An effective micropropagation system for Liriodendron tulipifera L via somatic embryogenesis was established using immature seeds. Immature seeds from five individual trees were bisected longitudinally and cultured on two basal media (MS and B5) containing different combinations of 2,4-D and TDZ to induce callus and embryogenic tissue under light ($40{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$, 16 hr/day) or complete darkness at $25{\pm}2^{\circ}C$. There was no distinctive difference on callus and embryogenic tissue induction between the two basal media with PGRs. Optimum culture medium appeared to be MS medium supplemented with 1.0mg/L 2,4-D and 0.01mg/L TDZ plus 3% sucrose. Nonembryogenic callus induction rate was not significantly different among the genotypes. However, However, the embryogenic callus induction frequency differed greatly by the genotypes ranging from 55% to 72% when cultured in the dark. Generally, the cultures maintained in the dark tended to show normal somatic embryo development as well as embryogenic tissue formation and this was confirmed by histological examination. Above results suggest that a proper selection of mother tree and dark culture condition are necessary to optimize somatic embryogenesis system of Liriodendron tulipifera.
Jo Seung-Hyun;Kwon Suk-Yoon;Kim Jae-Whune;Lee Ki-Teak;Kwak Sang-Soo;Lee Haeng-Soon
Journal of Plant Biotechnology
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v.32
no.3
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pp.209-215
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2005
Lactoferrin is an iron-binding glycoprotein with many biological roles, including the protection against microbial and virus infection, stimulation of the immune system. We developed the transgenic Siberian ginseng (Acanthopanax senticosus) cell cultures producing the human lactoferrin (hLf) protein following Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation. A construct containing a targeting signal peptide from tobacco endoplasmic reticulum fused to hLf cDNA under the control of an oxidative stress-inducible SWPA2 promoter was engineered. Transgenic Siberian ginseng cultured cells to produce a recombinant hLf protein were successfully generated and confirmed by PCR and Southern blot analysis. ELISA and western blot analysis showed that full length-hLf protein was synthesized in the transgenic cells. The production of hLf increased proportionally to cell growth and reached a maximal (up to 3% of total soluble proteins) at the stationary phase. These results suggest that the transgenic Siberian ginseng cultured cells in this study will be biotechnologically useful for the commercial production of medicinal plant cell cultures to produce hLf protein.
Gymnophclloides seoi is a human intestinal trematode prevalent on southwestern islands in Korea. In the present study, we investigated whether G. seoi metacercariae can grow and develop into adults by in vitro cultivation. The metacercariae were obtained from naturally infected oysters, and cultured in uitro for 5 days under three conditions; $37^{\circ}C/5%{\;}CO_2,{\;}41^{\circ}C/8%{\;}CO_2,{\;}or{\;}41^{\circ}C/15%{\;}CO_2$, in NCTC 109 complete media containing 20% FBS and 1% antibiotics-antimycotics. The degree of worm growth and development was compared with that grown in uiuo of C3H mice. The length of the worms cultivated in uitro was $200-300{\;}\mu\textrm{m}$, not significantly different from metacercariae, whereas the length of the worms recovered from C3H mice was significantly larger, $300-400{\;}\mu\textrm{m}$. The worms produced eggs when grown in C3H mice or cultured in vitro for 2 days under $41^{\circ}C/8%{\;}CO_2{\;}or{\;}41^{\circ}C/5%{\;}CO_2$, but not when cultured under 37$^{\circ}C/5%{\;}CO_2$. Among the in vitro conditions, $41^{\circ}C/15%{\;}CO_2$ was best for egg Production, although the number of eggs was about half of worms obtained from C3H mice. In conclusion, in vitro cultivation of G. semi metacercariae into egg-pioducing adults was partially successful under culture conditions of $41^{\circ}C/5%{\;}CO_2{\;}or{\;}41^{\circ}C/8%{\;}CO_2$.
A new circulating hydroponic system was invented for oriental melons grown in the greenhouse. For developing nutrient solution management techniques, we examined the changes of nutrient contents of circulating solution in three different types of new hydroponic systems. The yield and fruit quality of oriental melons in Hydroponics were better than those in soil culture. The substrate culture was appropriate fer hydroponics of oriental melons, and NFT was turned to be the opposite due to the physiological disorder during hot seasons. Yamazaki's melon solution with EC 2.0dS.m$^{[-10]}$ was the most appropriate for oriental melons. The new circulating hydroponic system seemed to be appropriate for oriental melons because of the stable EC, pH and the macro- and micro-element contents. NO$_3$-N, Ca and Mg contents in the circulating solution kept a good balance in all types of hydroponics. However, p content, compared to other types, decreased by the degree of 1 me.L$^{[-10]}$ in perlite medium. K content showed irregular status in perlite but showed the stable status in cocopeat. Generally, microelements, except Mo, showed stable absorption in the substrate culture. However, in NET, most of the elements showed irregular absorption except B and Mn. Microelement absorption, especially Cu, Zn and Mo, decreased during hot seasons.
Effects of xylose and glucose on the xylitol production were investigated with Candida parapsilosis KFCC 10875. With increasing the ratio of glucose to xylose, xylitol production decreased but ethanol and glycerol production increased. The maximum concentrations of ethanol and glycerol were 21.5 g/l and 3.6 g/l, respectively, in a medium consisting of 10 g/l xylose and 40 g/l glucose. No xylitol was formed in the glucose medium without xylose since xylitol could not be produced from glucose alone. The inhibitory effect of ethanol, a major by-product, on xylitol production was also studied. As the added ethanol concentration was increased, xylitol production decreased. When cells were inoculated in a xylose medium after removing the by-product (ethanol), xylitol production was not inhibited. The concentrated cells grown on xylose or glucose were inoculated in a fermentor containing the xylose medium. The total activities $(specific{\;}activities{\times}\;cell\;concentration)$ of xylose reductase and xylitol dehydrogenase in concentrated cells grown on glucose were the same as those in a normal fermentation; the specific activities of the above enzymes in the cells grown on xylose were the same as those in a normal fermentation. It indicates that the xylitol productivity of concentrated cells grown on xylose could be increased with increasing the cell concentration. By using concentrated cells of 20 g/l grown on xylose, the final xylitol concentration of 40 g/l was obtained for 18 h fermentation from 50 g/l xylose.
Song, Duyeal;Lee, Hyun-Ji;Jo, Su Yeon;Lee, Sun Min;Chang, Chulhun L.
Annals of Clinical Microbiology
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v.21
no.4
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pp.75-79
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2018
Background: Urine culture is one of the most frequently requested tests in microbiology. Automated urine analyzers yield much infection-related information. The Sysmex UF-5000 analyzer (Sysmex, Japan) is a new flow cytometry urine analyzer capable of quantifying urinary particles, including bacteria, WBCs, and yeast-like cells (YLCs) and can provide a Gram stainability flag. In this work, we evaluated how many unnecessary urine cultures could be screened out using the UF-5000. Methods: We compared the culture results of 126 urine samples among 453 requested urine cultures (from sources other than the Urology and Nephrology departments) with urinalysis results. Urine cultures were considered positive if bacterial or YLC growth was ${\geq}10^4CFUs/mL$. Results: We used urinalysis cut-off values of $50/{\mu}L$ and $100/{\mu}L$ for bacteria and YLC, respectively. Forty eight of the 126 (38.1%, or 10.6% of 453 requested) cultures were below these cut-off values and did not contain any culture-positive samples. Conclusion: Bacteria and YLC counts generated using the UF-5000 analyzer could be used to screen out negative cultures and reduce urine culture volume by ~10% without sacrificing detection of positive cultures.
Park, Jun-Kyung;Kim, JuEun;Lee, Chul-Won;Song, JaeKyeong;Seo, Sun-Il;Bong, Ki-Moon;Kim, Dae-Hyuk;Kim, Pyoung Il
Korean Journal of Organic Agriculture
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v.27
no.1
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pp.65-76
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2019
Bacillus genus are found abundantly in various sites and their secondary metabolites were used as potential agents in agriculture, notably plant growth promoting and bio-control. The objective of this study was to develop the culture conditions of GH1-13 strain including higher cell growth, stable endospore-forming and enhancement of potential agents which are related with plant growth promoting and phytopathogen suppression. The optimal carbon and nitrogen sources were determined by glucose and soy bean flour, respectively, then resulted in $7.5{\times}10^9cells/mL$, $6.8{\times}10^9\;endospore\;cells/mL$ and sporulation yield of 90% after 30 h cultivation in 500 L submerged fermenter at $37^{\circ}C$, pH 7.0. Cells and cell-free supernatant of GH1-13 strains showed the potent antifungal activity against phytopathogenic fungi of Colletotrichum gloeosporioides. It was also confirmed that indole-3-acetic acid (IAA) production of GH1-13 strain was greatly increased by addition of 0.3% tryptophan.
This study was performed to investigate the optimum condition of protease production from submerged culture of oak mushroom (Lentinula edodes, Sanlim No. 5) and its enzymatic features. Among several combinations of media, the combination of wheat bran, corn flour, water and corn oil (WB+CF+W+ CO) yielded 84.8 U/g of maximum protease activity. This combination of ingredients, in spite of not being particularly protein-rich in comparison to the other media, allowed for good growth of the fungus and maximal protease production. Comparison of different growth medium liquids indicated that demineralized water afforded the best growth of the fungus and the highest protease activity. Acetate buffer and acidified water negatively affected The protease production peaked around 72 hr of incubation, and decreased thereafter. The molecular weights of produced protease were about 45,000 by Sephadex G-75 chromatography. The pH optimum for protease activity was 4, while maximal activity incubated at 37℃ for 1 hr was observed between pH 4~6. The optimum temperature of this protease was 55℃, and the enzyme was active over a broad temperature range (30~60℃), indicating that this protease would be suitable for a wide range of applications where. different pH and temperature are necessary, such as digestive aids, food industry, beer and tannery industries.
The small size food organism(under the size 150${\mu}m$) is needed as food for early stage of marine fish larvae of small mouse (e.g the group of grouper). This study was investigated to develop a method for copepod Apocyclops sp. culture in combination with the rotifer B. rachionus for stable culture of copepod species and harvest of various size food organisms. The culture conditions as temperature, salinity, culture volume, photo period, culture preiod and observation interval were 25${\circ}C$, 22ppt, 40ml, all dark except to observation time, 16 days and every two day during the experimental period, respectively. The Tetraselmis suecica was used as the food for the two testing orgtanisms. After every two day counting, theses two organisms were transferred to fresh culture tanks with Tetraselmis suecica of $7{\times}10^5$cells/ml. In the mixed culture of B. rotundiformis and A. sp., growth of rotifer was suppressed by mixed culture with A. sp. whereas the growth of copepod Apocyclops was promoted in the mixed culture with rotifer B. rotundiformis (the maximum density was 22 individuals/ml through the 16 culture days). Moreover, the number of copepod nauplius were promoted about 2 times in the mixed culture compared to the numbers in single species culture. With this combination culture, the havested two food organisms of variable sizes. This size variation of food organisms was useful tools for larval rearing of small mouse marine fish larvae and next step food organism size of post hatched larvae.
This study analyzed the physicochemical characteristics of Astragalus membranaceus (AM) fermented with seven different mushroom mycelia. Physicochemical characteristics, such as contents of moisture, pH, total reducing sugars, free sugar, and isoflavonoid, were investigated. The moisture content was increased in most of the samples. The pH values of AM fermented with Phellinus linteus and Flammulina velutipes were increased, while the pH of other samples were similar to that of non-fermented AM. The reducing sugar content was in the range of 211.69~391.74 mg/100 g. The extraction yield using water was higher than that when extracted with 80% ethanol. The free sugar content was increased through fermentation with mushroom mycelia. However, the glucose contents of the 80% ethanol and water extracts were decreased. Finally, the calycosin and formononetin contents in 80% ethanol and water extracts of AM fermented with Phellinus linteus were 2,549.24 mg/g, and 827.66 mg/g for calycosin, and 1,366.69 mg/g and 221.28 mg/g for formononetin, respectively. These results suggest that fermentation with mushroom mycelia could be used to increase the bioactivity of AM. The mycelium-fermented AM might be a valuable source of functional material and edible resource for industry.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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