Apoptosis로 일컬어지는 예정된 세포사멸(programmed cell death)은 개별 세포의 입장에서는 곧바로 사멸을 의미하지만, 정상적인 고등 생물의 입장에서는 개체의 발생과 분화하는데 프로그램된 과정이다. 자발적 세포사멸은 다른 조직에 비해 생식 조직인 난소나 정소에서 복잡한 apoptosis 기작들을 가지리라 사료된다. 본 연구는 Bcl-2 family중 apoptotic protein인 Bax에 대해 suppression하는 유전자를 yeast system을 활용하여 돼지 정소와 난소로부터 각각 cDNA library를 구축한 후 탐색하였다. 탐색에 활용된 cDNA library는 돼지의 정소와 난소로부터 mRNA를 분리하여 yeast vector인 pAD-GAL4-2.1에 구축하였고, 마우스 bax 유전자는 gal 1 promoter의 조절 하에 glucose 배지에서는 유도되지 않고, galactose 배지에서만 선택적으로 Bax를 발현할 수 있는 효모 vector(pL19-bax)를 구축하였다. Bax에 의한 apoptosis suppressor를 탐색하기 위해 우선 효모 W303에 pL19-bax를 transform하여 glucose 배지에서 Bax의 발현을 억제하였다. pL19-bax를 가진 효모에 정소와 난소로부터 구축된 cDNA library를 transform 시키고, transform된 효모는 각각 Bax에 의한 toxicity를 저해하는 유전자를 찾기 위해 스크린되었다. 이러한 방법으로 정소 cDNA library 탐색에서는 5 $\times$$10^{6}$ transformant중 39개, 난소cDNA library 탐색에서는 2 $\times$$10^{6}$ transformant중 26개의 콜로니가 생존하였다. 이들 콜로니로부터 유전자를 분리하여 분석해 본 결과 여러 그룹으로 분류할 수 있었다. 각 그룹의 관련 유전자는 protein synthesis/degradation 12종, oxidation/reductation 5종, detoxin/ cell cycle promoter 3종, signal transduction/growth factor 5종, 그리고 알려지지 않은 유전자 9종이었다. 그 중, bax-toxicity inhibition에 강력한 survival phenotype을 가지는 유전자(pSEDL)를 동정하였다. 이것은 T3-4-1 콜로니로부터 분리하였는데 140개 아미노산으로 이루어진 인간 SEDL(GenBank, XM_013096) 유전자와 매우 유사한 homology를 가지며, bax와 관련된 기능은 밝혀져 있지 않다. 이외에도 분리된 유전자에는 NADH, thioreduction, 그리고 cytochrome oxidase와 같은 positive 유전자 군이 크로닝되어, Bax를 이용한 효모에서 apoptosis suppressor에 관련된 유전자를 손쉽게 스크린하는 것이 가능하고, 분리된 유전자의 기능을 예측할 수 있어 지금까지 보고된 유전자 크로닝법 보다는 강력한 수단으로 활용될 수 있다는 사실을 시사하였다. 그러나, ORF에 관계없이 Bax 발현에 저항하는 유전자군이 선발된다든지 하는 문제점은 금후 검토가 필요하리라 사료된다.
목적 : 최근 한의학에서 널리 사용되며, 신경계 질환에도 응용되고 있는 봉약침의 농도의존적 효과를 알아보기 위하여, 대표적인 신경 퇴행성 질환인 파킨슨병의 동물모델을 통해 세포보호효과와 세포사멸 및 신경염증 기전을 관찰하였다. 방법 : C57BL/6 mice에 신경독소인 1-methyl-4-phenyl-1, 2, 3, 6-tetrahydropyridine(MPTP)를 4번 복강내 주입하여 중뇌의 흑질 도파민 신경세포를 파괴하여 Parkinson 질병동물 모델을 만든 후, 2개의 군에는 마지막 MPTP 투여 2시간 후에 1차, 그 후로 48시간이 지날 때마다 양측 신수에 각각 0.06mg/kg 농도와 0.6mg/kg 농도의 봉약침을 시행하여 총 4회 시술한 후, 도파민 세포를 측정하는 TH 면역조직 화학법을 통해 세포의 보존 정도를 관찰하고, 세포사멸과 관련된 양상을 확인하기 위하여 Caspase 3, 신경염증과 관련된 양상을 확인하기 위하여 iNOS의 발현여부를 면역 조직화학법을 이용하여 관찰하였다. 결과 : 관찰결과 MPTP 투여 후 MPTP 투여군의 흑질의 도파민 세포 수는 감소하였으나 0.6mg/kg 봉약침을 투여한 경우에는 유의성 있게 세포 수가 유지되었다. Caspase-3와 iNOS 발현억제 실험에서 0.6mg/kg 봉약침군은 MPTP 투여군과 0.06mg/kg의 봉약침군과 비교하여 Caspase-3, iNOS 발현을 유의하게 억제하였다. 결론 : 봉약침은 MPTP 투여로 인한 신경세포 손상에 대하여 농도에 따라 세포사멸 기전과 신경염증 기전을 억제함으로 신경세포를 보호하는 것으로 추정되며, 추후 적절한 경혈점 및 최적의 봉약침 농도를 찾는데 지속적인 연구가 필요할 것이다.
Park, Gan-Yeong;Kim, Gon-Jun;Lee, Hyeon-U;Yun, Ji-In;Sim, Jae-Yun;Kim, Gyeong-Tae;Kim, Gyu-Cheon;Lee, Jae-Gu
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2010.02a
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pp.41-41
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2010
상온에 준하는 저온의 플라즈마를 발생시키는 장치들이 개발되면서, 저온 플라즈마와 생체조직간의 상호작용에 대한 연구가 큰 관심을 끌고 있다. 플라즈마에서 발생되는 다량의 이온과 활성종, 그리고 UV 등이 박테리아나 세포들과 작용함으로 해서 암세포 사멸, 치아 미백, 박테리아 살균/멸균, 지혈등의 효과들이 나타나고 있으며, 이러한 효과들을 극대화할 수 있는 장치 개발과 플라즈마와 생체조직간의 상호작용 메카니즘을 규명하는 것이 중요한 이슈가 되고 있다. 나노 금입자를 암세포의 막단백질인 FAK의 항체와 결합시킨 중합체를 만들어서, 암세포 표면에 나노 금입자붙이고, 플라즈마를 조사했을 때, 나노 금입자가 부착되지 않았을 경우에 비해서, 5배이상 사멸률이 증가하였다.[1] 변색된 치아에 미백제의 주성분인 과산화수소를 도포하고, 10분간 플라즈마를 조사하게 되면, 과산화수소만 도포했을 때에 비해, 치아 표면의 색이 3배이상 밝아지는 것을 관찰할 수 있었다. 과산화수소를 플라즈마에 노출시켰을 때, 활성종인 OH의 생성이 2배이상 증가하였고, 플라즈마에 의한 OH 생성의 촉진이 치아 미백효과가 증대되는 주된 요인인 것으로 추측된다.[2] 플라즈마에서 발생되는 O, $O_3$와 같은 활성종들은 살균력이 뛰어나기 때문에, 저온 플라즈마를 의료기구의 소독/멸균에 응용할 가능성이 아주 크다. 대장균이나 구강 세균이 플라즈마 처리로 5분이내에 멸균되는 것을 확인하였고, 핸드피스와 같은 의료기구를 오염시켜서 멸균 테스트를 수행하고 있다.
Generally, excessive soil water stress in vegetative growth stage inhibits the growth of soybeans. Leaf area expansion of the plant during excessive soil water stress was only half and the respiration of roots was much diminished compared with the plant none water stress. When excessive soil water stress to the soybeans was continued for 7 days, outer epidermis and vascular system of tap root were severely cracked, more than thirty-five percent of nodule was died and the bacteroid layers of alive nodule were disintegrated.
Effects of 18 kinds of yuza extracts on viability of prostate cancer cells, DU 145 and LN-CaP, were investigated. Chloroform and methanolic extracts of yuza peel exhibited moderate cytotoxicity against both cancer cell lines dose-dependently and also showed antioxidant activity matching on inhibition of cell viability (author's intension not clear). Chloroform extract of yuza peel exhibited highest radical-scavenging activity and cytotoxicity against prostate cancer cells in vitro.
We investigated on the prevalence and extermination of scuticociliatids parasitic on cultured japanese flounder, Paralichthys olivaceus in land-marine tank system of southern Korea from January to February in 1997. The gills and the skin showed the highest infection rate(60%), and the brain showed the lowest(22%). Also, fish secreted large quantity of mucus with a bleeding and ulcerated lesions on the infected sites. The number of the parasites in inflowing sea water, surface water and bottom water of farming tank ranged 0~1 individuals/$100m\ell$, 0~413 individuals/$100m\ell$ and $7\sim7.3{\times}10^4$ individuals/$100m\ell$, respectively. This parasite was died within 2 hours in 50~500 ppm, 48 hours of 10 ppm formalin or hydrogen peroxide, 1 hour in 50~500 ppm, 80 minutes of 10 ppm oligo chitosan and 10 minute in 100% but did not died until 48 hours in 10~70% fresh water.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.30
no.6
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pp.1095-1101
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2001
Spinach was minimally processed into the unseasoned side dish to be used for Korean food service industry, using the techniques of cook-chill and sous vide. Spinach was blanched at 10$0^{\circ}C$ for 6 minutes, vacuum-packaged in the unit of 500 g by plastic film of low gas permeability, pasteurized at 9$0^{\circ}C$ and then cooled rapidly at 3$^{\circ}C$. The chilled products were then stored at 3 and 1$0^{\circ}C$ with measurement in their quality. Six log cycle (6D) inactivation of Listeria monocytogenes and 13 log (13D) thermal destruction of Streptococcus faecalis were compared as two pasteurization conditions, which corresponded to heating for 22.8 and 30.0 minutes at 9$0^{\circ}C$, respectively. Milder heat processing based on 6D process of L monocytogenes gave better quality of color, texture, ascorbic acid and chlorophyll than the conditions of 13D process of S. faecalis. Any microbial growth in total aerobic, psychrophilic and anaerobic bacteria was not observed until 8 days at 1$0^{\circ}C$ and 14 days at 3$^{\circ}C$, which might be regarded as strict guidelines of shelf life. Storage times based on the changes in physical and chemical quality were longer than those based on strict microbial quality in case of the products pasteurized by 6D process of L. monocytogenes. The seasoned vegetables prepared from sous vide processed spinach were found to be inferior in sensory quality to those from freshly blanched one.
Kim, Jae-Hun;Jeon, Sun-Sil;Kim, Jang-Ho;O, Sang-Hui;Seo, Ji-Hyeon;Kim, Gyeong-Hui;Lee, Ju-Un;Byeon, Myeong-U
Proceedings of the Korean Society for Food Science of Animal Resources Conference
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2004.10a
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pp.183-187
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2004
본 연구는 최근 위해성의 논란이 되고 있는 육가공 첨가제인 아질산염을 대체할 수 있는 기술을 제시하기 위해 시행되었으며, 이를 위해 천연추출물인 파프리카와 매실 추출물을 육포에 첨가하여 미생물 사멸을 위해 감마선 및 전자선을 처리하였다. 그 결과 아질산염을 첨가하지 않고 상기 기술들로 현재 시판되는 육포와 유사한 지질 산패도, 색도, 조직감을 유지할 수 있었으며, 특히 10 kGy 조사에 의해 곰팡이 및 효모를 비롯한 총 호기성 미생물이 효과적으로 사멸되어 육포의 저장성과 안전성을 확보할 수 있었다.
목 적 : 본 연구의 목적은 양릉천 침 처치 시 C57BL/6 생쥐의 중뇌 흑질에 위치한 도파민성 신경세포 사멸 억제 효과를 조직화학 염색법을 이용하여 Tyrosine hydroxylase(TH)와 laminin의 발현으로 관찰하고자 한다. 실험방법 : 실험에 이용한 동물은 C57BL/6 생쥐로, 매일 25mg/kg의 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP)를 5일간 주사하였고, 매일 MPTP 주사한 뒤 2시간 후에 양릉천에 침치료를 시행하였으며 MPTP 주사를 종료한 뒤 침치료는 7일동안 계속 시행하였다. 마지막 MPTP 주사 7일 후에 동물을 희생하여 뇌를 적출하고 고정하였다. 침효과를 확인하기 위해 Thyrosine hydroxylase(TH), laminin의 발현 변화 정도를 조직염색화학법으로 이용하여 확인하였다. 각 그룹간의 유의성 검증은 one-way ANOVA를 이용하였다. 결 과 : 도파민성 신경세포 선택적인 신경독소인 MPTP에 대한 양릉천 침처치에 의한 신경보호 효과를 도파민신경세포의 표지자인 TH 발현을 면역화학조직염색법으로 관찰하였다. 대조군에 비해 MPTP 처치 군의 신경세포 사멸이 유의적으로 감소하였고(P <0.05), MPTP + 침처치 군에서 증가되는 양상을 확인하였다 (P <0.05). 또한 도파민성 신경세포내에 존재하는 laminin의 발현정도 역시 대조군보다 MPTP 처치 군에서 유의적으로 감소하였고, MPTP + 침처치 군에서 증가되는 양상을 확인하였다 (P <0.05). 결 론 : MPTP에 의한 도파민성 신경세포 손상에 대한 양릉천 침처치의 신경보호 효과는 세포외 기질중의 하나인 laminin의 발현 정도를 조절하여 비롯되는 것으로 사료된다.
Apoptosis is a crucial mechanism for the proper regulation of homeostasis. BCL-2 family proteins are key molecules which control cellular survival and apoptosis. MCL-1 (myeloid cell leukemia-1) is a pro-survival member of BCL-2 family that promotes the survival of cells, and is highly expressed in diverse cancers including ovarian cancer, leukemia, and cervical cancer. Previously we identified IEX-1 (immediate early response gene X-1) as a binding partner of MCL-1. In the present study, we demonstrated that overexpression of IEX-1 induced apoptosis of ovarian cancer cells. Moreover, IEX-1 significantly attenuated the pro-survival function of MCL-1 in these cells. Also, IEX-1-induced cell death activity was able to be modulated by changes in the expression level of MCL-1. Thus, these results suggest that both IEX-1 and MCL-1 modulate each other's function controlling cellular survival and death and the inhibitory activity of IEX-1 toward MCL-1 may be applied for the development of chemotherapeutics.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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