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유방암 세포주에서 PMA로 유도된 암세포 침투에 대한 모링가 뿌리 추출물의 억제효과 (Extract of Moringa Root Inhibits PMA-induced Invasion of Breast Cancer Cells)

  • 조현지;장영채
    • 생명과학회지
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    • 제24권1호
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    • pp.8-13
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    • 2014
  • 여성에게 특히 높은 발병률을 보이는 유방암은 다양한 인자에 의해 암세포 침투와 전이가 발생한다. 그중에서 MMP-9은 유방암에서 높은 발현율을 나타내며, 유방암 세포의 침투와 전이에 주요하게 작용한다. MMP-9은 다양한 성장인자와 사이토카인, PMA 등에 의해 발현이 유도되며 세포 내 자연적으로 발생된 내생적 억제인자인 TIMP-1과 -2에 의해 그 활성 및 발현이 조절된다. MMP-9의 활성 및 발현을 저해하기 위해 사용한 물질은 모링가 추출물로 모링가의 모든 부위가 다양한 질환을 치료하는 것으로 알려져 있다. 이 연구에서는 대표적으로 모링가씨, 뿌리, 잎, 열매 추출물질을 이용하여 MMP-9의 활성억제 유무를 연구하였으며, MCF-7 세포에서 모링가 뿌리추출물이 MMP-9을 가장 효과적으로 억제하였다. 또한 MDA-MB-231을 이용한 비교실험에서도 세포특이성 없이 MMP-9의 활성 및 발현이 모링가 뿌리 추출물에 의해 억제되었고 단백질과 mRNA 발현에서도 동일한 결과가 도출되었다. 뿐만 아니라 암세포 침투실험에서도 모링가 뿌리 추출물에 의해 암세포 침투가 50% 이상 감소 되었으나, TIMP-1과 -2 mRNA 발현은 모링가 뿌리 추출물에 의해 저해되지 않았으므로 모링가 뿌리 추출물이 MMP-9 활성 및 발현 저해를 통해 암세포 침투를 저해시키는 것으로 예상된다. 그리고 MMP-9 활성 및 발현 조절기전을 확인하기 위해 MAP kinase의 인산화를 확인한 실험에서 모링가 뿌리 추출물이 ERK와 JNK의 인산화를 억제시킴을 확인하였다. 결론적으로 이 실험을 통해 모링가 추출물 중 뿌리 추출물이 MMP-9 활성 및 발현저해에 가장 효과적이며, ERK와 JNK의 인산화 조절을 통해 MMP-9의 활성 및 발현을 직접적으로 조절함을 확인할 수 있었다.

원자력용 개량 9Cr-1Mo 및 9Cr-0.5Mo-2W 강의 미세조직과 기계적 특성 연구 (A Study on Microstructure and Mechanical Properties of Modified 9Cr-1Mo and 9Cr-0.5Mo-2W Steels for nuclear Power Plant)

  • 김성호;송병준;한창석;국일현;류우석
    • 한국재료학회지
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    • 제9권11호
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    • pp.1137-1143
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    • 1999
  • 액체금속로 전열관재료용 개량 9Cr-1Mo강의 특성에 미치는 텅스텐의 영향을 고찰하기 위하여 개량 9Cr-1Mo강에 텅스텐을 2wt.% 첨가하여 템퍼링 온도에 따른 기계적 특성 및 미세조직의 변화를 조사하였다. 미세조직을 관찰한 결과 템퍼링시 전위회복에 의해 형성되는 셀 구조가 나타나는 템퍼링 온도는 개량 9Cr-1Mo강의 경우 $700^{\circ}C$인 반면, 텅스텐을 첨가한 9Cr-0.5Mo-2W강의 경우는 $750^{\circ}C$이었으며, 이 결과로부터 텅스텐 첨가는 전위회복을 지연하였음을 알 수 있다. 텅스텐을 첨가하여도 템퍼링 온도에 따라 생성되는 석출물의 종류는 차이가 없었으나, 텅스텐을 첨가한 강에 있는 석출물에는 텅스텐이 포함되어 있었다. 텅스텐의 첨가로 경도값, 고온 인장강도 그리고 항복강도가 증가하였다. 이것은 텅스텐 첨가로 인한 미세구조의 안정화에 기인하는 것으로 보인다. 충격시험에서는 항복강도가 낮은 개량 9Cr-1Mo강이 더 우수한 충격파괴특성을 가졌다.

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Regulation of ANKRD9 expression by lipid metabolic perturbations

  • Wang, Xiaofei;Newkirk, Robert F.;Carre, Wilfrid;Ghose, Purnima;Igobudia, Barry;Townsel, James G.;Cogburn, Larry A.
    • BMB Reports
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    • 제42권9호
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    • pp.568-573
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    • 2009
  • Fatty acid oxidation (FAO) defects cause abnormal lipid accumulation in various tissues, which provides an opportunity to uncover novel genes that are involved in lipid metabolism. During a gene expression study in the riboflavin deficient induced FAO disorder in the chicken, we discovered the dramatic increase in mRNA levels of an uncharacterized gene, ANKRD9. No functions have been ascribed to ANKRD9 and its orthologs, although their sequences are well conserved among vertebrates. To provide insight into the function of ANKRD9, the expression of ANKRD9 mRNA in lipidperturbed paradigms was examined. The hepatic mRNA level of ANKRD9 was repressed by thyroid hormone ($T_3$) and fasting, elevated by re-feeding upon fasting. However, ANKRD9 mRNA level is reduced in response to apoptosis. Transient transfection assay with green fluorescent protein tagged- ANKRD9 showed that this protein is localized within the cytoplasm. These findings point to the possibility that ANKRD9 is involved in intracellular lipid accumulation.

Deep Blue Fluorescent Host Materials Based on a Novel Spiro[benzo[c]fluorene-7,9'-fluorene] Core Structure with Side Aromatic Wings

  • Lee, In-Ho;Seo, Jeong-A;Gong, Myoung-Seon
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제33권7호
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    • pp.2287-2294
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    • 2012
  • Deep blue fluorescent host materials based on a novel spiro[benzo[c]fluorene-7,9'-fluorene] core structure with side aromatic wings in the 5- and 9-positions, namely, 5,9-di(naphthalen-2-yl)spiro[benzo[c]fluorene-7,9'-fluorene] (DN-SBFF), 5,9-bis(4-t-butylphenyl)spiro[benzo[c]fluorene-7,9'-fluorene] (BP-SBFF), and 5,9-bis(4-fluorophenyl)spiro[benzo[c]fluorene-7,9'-fluorene] (FP-SBFF), were designed and successfully prepared using the Suzuki reaction. The physical properties of these materials and their EL characteristics as blue host materials doped with N,N,N',N'-tetraphenylspiro[benzo[c]fluorene-7,9'-fluorene]-5,9-diamine (TPA-SBFF) were investigated. The device used comprised ITO/N,N'-diphenyl-N,N'-bis[4-(phenyl-m-tolyl-amino)phenyl]-biphenyl-4,4'-diamine (DNTPD)/N,N'-di(1-naphthyl)-N,N'-diphenylbenzidine (NPB)/(FP-SBFF):dopant x%/tris(8-hydroxyquinoline)aluminum ($Alq_3$)/LiF. The device obtained using FP-SBFF doped with TPA-SBFF showed high color purity (0.13, 0.18) and an efficiency of 6.61 cd/A at 7 V.

Toll-like receptor 9-매개에 의한 matrix metalloproteinase-9 발현에서 NF${\kappa}B$의 역할 (ROLE OF NF${\kappa}B$ IN TOLL-LIKE RECEPTOR 9-MEDIATED MATRIX METALLOPROTEINASE-9 EXPRESSION)

  • 이상훈;진병로;백석환
    • Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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    • 제33권6호
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    • pp.636-642
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    • 2007
  • Background: CpG DNA plays an important role in immune cell function. This study examined whether the temporal control of toll-like receptor (TLR)9 by CpG DNA can regulate the expression of matrix metalloproteinase-9(MMP-9). Methods and materials: Macrophages were cultured in the presence of 10% FBS. For the various MMP genes analysis, RT-PCR and real-time PCR were performed. In addition, zymography assay performed for the MMP activity. The phosphorylation assay did for the ERK1/2 and NF${\kappa}B$ activation, and luciferase promoter assay was for the NF${\kappa}B$ activity. Results: CpG DNA induced the mRNA expression of MMP-2, MMP-9, and MMP-13, but not of MMP-7, MMP-8, and MMP-12, in a time-dependent manner. Especially, the mRNA expression of MMP-9 was strongly induced by CpG DNA using real-time RT-PCR. The TLR9 inhibitor, chloroquine, suppressed CpG DNA-induced MMP-9 expression and its activity. Moreover, CpG DNA induced the phosphorylation of ERK and the inhibition of ERK by U0126 suppressed CpG DNA-induced MMP-9 expression and its activity. CpG DNA stimulated $I{\kappa}B-{\alpha}$ degradation and luciferase activity. In addition, pretreatment of SN-50, the inhibitor of NF${\kappa}B$, strongly blocked the CpG DNA-induced MMP-9 expression and activity. Conclusion: These observations suggest that CpG DNA may play important roles in the activation of macrophages by regulating the production of MMP-9 via the sequential TLR9-ERK-NF${\kappa}B$ signaling pathway.

몇몇 허브식물의 생육에 미치는 B-9과 Uniconazole 처리효과 (Effect of B-9 and Uniconazole on the Growth of Mentha piperita, Origanum vulgare L., and Thymus vulgaris L.)

  • 이정화;문윤자;박기배;허무룡;박중춘
    • 원예과학기술지
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    • 제17권2호
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    • pp.131-133
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    • 1999
  • 식물생장억제제 처리시 대조구에 비하여 초장이 짧아지는 것으로 나타났으며 uniconazole 처리가 B-9 처리보다 초장억제에 더욱 효과적이었으나 Thymus vulgaris 2,500mg/L B-9 처리시는 uniconazole 처리보다 초장이 짧은 결과를 보였다. 5,000mg/L B-9처리시 공시한 3종 모두의 삽수가 고사하였다. 신초수는 대조구에서 가장 많이 발생하였으며 B-9 처리시는 uniconazole 처리에 비하여 신초발생이 많았다. 잎에 대한 생장억제제의 처리 효과는 공시식물 모두 유의차가 적었으며 절간장은 초장과 같은 결과를 나타내었다. Mentha piperita, Origanum vulgare와 Thymus vulgaris 지하부 생육은 B-9이나 uniconazole에 의해 현저하게 영향 받지 않았다.

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신세포암종에서 Matrix Metalloproteinase-9 발현의 분석 (Analysis of Matrix Metalloproteinase-9 Expression in Renal Cell Carcinoma)

  • 김지윤;박동춘
    • Journal of Yeungnam Medical Science
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    • 제23권1호
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    • pp.82-89
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    • 2006
  • 최근 여러 종양에서 단백분해효소의 분비와 암의 악성도에 대한 연구가 이루어져 왔으며, 이를 신세포암종 환자의 예후 측정인자로 사용하려는 시도가 진행되고 있다. 이에 저자들은 제 4형 collagenase 중 대표적인 MMP-9의 발현정도를 정상 신조직과 신세포암종 조직에서 비교하였고, 또 암의 침윤 및 전이정도와의 관계와 다른 임상적 인자들과의 상관성을 분석하여 암의 단계적 진행과정에서의 MMP-9의 발현변화에 대하여 조사하였다. 그 결과 정상 신 조직에 비해 신세포암종 조직에서 MMP-9의 발현이 증가되며 암의 크기가 크고 혈관침범이 있으며 병기가 높을수록 MMP-9의 발현이 증가됨을 관찰할 수 있었다. 이는 MMP-9 발현의 증가가 신세포암종의 발생과정 및 암의 후기 진행에 관여함을 시사하므로 향후 신세포암종의 예후척도로 사용되어 치료방침을 결정하는데 도움을 줄 수 있을 것으로 생각한다.

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Oxidative stress-induced aberrant G9a activation disturbs RE-1-containing neuron-specific genes expression, leading to degeneration in human SH-SY5Y neuroblastoma cells

  • Kim, Ho-Tae;Ohn, Takbum;Jeong, Sin-Gu;Song, Anji;Jang, Chul Ho;Cho, Gwang-Won
    • The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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    • 제25권1호
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    • pp.51-58
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    • 2021
  • Oxidative stress-induced neurodegeneration is one of several etiologies underlying neurodegenerative disease. In the present study, we investigated the functional role of histone methyltransferase G9a in oxidative stress-induced degeneration in human SH-SY5Y neuroblastoma cells. Cell viability significantly decreased on H2O2 treatment; however, treatment with the G9a inhibitor BIX01294 partially attenuated this effect. The expression of neuron-specific genes also decreased in H2O2-treated cells; however, it recovered on G9a inhibition. H2O2-treated cells showed high levels of H3K9me2 (histone H3 demethylated at the lysine 9 residue), which is produced by G9a activation; BIX01294 treatment reduced aberrant activation of G9a. H3K9me2 occupancy of the RE-1 site in neuron-specific genes was significantly increased in H2O2-treated cells, whereas it was decreased in BIX01294-treated cells. The differentiation of H2O2-treated cells also recovered on G9a inhibition by BIX01294. Consistent results were observed when used another G9a inhibitor UCN0321. These results demonstrate that oxidative stress induces aberrant activation of G9a, which disturbs the expression of neuron-specific genes and progressively mediates neuronal cell death. Moreover, a G9a inhibitor can lessen aberrant G9a activity and prevent neuronal damage. G9a inhibition may therefore contribute to the prevention of oxidative stress-induced neurodegeneration.

Pebax/ZIF-9 혼합막에 의한 기체투과 특성 (Gas Permeation Characteristics by Pebax/ZIF-9 Mixed Matrix Membrane)

  • 윤숭석;홍세령
    • 멤브레인
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    • 제32권5호
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    • pp.325-335
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    • 2022
  • 본 연구에서는 zeolitic imidazolate framework-9 (ZIF-9)을 합성하고 poly(ether-b-amide)-1657 (Pebax-1657) 내에 함량을 달리하여 Pebax/ZIF-9 혼합막을 제조한 다음 단일기체 (N2, CO2)를 투과하여 혼합막에 대한 기체 투과 특성을 조사하였다. 순수 Pebax 막 내에 혼입되는 ZIF-9 함량이 증가함에 따라 N2 투과도는 점차 감소하고, CO2 투과도는 Pebax/ZIF-9 3 wt% 혼합막까지 증가하다가 그 이후의 함량에서는 감소하였다. 그리고 혼합막들 중 Pebax/ZIF-9 3 wt% 혼합막은 극성 기체인 CO2에 대해 gate-opening 현상이 일어나면서 선택적으로 CO2를 받아들여 가장 높은 선택도 69.3을 보였다. 또한 CO2 투과도와 CO2/N2 선택도가 모두 증가하여 Robeson upper-bound에 가장 근접하는 결과를 얻었다.

A qPCR Method to Assay Endonuclease Activity of Cas9-sgRNA Ribonucleoprotein Complexes

  • Minh Tri Nguyen;Seul-Ah Kim;Ya-Yun Cheng;Sung Hoon Hong;Yong-Su Jin;Nam Soo Han
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제33권9호
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    • pp.1228-1237
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    • 2023
  • The CRISPR-Cas system has emerged as the most efficient genome editing technique for a wide range of cells. Delivery of the Cas9-sgRNA ribonucleoprotein complex (Cas9 RNP) has gained popularity. The objective of this study was to develop a quantitative polymerase chain reaction (qPCR)-based assay to quantify the double-strand break reaction mediated by Cas9 RNP. To accomplish this, the dextransucrase gene (dsr) from Leuconostoc citreum was selected as the target DNA. The Cas9 protein was produced using recombinant Escherichia coli BL21, and two sgRNAs were synthesized through in vitro transcription to facilitate binding with the dsr gene. Under optimized in vitro conditions, the 2.6 kb dsr DNA was specifically cleaved into 1.1 and 1.5 kb fragments by both Cas9-sgRNA365 and Cas9-sgRNA433. By monitoring changes in dsr concentration using qPCR, the endonuclease activities of the two Cas9 RNPs were measured, and their efficiencies were compared. Specifically, the specific activities of dsr365RNP and dsr433RNP were 28.74 and 34.48 (unit/㎍ RNP), respectively. The versatility of this method was also verified using different target genes, uracil phosphoribosyl transferase (upp) gene, of Bifidobacterium bifidum and specific sgRNAs. The assay method was also utilized to determine the impact of high electrical field on Cas9 RNP activity during an efficient electroporation process. Overall, the results demonstrated that the qPCR-based method is an effective tool for measuring the endonuclease activity of Cas9 RNP.