the tip of regenerated root.
The effect of carbenicillin on the dedifferentiation and the regeneration efficiency of plant tissues of horseradish(Armoracia rusticana) was evaluated, Inhibition effect for callus initiation was observed when leaf blade, root and petiole segments were grown on MS medium containing 500 mg/L to 2000 mg/L carbenicillin and 0.5 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D). The regeneration of horseradish shoots from leaf blade, root and petiole explants were decreased as the addition of carbenicillin increased from 1000 mg/L to 2000 mg/L in MS medium containing 0.5 mg/L of 6-benzylaminopurine (BAP) or kinetin. Especially, 500 mg/L carbenicillin treatment significantly inhibited shoot induction when leaf blade explants were grown on hormone-free MS medium. It was suggested that the toxic effects of combinations of carbenicillin and 2,4-D may be due to high auxin activity levels.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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