In vitro cultivation of Gymnophalloides seoi metacercariae (Digenea: Gymnophallidae)

Gymnophaiioides seoi (Digenea: Gymnophallidae) 피낭유충의 시험관내 배양

Gymnophclloides seoi is a human intestinal trematode prevalent on southwestern islands in Korea. In the present study, we investigated whether G. seoi metacercariae can grow and develop into adults by in vitro cultivation. The metacercariae were obtained from naturally infected oysters, and cultured in uitro for 5 days under three conditions; $37^{\circ}C/5%{\;}CO_2,{\;}41^{\circ}C/8%{\;}CO_2,{\;}or{\;}41^{\circ}C/15%{\;}CO_2$, in NCTC 109 complete media containing 20% FBS and 1% antibiotics-antimycotics. The degree of worm growth and development was compared with that grown in uiuo of C3H mice. The length of the worms cultivated in uitro was $200-300{\;}\mu\textrm{m}$, not significantly different from metacercariae, whereas the length of the worms recovered from C3H mice was significantly larger, $300-400{\;}\mu\textrm{m}$. The worms produced eggs when grown in C3H mice or cultured in vitro for 2 days under $41^{\circ}C/8%{\;}CO_2{\;}or{\;}41^{\circ}C/5%{\;}CO_2$, but not when cultured under 37$^{\circ}C/5%{\;}CO_2$. Among the in vitro conditions, $41^{\circ}C/15%{\;}CO_2$ was best for egg Production, although the number of eggs was about half of worms obtained from C3H mice. In conclusion, in vitro cultivation of G. semi metacercariae into egg-pioducing adults was partially successful under culture conditions of $41^{\circ}C/5%{\;}CO_2{\;}or{\;}41^{\circ}C/8%{\;}CO_2$.

참굴큰입흡충(GMmophQHoidesseoi)은 새로운 인체 기생 장흡충으로서 최근 우리 나라에서 인체 감염의 유행이 보고된 바 있다. 이 연구는 참굴큰입흡충의 피낭유충을 시험관내에서 배양하여 성충으로 발육시킬 수 있는지 알아보고자 시행하였다. 피낭유충은 자연산 감염 굴에서 회수하였고. NCTC 109 배지에 우태아 혈청(FBS) 20%와 항생제-항진균제(Gibco) 1%를 첨가하여 사용하되 $37^{\circ}C$/5%{\;}CO_2,{\;}41^{\circ}C/8%{\;}CO_2{\;}및{\;}41^{\circ}C/5%{\;}CO_2$의 3가지 배양조건 하에서 배양하였다 배양 2일에서 5일까지 각 조건 하에서 얻은 충체를 실험 감염 C3H 마우스에서 회수한 충체와 발육 및 성숙도를 비교하였다. 배양군의 충체 크기는 길이 $200-300{\;}\mu\textrm{m}$로서 피낭유충과 비교할 때 유의한 차이를 보이지 않았으나. 마우스로부터 회수한 충체는 $300-400{\;}\mu\textrm{m}$에서 유의한 차이를 보였다. 마우스 체내, $41^{\circ}C/5%{\;}CO_2{\;}및{\;}41^{\circ}C/8%{\;}CO_2$ 조건 하에서는 모두 2일째에 충란이 형성되기 시작하였으나, $37^{\circ}C/5%{\;}CO_2$ 하에서는 배앙 5일까지도 충란이 형성되지 않았다 배양군 중에서는 $41^{\circ}C/5%{\;}CO_2$ 조건이 충체 성숙 및 충란 생산에 가장 적합하였으나 마우스 체내에서 자란 충체에 비해 자궁내 충란 수가 약 1/2에 불과하였다. 결론적으로 참굴큰입흡충의 시험관내 배양은 $41^{\circ}C/5%{\;}CO_2$ 또는 $41^{\circ}C/8%{\;}CO_2$ 조건에서 부분적으로 성공적임을 알 수 있었다.