Viruses have various applications in the biopharmaceutical industry. They are used in pesticide production, production of vaccines, gene transfers, cancer therapeutics, and more. The downstream processing of viruses is an essential step for their biological and pharmaceutical applications. Among the various processes, the purification of viruses is critical. Membrane chromatography plays a vital role in this process. While ion exchange membrane chromatography is a primarily used method, it has various limitations regarding size exclusion and insufficient purification. Also, it cannot be applied to the rapidly changing strains of viruses such as influenza. This review examines various improved methods of membrane chromatography or alternatives. It focuses on purification, viral recovery rates, and scalability of the methods.
An ion-association chromatography was applied for the separation and determination of individual rare earth elements (REE) contained in mineral monazite. Prior to the determination, the group separation of REE was achieved by a cation exchange column of Dowex 5OW-X8 resin. The quantitative recovery of REE by the resin column, free from coexisting elements in monazite, was confirmed with radioactive tracers as well as with ICP-MS. Individual REE at ppm level was separated on reversed-phase column ($\mu$-Bondapak $C_{18}$) using gradient elution from 0.05 to 0.3 M $\alpha$-hydroxyisobutyric acid at pH 4.6. The individual REE was detected at 546 nm following post-column reaction with PAR (4-(2-pyridylazo)-resorcinol monosodium salt).
The liquid chromatographic retention behavior of structural isomers of phenols was investigated by a change of the mobile phase properties. The retention behavior of structural isomer of phenols in reversed phase liquid chromatography was affected by eluent electrolyte added. It can be seen that this behavior is illustrated by a mechanism of Langmuir isotherm and ion exchange between phenolate and the reversed phase coated with ions. The retention behavior was represented as two different areas according to the concentration of the electrolytes. These areas can be explained as counter ion and co-ion effect, respectively. The maximum retention values were dependent not upon the kinds of organic modifier but upon the kinds of electrolyte.
Lysozyme is an important antibacterial material, as effective food preservative. A number of lysozymes are found in nature such as egg white, where exists about 3.5% of egg proteins. In this study, carboxymethyl cation exchange chromatography has been used for separation of lysozyme. A simulation study by ASPEN was also performed for saving time and cost in chromatography purification experiments. Important parameters in experimental chromatography were sample loading amount, NaCl concentration, and pH of eluent. Simulation results were successfully fitted with chromatograms from experiments with change of parameters mentioned above.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1993.04a
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pp.60-60
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1993
새로운 항생물질을 개발하기 위하여 토양으로부터 분리한 균주를 액체배지에서 배양하여 그 배양액을 여러 검정균에 대하여 종이디스크법으로 항균효력을 측정하였다. 그 결과 G(+), G(-)균에 강한 항균효력을 보인 토양균 SNUS 9101-55와 C. aibicans와 같은 진균류에 항균력을 보인 토양균 SN-US 9101-68을 선택하여 각각의 배양액에서 항생물질을 분리하고, 분리한 항생물질의 구조를 규명하고자 하였다. 토양균 SNUS 9101-55의 배양액으로부터 항생물질을 분리하기 위하여 양이온 교환수지 관 크로마토그래피와 셀룰로오스 관 크로마토그래피를 수행하여 시료 AMJ-I-212-B를 얻었다. 시료 AMJ-I-212-B의 IR, $^1$H-NMR, FAB-MS 스펙트럼을 얻어 분리한 항생물질의 구조를 분석하고 Sakaguchi test와 같은 정색반응을 통하여 그 발색단을 동정하여 이 항생물질의 구조가 스트렙토마이신과 동일하다는 것을 확인하였다.
While there are increasing demands on biomolecules separation, resin chromatography lacks in terms of throughput and membrane chromatography is an alternative with high binding capacity and enhanced mass transfer properties. Unlike typical membrane processing, where the performance can only be empirically assessed, understanding how mechanisms work in membrane chromatography is decisive to design biospecific processing. This short review covers three separation mechanisms, including affinity interaction modes for selectively capturing bulk molecules using biospecific sites, ion exchange modes for binding biomolecules using net charges and hydrophobic interaction modes for binding targeted, hydrophobic species. The parameters in designing membrane chromatography that should be considered operation-wise or material-wise, are also further detailed in this paper.
Transesterification reactions were carried out with myo-inositol and five fatty acid methyl esters such as methyl laurate, methyl myristate, methyl palmitate, methyl stearate and methyl oleate in the dimethylsulfoxide solvent. Their products were separated by both thin layer chromatography and column chromatography, and myo-inositol monoesters were quantitatively separated by counter current distribution. We measured their surface tension, foaming power and emulsifying power, determined critical micelle concentrations by the color method, and evaluated their hydrophilic-lipophilic balance. The results show that myo-inositol monoesters exhibit surface activites.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1993.04a
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pp.136-136
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1993
immunotoxin으로 쓰일 수 있는 리보솜 불활성화 단백질 (RIP, ribosome-inactivating protein)을 보리 씨앗에서 분리하였다 이 단백질은 분자량이 약 30,000 kDa 정도되고, pl가 9.0 보다 높다. 이러한 성질을 이용하여 Na-phosphate 완충용액으로 추출하고, 황산암모늄 60-80% 포화로 분획화하였다. 다음 CM-cellulose를 이용한 이온 교환 크로마토그래피, Sephacryl S-200 HR 컬럼을 이용한 gel filtration을 하여 순수히 분리하였고, 이를 전기영동하여 확인하였다.
The methods of separation and recovery of rare earth elements in monazite sand have been studied by the ion exchange chromatography. Both of cation and anion exchange resin were used as ion exchange resins and the solutions of EDTA, DTPA, IMDA and Ln-EDTA were used as eluents. The H+, Zn2+, Fe3+, Al3+, Cu2+, and NH4+ forms of cation exchange resin were used as retaining ions. Ln-EDTA solution was loaded on the EDTA form of anion exchange resin and separated. The Ln-EDTA solution was also used as an eluent for a selective separation of one element from the rare earth mixture solution. The size effects of resin column, the elution mechanism for the various elution types and the separation of a large amount of rare earths were studied.
D-$\alpha$-Amino-$\varepsilon$-carpolactam racemase (EC 5.1.1) and L-$\alpha$-amino-$\varepsilon$-caprolactam hydrolase (EC 3.5.2) were fractionated from cell-free extracts of Alcaligenes eutrophus A52 using ammonium sulfate precipitation and DEAE-cellulose ion exchange chromatography. It was made sure that D-$\alpha$-amino-$\varepsilon$-caprolactam was converted to L-$\alpha$-amino-$\varepsilon$-caprolactam by racemase, and then hydrolyzed into L-lysine by hydrolase in Alcaligenes eutrophus A52. For the conversion of D-$\alpha$-amino-$\varepsilon$-caprolactam into L-lysine by cell-free extracts of Alcaligenes eutrophus A52, the optimum temperature and pH were 6$0^{\circ}C$ and 8.5 respectively. The results showed that 0.5% D-$\alpha$-amino-$\varepsilon$-caprolactam was converted to L-lysine at 55$^{\circ}C$ for 10 hr with a conversion rate of 98% by cell-free extracts containing 3.1mg of protein.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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