• 제목/요약/키워드: 융합 유전자

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Pseudomonas aeruginosa BCNU 1204의 항균활성과 활성 물질 (Antimicrobial Activity of Pseudomonas aeruginosa BCNU 1204 and Its Active Compound)

  • 신화진;주우홍
    • 생명과학회지
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    • 제29권1호
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    • pp.84-89
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    • 2019
  • 신규 항세균물질을 탐색하는 사전조사에서 몇몇 분리균주들이 그람양성 세균과 그람음성 세균 모두에 항균활성을 보이며, 심지어 methicillin내성 Staphylococcus aureus (MRSA)에도 항균활성을 나타내었다. 이들 균주 중에서 한 균주가 표현형과 계통분석을 이용하여 특히 16S 리보좀 RNA 유전자 염기서열에 기초하여 Pseudomonas aeruginosa로 동정되었다. BCNU 1204 균주의 항균물질은 King's medium B (pH 7.0)에서 $35^{\circ}C$의 온도 조건으로 4일 배양 후 가장 최대로 생산되었다. 항균물질을 각종 유기용매로 분획한 결과, P. aeruginosa BCNU 1204의 dichloromethane (DCM)분획과 ethylacetate (EA) 분획이 그람 양성 세균에 강력한 항균활성을 보였으며, 특히 ethylacetate (EA) 분획이 methicillin내성 Staphylococcus aureus (MRSA)에 대하여 강한 항균활성을 나타내었다. Recycling preparative LC와 preparative TLC 로 활성물질 하나(분획 5-2)를 분리하여 GC-MS 분석한 결과 phenazine 화합물에 속하는 phenazine-1-carboxylic acid 로 동정하였다. 그리고 MRSA 균주에 대한 최소저해농도(minimum inhibitory concentration, MIC)가 MRSA균주인 CCARM 3089, 3090, 3091 그리고 3095 균주에 대하여 각각 $25{\mu}g/ml$, $50{\mu}g/ml$, ${\geq}25{\mu}g/ml$ 그리고 ${\geq}50{\mu}g/ml$ 임을 확인하였다. 그러므로 P. aeruginosa BCNU 1204 분리균주는 항 MRSA 항생물질을 개발하기 위한 잠재 가치가 높은 생물자원으로 기대되며, P. aeruginosa BCNU 1204 균주로부터 리더 화합물을 획득하기 위한 보다 많은 연구가 요구된다.

인체 폐암 세포에 대한 와송 유래 에틸아세테이트 분획 생리 활성 물질의 세포사멸 유도 및 세포주기 억제 항암활성 (Anti-cancer activity of the ethylacetate fraction from Orostachys japonicus in A549 human lung cancer cells by induction of apoptosis and cell cycle arrest)

  • 권지혜;이동석;정은철;김현미;김수빈;류덕선
    • 예술인문사회 융합 멀티미디어 논문지
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    • 제7권1호
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    • pp.395-405
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    • 2017
  • 와송 유래 에틸아세테이트(EtOAc) 분획물의 인체 폐암세포 A549에 대한 항암활성을 확인하기 위하여 본 연구를 수행하였다. 폐암 세포에 대한 세포 생존율을 측정하기 위하여 MTS assay를 수행한 결과, 농도 의존적으로 폐암세포 성장 억제효과를 보였다. 세포사멸 유도능을 확인하기 위하여 DAPI 핵염색을 통한 직접 육안관찰을 수행한 결과, EtOAc 분획물을 처리한 군에서 핵내 염색질 응축등의 세포사멸 지표가 관찰되었고, Annexin V-FITC를 이용하여 세포막에 노출된 phosphatidylinositol (PS)를 검출한 결과, 농도 의존적으로 초기 세포사멸 및 후기 세포사멸이 증가하였다. 세포사멸의 또다른 지표인 세포주기 억제능을 확인하기 위하여 G2/M기 관련 유전자인 CDK1, 4, cyclin B1, D1의 mRNA 발현정도를 RT-PCR을 이용하여 확인한 결과, 농도의존적으로 mRNA의 발현량이 현저히 감소하였으며, 세포사멸의 직접적 신호전달 표적 단백질인 p53, Bax, Bcl-2 및 pro-caspase-3등의 발현정도를 확인한 결과, p53과 Bax 단백질의 발현은 농도의존적으로 증가하였고, Bcl-2와 pro-caspase-3 단백질의 발현은 시간 및 농도의존적으로 감소하였다.

하이브리드 집합체로서의 인간존재: 교차의 가능성과 한계 (Human Existence as a Hybrid Assemblage: the Possibilities and Limits of Intersectionality)

  • 손향구
    • 문화기술의 융합
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    • 제10권4호
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    • pp.509-516
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    • 2024
  • 우리는 신유물론을 배경으로 공각기동대, 뉴럴링크, 유전자 혼종인 카밀, 삼체인 등의 SF 주인공을 참조하여, 자기생성체계와 공-산 체계 사이의 교차적 연결을 비교하는 과정을 통해 인간 존재에 대해 새롭게 성찰하였다. 연구 결과 첫째, 래디컬한 공-산 체계에서는 개체와 경계를 해체하고 혼종적 연결과 융합만으로 존재를 정의하려는 경향이 있다는 점 둘째, 이들이 개체수준의 자율적 사고능력을 외면함으로써, 혼종적 공-산이 야기할 파괴적 성격을 제대로 규명하거나 이에 따른 실질적 대응책을 모색하는 단계로 나가지 못하고 있음을 드러냈다. 셋째, 이질적 연결에 의해 인류의 생존 자체가 위협받게 될 상황이라면 혼종적 공-산의 연결망보다는 자기생성적 체계의 자율적 구성원이라는 정체성에 관심을 기울이고 나아가 자기준거적인 조절을 안정시키기 위한 개체단위의 역할에도 관심을 기울여야 한다는 점을 제안하였다. 우리는 본 연구를 통해, 존재자간 교차를 통해 반복되는 혼종적 연결을 기술(description)하는데에만 치우친다면 제대로 된 실천적 비전을 제시하는데 실패할 가능성이 크다는 점과, 존재자간 파괴적 상호작용에 대한 상상을 촉발하는 다양한 SF를 활용하여 인류종의 정체성을 새로운 관점에서 정의하고, 나아가 일정한 수준의 경계긋기와 이에 기초한 공생적 상호작용이라는 관점에서 자기생성 기제를 탐색하고 자기준거를 마련하기 위한 노력을 병행할 것으로 촉구함으로써 신유물론의 한계를 극복하는데 기여하고자 하였다.

분자영상의 적용분야 및 전망 (Application and Prospects of Molecular Imaging)

  • 최규락;이상복
    • 한국방사선학회논문지
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    • 제8권3호
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    • pp.123-136
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    • 2014
  • 본 논문에서는 분자영상을 분류하고 적용 분야와 미래를 예측해 보고자 하였다. 분자영상은 생체 내에서 분자수준과 세포수준에서 일어나는 변화를 영상화하는 것으로써 분자세포생물학과 첨단영상기술이 발전하여 접목된 새로운 분야이다. 분자영상은 형광, 생물발광, SPECT, PET, MRI, Ultrasound 등의 영상 기법들을 이용하여 유전자 치료 모니터링, 세포추적, 세포 치료 모니터링, 항체영상, 약제 개발, 분자 상호작용 영상, 근적외선 형광 물질을 이용한 암 형광 영상, Bacteria 를 이용한 종양 표적 영상, 치료효과 조기 평가, 치료 효과 예측 등에 적용되고 있다. 분자 영상의 미래는 분자세포 생물학, 유전학, 화학, 약학, 물리학, 전산학, 의공학, 핵의학, 영상의학, 임상의학 등 여러 학문 분야가 융합되어 상호협조와 공동연구를 통하여 발전해 나갈 것이다. 분자영상의 태동으로 미래의 의료의 모습은 질병의 조기진단과 개인 맞춤형 치료가 가능하게 될 것이다.

Bacillus sp. SSA3 균주의 Expression Vector 개발 (Construction of Expression Vector of Bacillus sp. SSA3 Strain)

  • 조윤래;김종규;권대준
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제20권6호
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    • pp.637-641
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    • 1992
  • 한국 재래식 된장.간장 발효균 Bacillus sp. SSA3 균주의 expression vector를 개발하기 위해 Bacillus sp. SSA3의 chromosomal DNA로부터 유전자의 promoter 부위를 cloning 하였다. Recombinant plasmid를 제작하기 위하여 Bacillus sp. SSA3의 chromosomal DNA을 HindIII로 절단한 단편을 pGR71 plasmid의 CAT gene과 pUC18 plasmid의 $\beta$-galactosidase gene의 전방에 삽입시킨 후, E.coli JM109에 형질전환하였다.E. coli JM109의 chloramphenicol 내성 clones으로부터 6 recombinant plasmid를 선별하였다. 이들 선별된 plasmid는 Bacillus sp. SSA3의 expression vector로 사용시 각 재조합 plasmid 중에 삽입된 promoter의 염에 대한 영향의 정도를확인하기 위해 10% NaCl이 첨가된 LB medium상에서 배양하였을 때, 이들 중 Bacillus sp. SSA3의 4 clones은 융합 CAT gene의 발현이 강하게 감소되었으나 2 clones은 약하게 저해되었다.

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재조합 alcohol dehydrogenase의 발현 및 기능분석 (The Expression and Functional Analysis of Recombinant Alcohol Dehydrogenase)

  • 공광훈;심은정;박희중;김은호;조성희;박성우;김영만
    • 분석과학
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    • 제12권6호
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    • pp.565-570
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    • 1999
  • Bacillus stearothermopilus의 염색체 DNA로부터 polymerase chain reaction 법을 이용하여 ADH의 구조유전자를 증폭시킨 후, 발현 벡터 pGEX-KC에 삽입시켜 glutathion S-tansferase와 융합 단백질로 대장균에서 대랑 발현시켰다. 재조합 ADH는 $37^{\circ}C$에서 1 mM의 isopropyl-${\beta}$-D-thiogalactopyranoside로 단백질의 발현을 유도시켰으며, 발현된 단백질은 glutathione affinity 컬럼을 이용하여 정제하였다. 재조합 ADH는 에탄올에 높은 기질특이성을 나타내었으며 최적 pH와 온도는 각각 pH 9.0과 $70^{\circ}C$이었다. 또한 이 재조합 ADH는 본래의 효소보다 열에 안정하였다. 이 효소는 알코을 측정을 위한 효소학적 방법과 알코올의 공업적 생산에 이용될 수 있다.

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엽록체 DNA 염기서열 분석을 이용한 한국산 초롱꽃과 (Campanulaceae)의 계통유연관계 (Phylogenetic relationships of Korean campanulaceae based on chloroplast DNA sequences)

  • 김경아;유기억
    • 식물분류학회지
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    • 제42권4호
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    • pp.282-293
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    • 2012
  • 한국산 초롱꽃과 8속 28분류군과 외군 2분류군 등 총 30분류군에 대한 계통유연관계를 알아보기 위하여 엽록체 DNA의 atpB, atpB-rbcL, atpF-H, matK, rbcL, rpl16, rpoC1 그리고 trnL-F 지역의 염기서열 분석을 실시하였다. 8개 유전자 지역의 염기서열 자료를 융합하여 분석한 결과 도라지속과 더덕속이 가장 기부에 분계조를 형성하였고 애기도라지속과 초롱꽃속은 각각 독립적으로 유집되었다. 홍노도라지속과 영아자속은 잔대속-금강초롱꽃속 분계조를 위한 자매군을 형성하였으며, 금강초롱꽃속은 잔대속의 모시대절과 분계조를 형성하였고 잔대속은 크게 하나의 군을 형성하였다. 본 연구에서 다룬 엽록체 DNA 8개 지역의 염기서열 자료에 기초한 한국산 초롱꽃과의 계통분석 결과, 속 수준에서의 구분은 가능하였으나 절 또는 계열 등 잔대속 내에서의 일부 분류계급은 형태 형질에 의한 분류체계와 일치하지 않았다.

재조합 대장균으로부터 항고혈압 Angiotensin I-Converting Enzyme 저해제의 특성연구 (Characterization of Antihypertensive Angiotensin I-Converting Enzyme Inhibitor from Recombinant E. coli)

  • 김재호;정승찬;이대형;이종수
    • 자연과학논문집
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    • 제16권1호
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    • pp.1-13
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    • 2005
  • 안지오텐신(ACE) 저해제는 항고혈 효과를 갖고 있으므로 오랫동안 고혈압의 예방이나 치료에 이용되어 왔다. 본 연구는 재조합 대장균으로부터 새로운 ACE 저해제를 생산하고 정제하며 나아가 이들이 구조-기능 관P를 규명하기 위해 수행되었다. Saccharomyces cerevisiae의 ACE 저해 펩타이드 유전자를 함유하고 있는 재조합 pGEX-4T-3을 대장균 BL21(DE3)로 형질전환 시켰다. 재조합 pGEX-4T-3을 갖고 있는 대장균 BL21(DE3)로부터 생산된 Glutathione-s 전이효소(GST) 융합 단백질을 얻어서 그중 ACE저해 펩타이드를 Sephadex G-25 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 정제된 ACE 저해 펩타이드는 타이로신-아스파틱엑시드-그리신-글리신-발린-페닐알라린-아르기닌-발린-타이로신-트레오닌의 서열을 가진 새로운 decapeptide이었고 ACE에 대하여 경쟁적으로 저해하였다.

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타액선 다형성 선종에서의 PLAG1과 CTNNB1 유전자 융합 (FUSION OF THE PLAG1 AND CTNNB1 GENES IN PLEOMORPHIC ADENOMA OF THE SALIVARY GLANDS)

  • 김재진;김은석;고승오;김효분;조남표
    • Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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    • 제29권4호
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    • pp.206-211
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    • 2003
  • The pleomorphic adenoma is the most common neoplasm involving both the major and minor salivary glands. It is a benign, slowgrowing tumor, but local recurrences can occur. The pleomorphic adenoma gene 1 (PLAG1), which is a novel zinc finger gene, is frequently activated by reciprocal chromosomal translocations involving 8q12 in a subset of salivary gland pleomorphic adenomas. This experimental study was preformed to observe the translocation patterns between PLAG1 gene and the three translocation partner genes. We also have analyzed the presence of PLAG1 transcripts by RT-PCR. CTNNB1/PLAG1 gene fusion was observed in three of nine pleomorphic adnomas. However, LIFR/PLAG1 and SII/PLAG1 gene fusions were not detectable. All of three gene fusions was not detectable in one Warthin's tumor and three inflammatory salivary gland tissues. PLAG1 transcripts were expressed in all inflammatory salivary gland tissues and tumors except for three pleomorphic adenomas. Of particular one pleomorphic adenoma showing CTNNB1/PLAG1 gene fusion did not express PLAG1 transcipt. Our data indicate that gene fusion involving PLAG1 is a frequent event in pleomorphic adenoma, but correlation between gene fusion involving PLAG1 and PLAG1 transcription is not definite.

아데노 바이러스 Cytosine Deaminase/Thymidine Kinase 융합 유전자의 항 종양효과 (Antitumor Effect of an Adenoviral Cytosine Deaminase/Thymidine Kinase Fusion Gene in C6 Glioma Cells)

  • 김영우;최재영;장진우;박용구;정상섭
    • Journal of Korean Neurosurgical Society
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    • 제30권sup1호
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    • pp.13-19
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    • 2001
  • Objective : We investigated the feasibility of a double suicide gene/prodrug therapy, involving direct introduction of the herpes simplex virus Type 1 thymidine kinase(TK) gene and the Escherichia coli cytosine deaminase(CD) gene, via a recombinant adenoviral vector and ganciclovir(GCV) and/or 5-fluorocytosine(5-FC) treatment, in C6 glioma cells. Methods : Efficient gene transfer and transduction of C6 glioma cells via a recombinant adenovirus were evaluated by infecting cells with adenovirus bearing the ${\beta}$-galactosidase gene and then staining cells with 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-13-D-galactoside. CD/TK expression in cells infected with adenovirus bearing the CD/TK gene(ad-CD/TK) was examined by immunoblotting analysis. For in vitro cytotoxicity experiments, the cells were infected with ad-CD/TK or ad-${\Delta}E1$(as a control). After addition of a variety of concentrations of GCV and 5-FU, either separately or in combination, cell viability was determined by staining the cells with crystal violet solution 6 days after infection. Result : C6 glioma cells were efficiently transduced with recombinant adenoviral vector at multiplicities of infection of 200 or more. In vitro cytotoxicity of GCV and/or 5-FC, either alone or in combination, was exclusively observed in the cells transduced with ad-CD/TK. Obvious cytotoxicity(>50% inhibition) was observed in the presence of 5-FC at concentrations greater than 30ug/ml or GCV at concentrations greater than 0.3ug/ml at a multiplicity of infection of 100. Additionally, cytotoxicity in the presence of both GCV and 5-FC was greater than that after sinlge-prodrug treatments, indicating additive effects of the prodrug treatments. Conclusion : The administration of a double-suicide gene/prodrug therapy might have great potential in the treatment of brain tumors.

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