본 연구에서는 연속확산식 무세포 단백질 발현 시스템을 이용한 이황화결합 함유 단백질의 생산 시, 발현된 단백질의 응집으로 인한 비활성화의 문제점이 분파샤페론을 통한 발현 단백질의 용해도 증가, 세포 파쇄액의 화학적 처리를 통한 환원활성 제거, 산화환원완충액을 이용한 적절한 산화환원전위의 제공 등을 통해 단백질의 폴딩에 유리한 반응조건을 구축함으로써 해결될 수 있음을 보였다. 이러한 연구 결과는 각종 게놈 시퀀싱 프로젝트의 빠른 진척에 따라 현재 요구되고 있는 고속, 고효율의 단백질 발현 수단으로써 무세포 단백질 발현 시스템이 적용될 수 있는 가능성을 높여 줄 수 있을 것으로 기대된다.
Unfortunately, there is no technique which is stable and repetitive to produce transgenic chicken, although various ways of gene transfer including PGC-and embryonic cell-mediated gene transfer, DNA microinjection, virus inoculation and sperm cells have been employed. The aims of this study were 세 develop and establish such a stable, repetitive and efficient way of gene transfer giving a faithful gene expression during development after the reconstruction of embryo in an UV-irradiated egg. A dual reporter plasmid (pJJ9), a fusion gene containing lacZ and GFP driven by a CMV promoter was used to exploit either merits of both reporting markers. lacZ with strong signal or GFP with vital marking. Electroporated embryonic blastodermal cells (EBCs) in the presence of the pJJ9 DNA faithfully showed 377 bp PCR product and lacZ or GFP expressions in the identical cells in vitro of in vivo. Furthermore, analyses of expression pattern of the foreign DNA demonstrated that microinjected EBCs cells into the UV-irradiated recipient egg should participate in normal developmental process, for example, proliferation and differentiation into various tissues. Thirty percentages of the manipulated eggs showed lacZ expression in their tissues. These results together with the specific procedures used in this study should facilitate avian transgenesis.
Yttrium (Y)이 도핑 된 ZnO 나노 구조물을 수열합성법으로 제작하였다. 먼저 졸겔법으로 SiO2/Si 기판 위에 seed layer (Y-doped ZnO ; Y0.02Zn0.98O)를 제작하였으며 5번의 코팅을 진행하여 박막의 두께는 약 180 nm로 측정이 되었다. 그 후 진공 분위기에서 RTA를 이용하여 $500^{\circ}C$에서 3분간 열처리가 진행되었다. 이어서 수열합성법으로 mole 농도를 0.5~1.0 M 범위에서 변화시키며 YZO 시료를 제작하였다. X-ray diffraction (XRD)을 통해서 Y2O3 또는 결함과 관련된 피크는 관찰이 되지 않았으며, 모든 구조물에서 압축응력이 존재하는 알 수 있었으며, field emission scanning electron microscope (FESEM)에서 나노 구조물의 크기와 형태는 수열합성법의 mole 농도에 많은 영향을 받는 것으로 나타났다. Hall effect 측정을 통해서 모든 구조물은 n-type 전도 특성을 가지는 것으로 나타났다. 또한 광학적 특성인 photoluminescence (PL)에서는 수열합성법의 화학식을 고려할 때 Zn가 rich한 상태에서는 Zn interstitial로 존재하는 것으로 나타났고, mole 농도가 높아 질수록 free exciton에 의한 재결합인 UV emission이 우세하게 나타났다.
Neurotoxicity in the workplace may occur with exposure to scores of chemicals. Although large acute outbreaks of the occupational neurological disease are rare, the incidence of occupational neurotoxicity in its subtler aspects is unknown. A working knowledge of both the major occupational neurotoxic solvents and the tools used by cliniical neurologists and neurotoxicologists to evaluate neurotoxicity in working populations is a necessity fur the occupational physician. To investigate the effects of carbon disulfide($CS_2$) on the peripheral nerve system using the nervous conduction study, 105 male workers working in the spinning room of a viscose rayon factory were examined and compared with a sex and age matched, unexposed 105 male controls using t-test analysis. 72.4% of $CS_2$-exposed workers complained of neurological symptoms, and the abnormal cases in nerve conduction study were 48.6%. The abnormal cases of nerve conduction study increased in number according as the age and duration of exposure increased. In this study, asymptomatic workers were confirmed to have subclinical neuropathy by nerve conduction study. Also as there were abnormal cases even in its duration of exposure below 4 years, nerve conduction study turned out to be ways of discovering of early peripheral neuropathy. In nerve conduction study, the amplitude, velocity, F-wave latency and H-reflex of the motor and sensory nerves in both upper and lower extremities were significant different between $CS_2$-exposed workers and the controls. From the pathological viewpoint, both segmental and axonal degenerations were assumed in this study.
The purposes of this study are the identification and determination of metabolites in the isolated rat liver perfusate of carbon disulfide by two-dimentional thin-layer chromatography and high performance liquid chromatography for understanding the metabolism of carbon disulfide. 2-Thio-thiazolidine-4-carboxylic acid(TTCA) was synthesized by the reaction of carbon disulfide and cysteine, and confirmed by two-dimentional thin-layer chromatography, high performance liquid chromatography, UV spectroscopy, and IR spectroscopy. The absorbance of UV detector for the simultaneous determination of TTCA and thiocarbamide was 254 nm although their maximum spectra were 273 nm and 237 nm, respectively. Two kinds of the developing solvent in the two-dimentional thin-layer chromatography were 2-butanol : 80% HCOOH : $H_2O$ (7 : 2 : 1) as the first developing solvent and 2-propanol : $H_2O$ (4 : 1) as the second developing solvent. After perfusion of carbon disulfide ($8274.23{\mu}mol$), the amount of TTCA and thiocabamide of the perfusate(100 ul) were $12.02-16.4{\mu}mol$ and $5.25-8.15{\mu}g$, respectively. The mean amount of them were $14.08{\mu}mol$ and $6.41{\mu}mol$ respectively, and the former was 2.20 times greater than the latter. For conforming the mechanism of formations of TTCA and thiocarbamide in vivo, we have to clarify whether the reactions between carbon disulfide and ammonia, ammonium salts, amides, cysteine, cystine, or proteins will be formed in vitro.
The aim of this study was to determine the shaping ability of stainless-steel K file (S-S K file), nickel-titanium K file (Ni-Ti K file) and engine driven nickel-titanium file (Quantec file) in resin simulated root canal. Computed tomography was used to evaluate the change of the root canal morphology. Thirty nine resin simulated root canal were divided into four groups (A:12, B:12, C:12, D:3). Resin simulated canals were scanned by computed tomography before instrumentation (1st C-T scan). Canals were instrumented using step back preparation technique with S-S K file in group A and Ni-Ti K file in group B. Group C was prepared with engine driven Ni-Ti file. Group D was uninstrumented to compare the 1st C-T scan images with 2nd C-T scan images of root canal. Instrumented canals were again scanned using computed tomography (2nd C-T scan), and reformated images of the uninstrumented canals were compared with images of the instrumented canals. In the sections of 2mm and 6mm from the apex, Quantec file caused significantly less canal transportation than S-S K file and Ni-Ti K file (p<0.05). Quantec file produced more centered than S-S K file and Ni-Ti K file in the sections of 2mm and 4mm from the apex (p<0.05). There was no significant difference in the removed volume of canals among the each groups (p>0.05). However the removed canal volume from the apex to 5mm were significantly higher than them from 5mm to 1mm (p<0.05) in each groups. Under the conditions of this study, preparation with Quantec file was more effective and produce more appropriate canal shapes than S-S K file and Ni-Ti K file.
위성에서 관측된 다 대역 위성영상 데이터를 이용목적에 따라 분류하기 위해서는 복잡한 처리과정과 많은 시간을 필요로 하며, 감독분류시 훈련 데이터의 선택과 고려되는 다양한 특징 값들은 분류 정확도를 좌우할 만큼 민감한 특성을 나타내고 있다. 따라서 본 논문에서는 훈련데이터의 선택과 다양한 특징 값들 중 실제 영상분류에 기여도가 높은 특징을 추출하기 위하여 퍼지 기반의 $\gamma$모델을 이용한 분류네트웍을 구성하였다. 훈련집합 선택시 분류하고자 하는 지역의 밝기 분포도, 텍스쳐 특징 그리고 NDVI(Normalized Difference Vegetation Index)를 분류에 사용될 특징으로 선택하였고, 분류네트웍 출력 값의 오류가 최소화 되도록 Gradient Desoent 방법을 이용하여 각 노드의 $\gamma$파라미터를 훈련시키는 과정을 채택하였다. 이러한 훈련을 통하여 얻어진 파라미터를 이용하면 각 노드의 연결특성을 알 수 있으며, 다양한 입력 노드의 특징들 중 영상분류에 기여도가 적은 특징들을 추출하여 제거할 수 있다.
In friction and wear tests that use friction force microscopy (FFM), the wear debris transfer to the tip apex that changes tip radius is a crucial issue that influences the friction and wear performances of films and coatings with nanoscale thicknesses. In this study, FFM tests are performed for bilayer $MoS_2$ film to obtain a better understanding of how geometrical and chemical changes of tip apex influence the friction and wear properties of nanoscale molecular layers. The critical load can be estimated from the test results based on the clear distinction of the failure area. Scanning electron microscopy and energy-dispersive spectroscopy are employed to measure and observe the geometrical and chemical changes of the tip apex. Under normal loads lower than 1000 nN, the reuse of tips enhances the friction and wear performance at the tip-sample interface as the contact pair changes with the increase of tip radius. Therefore, the reduction of contact pressure due to the increase of tip radius by the transfer of $MoS_2$ or Mo-dominant wear debris and the change of contact pairs from diamond/$MoS_2$ to partial $MoS_2$ or Mo/$MoS_2$ can explain the critical load increase that results from tip reuse. We suggest that the wear debris transfer to the tip apex should be considered when used tips are repeatedly employed to identify the tribological properties of ultra-thin films using FFM.
Two-dimensional materials such as graphene, h-BN, and $MoS_2$ have attracted increased interest as solid lubricant and protective coating layer for nanoscale devices owing to their superior mechanical properties and low friction characteristics. In this work, the frictional properties of single-layer graphene, h-BN, and $MoS_2$ are experimentally investigated under various normal forces using atomic force microscope (AFM) tips with a spherical and flat end, with the aim to gain a better understanding of frictional behaviors. The nonlinear relationship between friction and normal force friction was clearly observed for single-layer graphene, h-BN, $MoS_2$ specimens slid against the spherical and flat AFM tips. The results also indicate that single-layer graphene, h-BN, $MoS_2$ exhibit low frictional properties (e.g., friction coefficient below 0.1 under 70~100 nN normal force). In particular, graphene is found to be superior to h-BN and $MoS_2$ in terms of frictional properties. However, the friction of single-layer graphene, h-BN, $MoS_2$ against the flat tip is larger than that against the spherical tip, which may be attributed to the relatively large adhesion. Furthermore, it is shown that the fluctuation of friction is more significant for the flat tip than the spherical tip. The resutls of this study may be helpful to elucidate the feasibility of using two-dimensional materials as solid lubricant and protective coating layer for nanoscale devices.
최근 Flammulina 종들에 대한 유전체 염기서열 분석결과가 보고되었고, 그로 인해 다양한 유전자 정보가 밝혀지고 있다. 본 연구에서는 Flammulina elastica 전체 유전체 서열의 laccase 유전자를 동정하고 구조적 특징 분석을 수행하고자 하였다. 유전체 분석 및 생물정보분석을 통하여 F. elastica 유전체 내 3개의 laccase 유전자(Fe-lac1, Fe-lac2, Fe-lac3)를 확인하였고, 이들 유전자 내에는 10개의 히스티딘 잔기와 1개의 시스테인 잔기를 가지는 구리 이온 결합 영역과 4개의 시스테인 잔기를 가지는 이황화결합 형성 부위가 존재하는 것을 확인하였다. 1,548~1,602 bp의 laccase 유전자에 대한 전장 cDNA 염기서열 분석을 통하여 12~16개의 인트론이 존재하는 것을 확인되었으며, N-말단으로부터 17~22 bp의 사이에 신호펩타이드가 존재하는 것이 확인되었다. 본 연구를 통하여 F. elastica의 laccase 유전자를 최초로 동정하여 구조적 특징을 분석하였고, 이러한 결과는 F. elastica의 바이오매스 분해에 대한 이해를 돕는데 활용될 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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