Kim, Lee-Su;Kong, Yoon;Kang, Shin-Yong;Cho, Seung-Yull
Parasites, Hosts and Diseases
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v.30
no.1
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pp.25-32
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1992
Antigenic proteins of 36 and 29 kDa were localized in Spirometra mansoni plerocercoid (sparganum) immunohistochemically by avidin biotin complex (ABC) staining. When polyclonal antibodies such as BALB/c mouse serum immunized with crude saline extract of sparganum or confirmed sparganosis sera were reacted as pri-mary antibodies, the positive chromogen (3-amino, 9-ethylcarbazole) reactions were recognized at syncytial tegument, tegumental cells, muscle and parenchymal cells and lining cells of excretory canals. A monoclonal antibody(MAb) which was reacting to 36 and 29 kDa proteins in the extract of the worm was localized at the syncytial tegument and tegumental cells. The present results suggested that the potent antigenic proteins of 36 and 29 kDa in sparganum were produced at the tegumental cells and transported to the syncytial tegument.
Purpose: Recombinant ScFv lym-1 was produced, using pET vector system for large scale production. Methods: ScFv lym-1 gene inserted pET-22b (+) vector, was expressed in E.coli BL-21 strain. ScFv lym-1 antibody extracted from periplasm, was purified with His-Taq column. To evaluated immunoreactivity with Raji cell, ScFv lym-1 was labeled with I-125 and I-125 ScFv lym-1 was purified with desalting column. Raji cell was injected into the C57BR/cdJ SCID mice. Gamma camera imaging were taken time point at 1, 8, 24, and 48 hr with 8 mm pinhole collimator. Results: An active scFv lym-1 could be produced in E. coli with soluble iron using PET vector system. Immuuoreaetivity and affinity constant of IgG lym-1 were 54% and $1.83{\times}10^9M^{-1}$, respectively, and those of scFv lym-1 were 53.7% and $1.46{\times}10^9M^{-1}$, respectively. Biodistribution of I-125 scFv lym-1 antibody showed faster clearance in blood, spleen, kidney and than I-125 IgG lym-1 antibody. Gamma camera image of I-125 scFv lym-1 antibody showed faster clearance and tumor targeting liver than I-125 IgG lym-1 antibody. Conclusions: In vitro properties of scFv lym-1 were similar to those of IgG lym-1. ScFv lym-1 showed faster blood clearance than IgG lym-1 There results suggest that scFv lym-1 antibody can be useful for tumor imaging agent.
An enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) was developed for the detection of milk proteins in processed foods. The ${\alpha}_{s1}-casein({\alpha}_{s1}-CN)$, a heat stable major milk protein, was immunized into rabbits to produce specific antibodies. When competitive indirect ELISA(ciELISA) using $anti-{\alpha}_{s1}-CN$ antibodies was established, its detection limit was $0.1\;{\mu}g/mL$. The reactivities of the specific antibodies toward ${\alpha}_{s1}-CN$, skim milk, ${\beta}-CN$ and whey protein isolate(WPI) were 100, 37, 0.14 and 0.04%, respectively, as determined by ciELISA. However $anti-{\alpha}_{s1}-CN$ antibodies did not have any reactivity to other milk proteins such as ${\beta}-lactoglobulin,\;{\alpha}-lactalbumin$, bovine serum albumin, and isolated soy protein. When sandwich ELISA was established, its detection limit was $0.01\;{\mu}g/mL$ which was 10 times more sensitive than that of ciELISA. In the spike test which was performed by adding 1-10% of whole CN to market milk, mean assay recovery as determined by sandwich ELISA was 94.8%(CV, 8.2%). Food stuffs and dairy products were assayed by sandwich ELISA to show 29, 0.13, 0.25, and 6.9% of whole CN in skim milk powder, WPI, semi-solid yoghurt, and processed cheese, respectively.
Han Jung-Heon;Lee Cheol-Ho;Kim Young-Ho;La Yong-Joon
Research in Plant Disease
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v.12
no.2
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pp.144-147
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2006
Egg yolk immunoglobulin (IgY) is much widely used in medical fields, but its use in serology of plant viruses is much limited. We produced an IgY against pepper mild mottle virus (PMMoV) and applied it to several serological tests. Polyclonal antibodies were obtained from the egg yolk of chicken immunized with a total of 2mg of purified PMMoV over 2 months. The titers of antibodies were measured with the ring-test over six months after the first injection. The highest.titers of IgY was 1/2,560 at 2 months after the first injection. Approximately 60-80 mg of IgY were obtained from one egg yolk. Using the IgY, 1ng/ml of purified PMMoV was detected with the indirect ELISA. Gelrite gel double diffusion test, ELISA and tissue immuno-binding assay employing IgY gave similar sensitivity and specificity to those of IgG developed in rabbit. Therefore, the IgY which can be obtained in large quantities from a chicken, might be useful for the antibody production and the serology of plant viruses.
In this study, we carried out immunostaining and immunogold labeling with rabbit anti-dopamine (TH) and rabbit anti-calbindin-$D_{28K}$ to examine the characteristics and functions of the neurons that secrete neurotransmitters in optic lobes of Todarodes pacificus and Octopus minor inhabiting the Korean waters. The obtained results are as follow. In the immunostaining with anti-dopamine, only a few of the large amacrine cells in an the upper part of an outer granule cell layer and the cells forming the islands of medulla showed positive reaction in Todarodes pacificus, while $2{\sim}3$ cells in the upper and middle parts of an outer granule cell layer and more than 5 cells in the islands of medulla reacted positively in Octopus minor. For the case of anti-calbindin case, $2{\sim}3$ small amacrine cells in the upper portion of the outer granule cell layer and $1{\sim}2$ cells which are located in the lower part of an inner granule cell layer showed positive reaction in Todarodes pacificus, while, in Octopus minor, 4 cells in the outer granule cell layer reacted positively, no immunoreactive cell being found in the inner granule cell layer. As a result of performing the immunogold labeling, relative large number ($17{\sim}26$) of gold particles were labeled per $0.5{\mu}m^2$ of the cytoplasm of the cells which showed the immunoreactivity to the anti-dopamine and anti-calbindin in Todarodes pacificus, however, small number (10) of gold particles were labeled in Octopus minor, which reach only half of the number in the Todarodes pacificus.
Kim, Su-Mi;Jee, Bo-Young;Cho, Mi-Young;Won, Kyoung-Mi;Kim, Jin-Woo;Park, Soo-Il
Journal of fish pathology
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v.24
no.2
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pp.75-84
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2011
The amino acid sequence of glycoprotein of Korean VHSV isolate (KR'01-1) was analyzed using the DNAStar Protean system. Based on the flexibility, hydrophilicity, antigenic index and surface probability, three regions (Gp1, Gp2 and Gp3) were selected as potential antigenic determinants. Three oligopeptides containing the amino acid sequences of the three regions were synthesized and polyclonal antibodies were raised against them. The activities of the antibodies were analyzed by Western blotting and virus neutralization test. The results showed that antibodies raised against oligopeptides Gp1 and Gp2 neutralized the infectivity of VHSV, suggesting that they can be possible candidates for subunit vaccines against VHS diseases in olive flounder.
Antiphospholipid antibody syndrome(APS) is a well-known clinical syndrome characterized by recurrent arterial or venous thromboses, recurrent fetal loss, thrombocytopenia, together with high titers of sustained anticardiolipin antibody(aCL) or lupus anticoagulant(LA). Although systemic lupus erythematosus(SLB) and APS may coexist, a high proportion of patients manifesting the APS do not suffer from classical lupus or other connective tissue disease. The patient has been defined as having a primary antiphospholipid antibody syndrome. We experienced one case of primary APS with recurrent fetal loss, recurrent cerebral infarctions, positive anticardiolipin antibody IgG and fluttering vegetation on the mitral valve, without other connective tissue diseases including SLE. Forty-three old female had 2 out of 11 criteria for the diagnosis of SLE, such as thrombocytopenia and positive antinuclear antibody, but did not meet whole criteria. The patient was treated with ticlopidine, and anticoagulant therapy was recommended.
Choi, Won Seok;Ryu, Kyung Hwan;Kim, You Jeong;Kim, So Young;Kim, Hyun Hee;Lee, Wonbae
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.46
no.3
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pp.271-276
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2003
Purpose : Granulocyte-colony stimulating factor(G-CSF) and granulocyte macrophage-colony stimulating factor(GM-CSF) are principal cytokines in granulopoiesis and their physiologic effects are mediated through binding to specific cell surface receptors. Although it is known that the level of serum G-CSF and GM-CSF, and presentation of the receptors are increased in infectious diseases, there have been no studies to find the correlation between the granulopoiesis and leukocytosis. This study was designed to measure G-CSF and GM-CSF in leukocytosis and in control and to demonstrate the possible pathogenesis of granulopoiesis in leukocytosis using quantitative analysis of G-CSF, GM-CSF and their CSFr. Methods : The plasma levels of G-CSF, GM-CSF of 13 children without leukocytosis and 14 children with leukocytosis were measured. Counts of cell surface G-CSFr and GM-CSFr were measured by combining anti G-CSFr and anti GM-CSFr monoclonal antibodies to their respective receptors by using quantitative flow cytometric assay. Results : There was no significant difference betweeen the plasma concentration of G-CSF and GM-CSF in acute leukocytosis and in the control group. However, levels of G-CSFr in acute leukocytosis decreased significantly compared to the control(P=0.012) and the levels of GM-CSFr in both groups revealed no significant difference. Conclusion : Increase in the number of leukocyte in leukocytosis was mediated by increasing the number of neutrophil, and increased plasma concentration of G-CSF may be the cause of neutrophilia. But GM-CSF did not have any influence on leukocytosis.
Chung, Eun Hee;Ma, Sang Hyuck;Hong, Young Jin;Kim, Kyung Hyo;Kim, Jong-Hyun;Lee, Jin A;Lee, Hoan Jong
Pediatric Infection and Vaccine
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v.13
no.2
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pp.163-173
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2006
Purpose : To reduce the number of injections necessary to vaccinate young infants, various combined vaccines have been developed. The $Comvax^{TM}$ manufactured by Merck & Co. is a combination of Hepatitis B and PRP-OMP conjugate Haemophilus influenzae Type b vaccine. The purpose of this study is to evaluate the immunogenicity and safety of $Comvax^{TM}$ in Korean infants. Methods : The infants who were vaccinated at 0 months of age with Hepatitis B vaccine, were recruited for this study after parental informed consent was obtained. The subjects were vaccinated with $Comvax^{TM}$ at 2 and 4 months of age. At each visit, infants were also immunized with DTaP, inactivated poliovirus vaccine, and pneumococcal vaccine when indicated. The serum anti-PRP and anti-HBs were measured at 2 months after the 1st dose(4 months age), and the 2nd dose(6 months age) by the ELISA and chemiluminescent microparticle immunoassay method, respectively. The local and systemic adverse reactions of vaccination were monitored for 3 consecutive days after each immunization. Results : Among sixty-five healthy infants(35 male infants) enrolled in this study; fifty eight(32 male infants) completed the scheduled immunizations. The geometric mean titers (GMTs) of anti-PRP at 2 months after the 1st dose and the 2nd dose were 1.96 ${\mu}g/mL$ (95% CI; 1.38~2.78) and 10.02 ${\mu}g/mL$ (95% CI; 7.04~14.26), respectively. Anti-PRP ${\geq}1.0$${\mu}g/mL$, was obtained in 63.2%(95% CI; 53.75~72.65) after 1 dose, and 96.6%(95% CI; 93.05~100) after 2 doses. The GMTs of anti-HBs were 38.32 mIU/mL(95% CI; 22.42~65.51), and 101.17 mIU/mL(95% CI; 65.94~155.25) at 2 month after the 1st dose and 2nd dose of $Comvax^{TM}$, respectively. Anti-HBs ${\geq}10$ mIU/mL was observed in 73.7%(95% CI; 65.07~82.33) after 1 dose and 94.8%(95% CI; 90.45~99.15) after 2 doses. Most of the adverse reactions after vaccination were mild. Irritability, the most common systemic reaction, was observed in 24.8%, followed by drowsiness(19.2%), poor feeding(19.2%) and fever(7.2%). Among the local reactions tenderness was observed in 25.6%, redness(${\geq}5$ mm) in 19.2% and swelling(${\geq}5$ mm) in 4.8%. Conclusion : The $Comvax^{TM}$ vaccine was highly immunogenic for PRP and safe in Korean infants. Although the hepatitis B vaccine component was administered at 0, 2, 4 months, this study showed good immunogenicity against HBsAg.
Pollen germination viability is an essential factor to produce seeds from pollination and fertilization, which are required to maintain plant generation. In this study, we tried to identify the effect of boric acid on pollen germination and tube grouch in non-transgenic and transgenic plants expressing monoclonal antibodies (anti-colorectal cancer mAb CO17-1A, anti-breast cancer mAb BR55, and anti-rabies virus mAb57). The pollen of non-transgenic plant was treated with different concentration of boric acid (0, 5, 10, 15, 20, $40{\mu}g/mL$) in germination buffer to investigate its effect on in vitro pollen germination. At $20{\mu}g/mL$ of boric acid, tile pollen germination rate was the highest (49.5%) compared to other concentrations. In general, the germination rate significantly increased 3-10 folds in boric acid ($20{\mu}g/mL$) treated group in non-transgenic and transgenic plants. Also, the pollen tube length increased in boric acid ($20{\mu}g/mL$) treated groups. In the treated group, the pollen tube length increased until 3 h boric acid treatment and decreased after the 3 h, indicating that the 3 h is the most appropriate incubation time period. Western blot analysis showed that the mAb transgene expression was more stable in leaf than pollen in transgenic plants. This study suggested that $20{\mu}g/mL$ of boric acid is ideal concentration to induce in vitro pollen germination of transgenic plants expressing therapeutic monoclonal antibodies, indicating stable pollination and fertilization in transgenic plants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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