최근 들어 초음파를 활용한 항암 치료법은 미세한 기포 또는 조영제를 환자에게 주입한 후 특정 주파수의 초음파를 발생시켜 세포의 괴사를 유도하는 치료법으로서, 항암치료 중 발생가능한 부작용을 현저히 감소시킬 수 있는 유용한 치료법으로 제안되고 있다. 이는 정기적인 세포의 사멸은 세포의 손상과 관계없이 필수적인 생물학적 프로세스이며, 초음파는 이러한 세포의 사멸을 유도 또는 증폭시키는 효과가 있기 때문으로 알려져 왔다. 한편, 광 역학 치료는 광원의 고유한 파장에 따라 반응하는 광감응제 등과 같은 화합물을 추가적으로 인체에 주입함으로써 특정 암세포의 괴사 유도가 가능하며 이를 위해 다양한 종류의 레이저 사용이 가능하다. 하지만, 고가의 광원과 대형화된 장비, 광원의 자극으로 인한 발열 현상 등의 한계로 제한적인 사용이 가능하여왔다. 이러한 기술적 한계는 소형 발광 다이오드가 개발됨에 따라 광 역학 치료 장비의 소형화와 발열현상의 제어가 가능하게 되었고, 그 결과 발광 다이오드는 레이저의 대체광원으로 인식되었다. 따라서, 본 논문에서는 의료용으로 광범위하게 사용되며, 부작용이 적고, 비교적 저주파인 1 MHz 초음파 발생장치와 저렴한 발광다이오드를 복합적으로 융합한 일체형 암세포 증식억제 모듈을 개발하고 이를 암세포에 적용시켜 효과를 정량적으로 분석하고자 한다.
Cyclooxygenase (COX) is an enzyme involved in the conversion of arachidonic acid to prostaglandins (PGs), and exists in two forms, COX-1 and COX-2. COX has been reported to be involved in early implantation by secretion of PGs which causes permeability of vessels and reaction of decidual cells around the implantation site. Recently, in mice and sheep studies, COX-1 and COX-2 expression in the endometrium has been reported to be different according to implantation and stages of the estrous cycle, but expression of COX-1 and COX-2 in human endometrium during the menstrual cycle has not yet been established. The purpose of this study was to observe the variances of COX-1 and COX-2 expression by immunohistochemical staining in endometrial samples obtained from human hysterectomy specimens and biopsies of women of reproductive age according to different stages of the menstrual cycle. Also, we attempted to observe COX-1 and COX-2 expression in the epithelial and stromal cells of the endometrium obtained during the mid-secretory phase, which were cultured separately. COX-2 showed a cyclic pattern of expression according to the different stages of the menstrual cycle and was strongly expressed particularly at the mid-secretory phase which corresponds to the time of implantation. However, COX-1 tended to be increased in the early proliferative, and mid- and late secretory phases, but was also expressed in the whole menstrual cycle showing no particular pattern. In the separately cultured cells COX-1 was expressed in epithilial cells and COX-2 in the stromal cells. The above results suggest that since COX-2 is expressed at the same time as implantation and cultured cells display a specific secretory pattern, COX-2 has inductive endocrine enzyme properties and has an important effect on endometrial cells during implantation. Also, COX-2 expression in endometrial cells may be utilized as a useful marker of endometrial maturation.
익모초(Leonurus sibiricus L)는 한국, 중국, 일본, 아시아 각지에 야생으로 자생하는 2년생 초본으로 꿀풀과(Labiatae) 식물로 높이 1.5${\~}$2m 정도 자란다. 약효로는 부인병의 각종 자궁질환, 활혈, 조경, 이뇨, 소증 효과는 물론 혈변, 혈뇨, 치질, 대${\cdot}$소변 불통 등의 치료제로 사용한다. 그 외에 고혈압, 강심작용, 항암연구도 활발하다. 익모초의 $CHC1_3$ 엑스와 MeOH 엑스를 $H_2O$, $30\%$ MeOH, $60\%$ MeOH, $100\%$ MeOH로 분획하였고, 이 5가지 분획물들에 대하여 activity guided fractionation 방법에 따라 DPPH free radical에 대한 scavenging activity와 LDL의 lipid peroxidation을 이용한 TBARS assay로 항산화 활성실험을 측정하였다. 그 결과 익모초의 MeOH 엑스는 $30\%$ MeOH, $60\%$ MeOH 분획물이 항산화 활성이 증가하였으며, Vitamin C와 비교해 볼 때 강한 활성을 나타내었다. 또한 pyrogaliol을 이용한 SOD 활성에서도 250 ppm에서는 Vitamin C 보다 우수한 유사 활성을 보였다. 이상과 같이 익모초로부터 비교적 강한 항산화 활성을 확인할 수 있어 천연항산화 기능성 화장품의 개발이 가능하리라 보여 진다.
Objective: To investigate the distribution of BCL-2, BAX proteins and DNA fragmented cells in the normal human endometrium during at each menstrual cycle in order to find out whether apoptosis regulates cyclic endometrial change. Methods: Normal endometrial tissues were obtained from 40 patients, $32{\sim}45$ year of age, all with regular menstrual cycle, who were undergoing abdominal hysterectomy for myoma of uterus or cervical intraepithelial neoplasia for the period from 1992 through 1997. Immunohistochemical staining was used to determine the expression of BCL-2 and BAX protein with paraffin-embedded tissues. Results: BCL-2 was expressed on the glandular epithelial cells and stromal cells during the proliferative phase. The intensity of BCL-2 was increased predominantly on the basal layer than the functional layer in late proliferative phase. However, BCL-2 immunoreactivity was decreased in the secretory phase. BAX was expressed predominantly during the secretory phase. The intesity was increased in late secretory phase rather than early secretory phase. DNA fragmented cells were detected in a few cells at each phase. However, it was increased during the late secretory phase. Conclusion: Apoptosis-related genes, BCL-2 and BAX, may play a role in the regulation of cyclic endometrial change.
35 patients of normal reproductive age group (22-37 yrs) were selected for ovulation induction using $Clomid^{(R)}$ and HMG. Correlation between canalization of cervical mucus and estradiol level in plasma. morphological ovarian follicular change by ultrasonogram, Ferning and Spinnbarkeit were studied in the induced ovulatory menstrual cycles. By retrospective analysis, the results were following; 1. Canalization appeared on the eighth day of the menstrual cycle in $Clomid^{(R)}$ group, and seventh day of HMG group. And the number of the channels increased gradually until the ovulation time. 2. The mean number of channels increased from 12${\pm}$12 in $Clomid^{(R)}$ group, 19${\pm}$14 in HMG group (Day-6) to a maximum of 46${\pm}$22 in $Clomid^{(R)}$ group (Day-1). 3. The maximum plasma estradiol(E2) level was 812${\pm}$722pg/ml in $Clomid^{(R)}$ group (Day-1), 1792${\pm}$504 pg/ml in HMG group (Day-1), and there was a good statistical correlation between the number of channels and the plasma E2 level. 4. The maximal follicular diameter was 19.4${\pm}$6.7 mm in $Clomid^{(R)}$ Group (Day-1) 19.3${\pm}$4.6mm in HMG group (Day-1) and after than decreased. There was a good statistical correlation between the number of channels and the follicular diameter. 5. When grade of ferning was I, the number of channels were 19.4${\pm}$6.7 in $Clomid^{(R)}$ group, 38${\pm}$26 in HMG group. When grade of ferning was III, the number of channels were 54${\pm}$30 in $Clomid^{(R)}$ group, 71${\pm}$36 in HMG group. 6. The maximum score of Spinnbarkeit was 2.6${\pm}$0.5 in Clomid group (Day-0), 2.6${\pm}$0.5 in HMG group (Day-2). In conclusion, the phenomenon of cervical mucus canalization showed the value of the clinical use as an ovulatin marker.
Though the endometriosis is not always related with infertility, endometriosis causes infertility in some patients. There are many treatment modalities of infertile patients who have endometriosis. In recent years, Assisted Reproductive Technology(ART) have been widely accepted as being a useful tool for the treatment of infertile endometriotic patients. The objective of this study was to evaluate the outcome of ART in infertile endometriotic patients who have been carried out IVF-ET from Jan, 1992 to Dec, 1994 and to compare the results between COH/IUI and IVF-ET in the patients with endometriosis stage I. Tubal disease only patients were grouped(308 patient, 956 cycles) as a control. Endometriosis group was subdivided into 4 groups according to American Fertility Society classification; endometriosis stage I (45 patients, 61 cycles), stage II (26 patients, 39 cycles), stage III (26 pateitns, 37 cycles), stage IV (33 patients, 50 cycles). The outcomes of IVF-ET in endometriosis patients were as follows; The oocyte recovery rates were significantly lower in stage III, IV endometriosis. In case of stage III endometriosis, the fertilization rate was significantly lower than other stages of endometriosis. Clinical pregnancy rates per cycle were not different between the tubal group(22%) and the endometriosis group(25%). According to endometriosis stage, the implantation rate and clinical pregnancy rate were significantly lower in stage IV (5.6%, 16%) compared with other stages (I; 10.0%, 26%, II;9.8%, 31%, III;12.6%, 32%). It suggests that some factor like autoantibodies may inhibit implantation of embryos in stage IV endometriosis. To evaluate the possibility that simply increasing the number of gametes at the site of fertilization might account for pregnancies attributed to IVF-ET, the authors retrospectively analyzed the outcome of couples undergoing IUI during hMG cycles and CC cycles between 1992 and 1994 in the women with endometriosis stage 1. In case of stage I endometriosis, though the COH/IUI group showed lower FSH level and lesser age profile than IVF-ET group, IUI group has resulted in lower pregnancy rates(19.2%) compared with the IVF-ET group(26.2%). In conclusion, endometriotic infertile patients can get comparable pregnancy rates with the tubal factor infertility patients during IVF-ET program. Moreover even in stage I endometriosis, IVF-ET may be an more effective treatment modality than COH/IUI.
태반 (placenta)은 임신기간 동안에만 존재하는 태아유래 일시적인 기관으로, 모체와 태아간의 정확한 조절 기전을 통해 태아의 발달을 수행하는 중요한 기관이다. 영양막세포 (trophoblast)는 임신 초기 빠른 분열 및 분화 과정을 거쳐 태반을 형성하는 주요 세포이다. 영양막세포의 역할은 초기 배아 착상 시기부터 40주간의 임신기간 동안 태반의 형성 과정에서 다양하게 변화된다. 착상은 모체 자궁내막층으로의 포배의 가장 밖에 존재하는 분화된 영양막세포(예, 합포영양막세포)의 침윤에 의해 이루어진다. 또한, 영양막세포은 임신기간 동안 배아의 성숙과 발달에 필요한 영양분과 노폐물 등을 모체와 태아 양방향으로 적절하게 전달할 뿐 아니라 태반 내에서 침윤과 다양한 물질들의 합성 혹은 분비에 관련된 대사작용에 관여한다. 이 기간 동안 영양막세포의 기능 이상은 태아의 선천적인 기형뿐 아니라 자간전증 등을 포함하는 다양한 산과질환을 유발하기도 한다. 그러므로, 영양막세포는 태반과 태아의 발달에 결정적인 요인으로 작용한다. 본 고찰에서는 다양한 영양막세포들의 기능을 이해하기 위해 분류 및 그 종류별 특징 등을 살펴보고, 착상 단계와 태반 발달에 따른 영양막세포의 고유한 역할에 대해 알아보고 향후 활용될 수 있는 연구 분야에 대해 알아보고자 한다.
Cervical cancer is one of the leading causes of female death from cancer worldwide with about 500,000 deaths per year. A strong association between certain human papilloma viruses (HPV types 16 and 18) and cervical cancer has been well known. An extract of natural products, named as Somatid, has been used to investigate whether this agent has the ability of inhibiting the oncogenes E6 and E7 of HPV type 16. This Somatid inhibited the proliferation of human cervical cancer cell lines (C-33A, SiHa, CaSki) and HaCaT keratinocytes in a dose response manner, In vitro binding assay and ELISA showed that Somatid inhibited the in vitro biding of E6 and E6AP which are essential for the binding and degradation of the tumor suppressor p53. In addition, Somatid inhibited the in vitro binding of E7 and Rb which is essential tumor suppressor for the control of cell cycle. The levels of mRNA for E6 and E7 were also decreased by Somatid. Our data suggested that Somatid inhibited the oncogenecity of E6 and E7 of HPV 16 type, thus can be used as a putative anti-HPV agent for the treatment of cervical carcinomas caused by HPV.
본 연구에서는 생육시기별로 피자두를 수확한 후 피자두의 아세톤 추출물을 이용하여 인간 유래 간암, 위암, 자궁암, 백혈암 및 유방암 세포주에 대한 세포독성효과를 조사하였고, 특히 유방암 세포주인 MDA-MB-231 세포주를 사용하여 피자두의 유방암 세포의 세포주기에 미치는 영향과 세포사 관련 조절 단백질의 발현 양상을 분석함으로써 피자두의 유방암 억제 기전을 살펴보았다. 인간유래의 암세포주를 이용하여 피자두 추출물의 성장 저해 효과를 측정한 결과, 농도 의존적으로 모든 암세포주에 대해 성장 저해 효과를 보였으며, 특히 피자두 1-4의 미숙과 추출물에서 높은 성장 저해 효과를 보였다. 특히 호르몬 비의존성 유방암세포인 MDA-MB-231에 대한 피자두 추출물의 성장 저해 효과는 4mg/mL의 농도의 모든 추출물에서 높은 효과를 보였으며, 피자두 1의 추출물에서는 97%의 높은 성장 저해 효과를 보였다. MDA-MB-231 세포주에 피자두 미숙과 추출물을 처리했을 때 apoptosis를 유도하는 유전자인 Bcl-2 family에 영향을 미치는 것으로 보여지며, 순차적으로 capase-3 활성이 촉진되고, 이것에 의해 apoptosis가 유도되는 것으로 생각된다. 앞으로 이들 활성성분들의 규명과 인체실험과 더불어 피자두 미숙과에 대한 독성평가가 병행된다면 항암과 관련된 기능성 식품과 치료제 등의 개발에 있어 천연소재로서 피자두 미숙과의 유용성을 기대할 수 있을 것으로 생각된다.
Phellinus ribis(찔레 영지버섯)는 약용버섯으로 일부 항암 및 관절염 치료에 사용되고 있으나 그 활성이 전혀 알려져 있지 않아 1차적으로 40% ethanol 추출물의 생리활성을 확인하였다. 항산화 활성에 있어 nitrosamine의 원인물질인 nitrite 제거활성은 pH 1.2에서 0.5 mg/mL 이하 농도에서는 50% 이하, 그리고 1 mg/mL 처리 시 $64.0{\pm}1.6%$의 제거활성을 나타냈으며, 농도 의존적으로 증가하였다. DNA 손상 및 암, 당뇨, 간경화증, 심혈관질환 등의 원인물질에 관련하여 DPPH radicals의 제거활성은 0.5 mg/mL에서 $62.5{\pm}0.3%$, 1 mg/mL 처리 시 $91.3{\pm}0.8%$로 높게 나타났다. 2.5% linoleic acid의 자동산화에 미치는 항산화 활성을 측정한 결과 0.01 mg/mL 처리 시 p<0.05 수준에서, 0.5 및 1 mg/mL에서는 p<0.001 수준에서 유의성 있게 산화를 억제하였으며, superoxide dismutase 유사활성은 $530{\pm}81\;unit/g$으로 나타났다. 그리고, 항고혈압에 관련된 angiotensin converting enzyme 저해 활성은 $12.0{\pm}1.5%$로 그 활성이 미약하였다. Human 유래 암세포에 대한 세포독성 실험결과 폐암세포인 A549의 경우 100 mg/mL 농도에서도 16%로 나타나 세포독성이 미약하였고, 자궁암 세포인 HeLa의 경우 50 mg/mL에서 45%의 효과를, 위암 세표인 AGS에서는 5 mg/mL 처리 시 24%, 50 mg/mL에서는 76%, 그리고 간암 세포주인 SK-Hep-1의 경우 50 mg/mL에서 42%의 세포독성을 나타내었다. Salmonella typhimurium TA98 및 TA100에 대한 돌연변이원성 시험결과 찔레 영지버섯 추출물은 자연복귀 집락보다 histidine revertant colony 수가 2배 이상 증가하지 않았고, 추출물의 첨가농도를 증가시켜도 histidine revertant colony 수가 증가하지 않아 돌연변이성이 없었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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