Antigenic localization in Parofonimn iloktsuenensis worm tissues (tegument, intestine and vitelline gland) in different developmental stages of 2 weeks, 3 weeks, 4 weeks, 5 weeks and 33 weeks from albino rats (Sprague-Dawley) infected with P iloktsuenensis was observed by electron microscopy. These worm tissues of different developmental stage of R iloktsuenensis was observed on electromicrograph by immunogold labeling method using R iLoktsuenensis infected rat serum of 10 weeks. Antigenic localization was demonstrated as labeling of gold particles in tissues on electronmicrograph. In tegument, gold particles were labeled on tegumental tissue, generally more numerous on secretory granules in tegumental syncytium 2 weeks than those on the other elder developmental stages, but there was a little variation in antigenicity according to individual worm tissue. In general, antigenicity in tegumental tissue was not strong (gold particles: 0.1-5/1 Mm2). In intestine, a large number of gold particles (15-18/1 Mm2) were labeled in intestinal epithelium. Gold particles were concentrated especially on secretory granules in cytoplasm, and gold particles were labeled not only in cytoplasmic protrusions, but also in intestinal luminal contents. Intencity of labeling of gold particles was not correlated with developmental stage of worms. In vitelline gland, a large number of gold particles were labeled on vitelline globules. The gold particles in vitelline globules (8- 11/1 Mm2) were concentrated in protoplasm among segmental globules . Key words: Pnragonimus iloktsuenensis, immunogold labeling method, tissue antigen ultrastructure.
Kim, Dong Hwan;Song, Bong Sup;Lee, Jun Ah;Kim, Dong Ho
Pediatric Infection and Vaccine
/
v.19
no.1
/
pp.1-11
/
2012
Purpose : Although influenza is regarded as one of the major causes of morbidity and mortality in children with cancer, the actual vaccine coverage remains poor. We conducted evaluation of immunogenicity and safety of influenza vaccine in children with cancer. Methods : In this study, 25 children with cancer who received influenza vaccine (SK influenza IX vaccine$^{(R)}$) at the Korea Cancer Center Hospital between October and December 2009 were analyzed. Blood samples of patients were collected twice (at the beginning of this study and at 30th day after vaccination) and their antibody titers were measured using the hemagglutination-inhibition (HI) assay. Immunogenicity of the influenza vaccine was assessed by seroprotection rate on days 0 and 30, seroconversion rate on day 30, and mean fold increase (MFI) of geometric mean titer (GMT) of HI between days 0 and 30. Results : Any of the subjects in our study did not experienced serious adverse events after influenza vaccination. Seroprotection rates were 68% for H1N1, 40% for H3N2, and 36% for B. Seroconversion rates were 12% for H1N1, 16% for H3N2, and 20% for B. MFIs were 0.9 for H1N1, 1.2 for H3N2, and 1.8 for B. Conclusion : In the study, we found a limited protective immune response to influenza vaccine, among subjects with cancer. However, some subjects showed seroconversion, and there were no severe adverse events among all subjects, supporting the recommendation of annual influenza vaccination in children with cancer.
Tuberculosis (TB) remains an enormous global health problem, and a new vaccine against TB more potent than the current inadequate BCG vaccine is urgently needed. We constructed three recombinant Mycobacterium bovis BCG (rBCG) strains over-expressing antigen (Ag) 85A, Ag85B, or both of M. tuberculosis using their own promoter and secretory sequence, or hsp60 promoter. SDS-PAGE analysis of rBCG proteins showed overexpression of Ag85A and Ag85B proteins in higher level than of those in their parental strain of BCG. In addition, rBCG(rBCG/B.FA) over-expressing Ag85A and Ag85B induced strong IFN-${\gamma}$ production in splenocytes. However, there was no significant difference in protective efficacy between rBCG and their parental BCG strain. In this study, therefore, rBCG over-expressing Ag85A, Ag85B, or both failed to show enhanced protection against M. tuberculosis infection in a mouse model.
The quality improvement of antigen (crude saline extract) of Spirometra maptscni 1)lerocercoid (sparganum) was investigated by protein purificatioll. The crude extract was fractionated by gel filtration through Sephacryl S-300 Superfine. Its third fraction was purified by affinity chromatography using a monoclonal antibody as ligand. When observed by SDS-PAGE, the purified protein was composed of 2 bands of 36 kDa and 29 kDa which were found already as the most sensitive components in the crude extract by immunoblots with patients sera. The quality of the purified antigen was evaluated in comparison with the crude extract by ensyme-linked imnunosorbent assay (ELISA) for the specific (IgG) antibody in sera of human sparganosis, other parasitic and neurologic diseases, and normal control. When the purified antigen was used: the sensitivity was not altered but remained high (96.4%) while the specificity was increased from 86.8% to 96.9%.
Purpose : Serum squamous cell (SCC) antigen levels were examined in uterine cervix cancer undergoing radiation therapy, and authors analyzed the relationship between SCC antigen levels and treatment results. Materials and Methods :This is a retrospective study of 181 conical carcinoma patients who received radiotherapy and examined serial serum SCC antigen from 1991 to 1997 at Soonchunhyang University Hospital. One hundred and eighteen patients underwent SCC antigen evaluation at diagnosis The relationship between the serum tumor marker level and disease free survival, recurrence pattern, and other prognostic factors were analyzed according to various statistical methods. Results : The Positivity rate (initial serum value above 2.5 ng/ml) was increased with FIGO stage (IB-IIA 57% to IV 91%) and more discriminative than cutoff value of 1.5 ng/ml. Five year disease free survival rates for the stage IB-IIA, IIB, III and IV were 79.2%, 68.7%, 33.4% and 0%, respectively. The 5-year disease free survival rate for patients with serum SCC antigen levels above 5.0 ng/ml was 34% versus 55~62% for patients with normal range (>1.5 ng/ml) or mildly elevated levels (1.5~5.0 ng/ml). Rising SCC antigen levels preceded the clinical detection of disease by a mean of 4.8 months (range 1 ~13 months). Negative linear correlation was observed between initial SCC antigen levels and relapse free survival (r=-0.226), and by multivariate analysis, initial SCC antigen level had a large impact on the relapse free survival. Conclusion : SCC antigen assay is a useful aid to predict the prognosis of squamous cell carcinoma of the uterine cervix and to detect recurrence.
We studied the serological reaction between various antigenic components from Cysticercus cellulosae and IgG antibodies in sera of cysticercosis, sparganosis, hydatidosis patients and normal humans by ELISA and EITB. In serological tests by ELISA, we recognized cross reaction of Cysticercus antigenic components with IgG antibodies in heterologous sera such as sparganosis and hydatidosis patients or normal humans. The crude antigenic components of Cysticercus showed lower ELISA sensitivity in homologous sera from cysticercosis patients than heterologous sera from hydatidosis patients. A total of 31 polypeptide bands with 260 KDa~22 KDa molecular weights were detected by SDS-PAGE, and 11 of them showed strong intensity. Total 22 components of them were recognized by IgG antibodies in cysticercosis patients sera. However, 12 of them were recognized also by normal human sera, 11 were by sparganosis sera, and-21 were by hydatidosis patients sera. The crude antigenic components of 104 KDa, 82 KDa, 72 KDa, 59 KDa and 34 KDa molecular weights were nonspecific ones, which cross-reacted with sera of either cysticerco, =is, sparganosis, hydatidosis patients or normal humans.
Antigen is substance causing disease derived from pathogen. Living organism has the immune system in terms of defense mechanism against antigen. Antigen is processed through several pathways such as phagocytosis, antibody action, complement activation, and cytotoxins by NK or cytotoxic T lymphocyte via MHC molecule. Lymph node (LN) is comprised of the complicated 3 dimensional network and several stromal cells. Fibroblastic reticular cells (FRC) are distributed in T zone for interaction with T cells. FRC produces the extra cellular matrix (ECM) into LN for ECM reorganization against pathogen infections and secretes homing chemokines. However, it has not so much been known about the involvement of the antigen process of FRC. The present report is for the function of FRC on antigen process. For this, FRC was positioned with several infected situations such as co-culture with macrophage, T cell, lipopolysaccharide (LPS) and TNFα stimulation. When co-culture between FRC with macrophage and T cells was performed, morphological change of FRC was observed and empty space between FRCs was made by morphological change. The matrix metallo-proteinase (MMP) activity was up-regulated by Y27632 and T cells onto FRC. Furthermore, inflammatory cytokine, TNFα regulated the expression of adhesion molecules and MHC I antigen transporter in FRC by gene chip assay. NO production was elevated by FRC monolayer co-cultured with macrophage stimulated by LPS. GFP antigen was up-taken by macrophage co-cultured with FRC. Collectively, it suggests that FRC assists of the facilitation of antigen process and LN stroma is implicated into antigen process pathway.
A DNA sequence encoding the adr subtype preS2 region of hepatitis B virus envelope protein was fused to 5' end of lacZ gene yielding a plasmid pTSZ, in order to produce a preS2-$\beta$-galactosidase fusion protein. Serial deletions from 3' and 5' end of preS2 were constructed in plasmids, which were expressed and their antigenicities were examined with the monoclonal antibody H8. Deletions from amino and carboxy terminal to certain points did not affect the antigenicity, but the longer deletions destroyed the antigenicity. End points of deleted preS2 sequence were determined by DNA sequencing. As a result, each end of preS2 epitope was located in the region of amino acid residue 130-132 and 140-142, respectively. Residue 143 may be supplementary for antigenic epitope since the deletion from carboxy terminal to residue 143 revealed partial defect of antigenicity. In the interval of antigenic epitope the amino acid differences between adr and adw2 subtype occurred ar residue 130, 132, and 141. This result indicated that one or more of the three residues are responsible for the binding specificity of monoclonal antibody H8 to adr subtype preS2 fusion protein.
Hybridoma cell lines, which secrete monoclonal antibodies (mAbs) against the surface antigens of Cryptosporidium parvum Sporozoites, were produced by fusing spleen cells of C. parvum Sporozoite-immunized mice with P3-X63-Ag8 myeloma cells. Two cloned antibody-secreting cell lines, Kor1 and Ea2, were established and produced IgG1 and IgG2a antibodies, respectively. Percoll-purified sporozoites were solubilized and separated by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis. Western blot assay demonstrates that an antigen of 20-kDa was bound by monoclonals. By indirect immunofluorescence microscopy, mAb exhibited uniform binding to the sporozoite surface.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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