Journal of the Korea Institute of Information and Communication Engineering
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v.21
no.6
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pp.1212-1217
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2017
We constructed a population of myelinated cells with co-culture of neuronal cells and Schwann cells from DRG. Schwann cells and neuronal cells were isolated from dorsal root ganglion (DRG) in embryos of rat in vitro respectively. The cultured Schwann cells and cultured neuronal cells, respectively were co-cultured in a same plate. This procedure contains following four steps: first step of suspension of the embryonic dorsal root ganglion cells, second step of addition of anti-mitoticcocktail, third step of purification of dorsal root cells, and fourth step of addition of Schwann cells to dorsal root ganglion cells. These cells were performed accomplishment of myelination. This myelinated co-culture system was infected by Semliki forest virus and then induced demyelination processing in this myelinated co-culture. We identified myelination and demyelination processing using antibody of peripheral myelin protein 22 (PMP 22) meaning presence of myelinated neuron.
Purpose : Loss of hippocampal interneurons in dentate gyrus has been reported in patients with severe temporal lobe epilepsy and in animals treated with kainic acid(KA). Interneurons contain $Ca^{2+}$- binding protein parvalbumin(PV). The effects of kainic acid on parvalbumin-immunoreactive (PV-IR) interneurons in dentate gyrus were investigated in organotypic hippocampal slice cultures. Methods : Cultured hippocampal slices from postnatal day nine C57/BL6 mice were exposed to $10{\mu}M$ KA, and were observed at 0, 8, 24, 48, 72 hours after a one hour KA exposure. Neuronal injury was determined by morphologic changes of PV-IR interneuron in dentate gyrus. Results : Transient(1 hour) exposure of hippocampal explant cultures to KA produced marked varicosities in dendrites of PV-IR interneuron in dentate gyrus and the shaft of interbeaded dendrite is often much thinner than those in control. The presence of varicosities in dendrites was reversible with KA washout. The dendrites of KA treated explants were no longer beaded at 8, 24, 48 and 72 hours after KA exposure. The number of cells in PV-IR interneurons in dentate gyrus was decreased at 0, 8 hours after exposure. But there was no significant difference in 24, 48 and 72 hours recovery group compared with control group. Conclusion : The results suggested that loss of PV-IR interneurons in dentate gyrus is transient, and is not accompanied by PV-IR interneuronal cell death.
Five types of synaPses were differentiated in the antennal lobe or Pieris rapoe. aev are in general axo-dendritic synapses and have symmetrical contacts. The type I synapses contain the uniformly round vesicles of medium size, and consist of the 11% of all synapses in the antennal lobe. The type synapses are filled with the small flat and densely arranged (19%). The type III synapses possess medium-sized round vesicles and dense core ones(24%). The type IV synapses are characterized by such three kinds of vesicles as small round, small flat and dense core vesicles(33%). The type V synapses exhibit the presence of medium-sized round, large round and dense core vesicles(13%). The removal of the left antenna on its proximal portion caused the type IV boutons of the above ave types in ipsilateral antennal lobe to turn into dark or semidark degenerative changes. Therefore, it was concluded that many of the antennal receptor cells projected into the brain terminate in the antennal lobe to form type IV synapses together with the dendrites. 배추회나비 뇌의 촉각엽에 있는 신경세포들은 5가지의 신경연접을 형성하는 것으로 관찰되었다. 이 신경연접들은 모두 축색과 수상돌기간의 연접으로 대칭연접이었다. 제1형 신경연접은 축색종말내에 중등도크기의 단형 연접소포를 가지고 있었고, 촉각엽에 있는 5가지의 신경연접중 11%의 출현빈도수로 관찰되었다. 제2형 신경연접의 축색종말에는 장형과 도형의 2가지 연접소포가 포함되어 있었는데, 모두 소형이었으며 이같은 연접소포들이 축색 종말내에서 조밀하게 관찰되었다. 제2형 신경연접의 출현 빈도수는 19%이었다. 제3형 신경연접은 축색 종말내에 중등도크기의 도형 연접소포와 DENSE CORE VESICLE을 포함하고 있었고 그 출현빈도수는 24%이었다. 제4형 신경연접은 축색총말내에 소형의 도형, 소형의 장형 연접소포 및 DENSE CORE VESICLE의 3가지 연접소포를 가지고 있었고 출현빈도수는 촉각엽에서 가장 큰 33%이었다. 제5형 신경연접은 축색종말내에 중등도크기의 원형, 대형의 원형연접소포 및 DENSE CORE VESICLE을 포함하였고 13%의 출현빈도수로 관찰되었다. 배추횐나비의 촉각에 있는 지각신경세포가 뇌의 촉각엽으로 뻗어 들어가 위의 5가지 신경연접중 어느 형을 형성하는지를 관찰하기 위하여 좌측 촉각의 기부를 제거하여 지각신경세포를 절단하였는데 그 결과, 좌측 촉각엽에서 제4형의 신경연접이 퇴행성 변화를 나타내었다. 그러므로 촉각의 지각신경세포는 뇌의 같은 족 촉각엽에 뻗어와 제4형 신경연접을 형성한다고 결론되었다.
Recently, an electrospinning process, which is one of various nanotechnologies, has been used in fabricating micro/nanosized fibers. The fabricated electrospun micro/nanofibers has been widely applied in biomedical applications, specially in tissue regeneration. In this study, we fabricated highly aligned electrospun biodegradable and biocompatible poly(${\varepsilon}$-caprolactone)(PCL) micro/nanofibers by using a modified electrospinning process supplemented with a complex electric field. From this process, we can attain highly aligned electrospun nanofibers compared to that fabricated with the normal electrospinning process. To observe the feasibility of the highly aligned electrospun mat as a biomedical scaffold, nerve cells(PC-12) was cultured and it was found that the cells those were well oriented to the direction of aligned fibers.
The morphological features of neuronal dendritic spines are changed their shapes, sizes and density in response to physiological or pathological conditions . Therefore, exact analysis of spines warrants understanding of neuronal function. The size of the spine is at the borderline of resolution with light microscopy. High voltage electron microscopy Provide excellent resolution of the spines with proper stain techniques thanks to its higher resolution and penetration power. We evaluated more effective staining method for observing dendritic spines after labeling Purkinje cells with anti-calbindin 28 kD immunohistochemistry or Golgi staining methods. 4 fm thickness sections were observed with high voltage electron microscopy and some morphometric analyses were performed. Both Golgi staining and immunohistochemistry revealed the detail structures of the Purkinje cell such as soma, dendrites, and dendritic spines. High voltage electron micrographs with Golgi staining provide more precise morphology and are easy to measure. Average density of spine is $24.5{\pm}3.6/10{\mu}m$ and its length is $1.12{\pm}0.22{\mu}m$. For quantitative analysis of the spines, high voltage electron, micrographs with Golgi staining are more effective. This preliminary result is expected to be useful for further study of spine plasticity in various conditions.
Hee Sun Yang;In Guk Hwang;Ae-jin Choi;Jeong-sook Choe
Journal of Nutrition and Health
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v.56
no.2
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pp.140-154
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2023
Purpose: Deodeok (Codonopsis lanceolata) is generally used in conventional medicines and is considered to have remedial properties to cure several diseases. However, application of the C. lanceolata bud as a novel food ingredient has not been fully explored. Hydrogen peroxide (H2O2) is associated with the production of oxidative damage that results in mutagenesis, carcinogenesis, and cell death. This study examines the neuroprotective effect of C. lanceolate bud extracts (CLBE) on H2O2-stimulated apoptosis in SH-SY5Y cells. Methods: C. lanceolata bud of length 10 to 15 cm was collected and extracted using 70% ethanol. Cytotoxicity was evaluated by the EZ-cytox reagent, measurement of lactic dehydrogenase (LDH) release and reactive oxygen species (ROS). The morphological changes of the nuclei were determined using the Hoechst 33258 dye. Enzyme activities were analyzed using the caspase activity assay kit. Related protein expressions were quantified by the Western blot immunoassay in H2O2-stimulated SH-SY5Y cells. Results: Cell viability, LDH release and ROS generation, demonstrated neuroprotective effects of CLBE in H2O2-stimulated SH-SY5Y cells. The occurrence of apoptosis in H2O2-stimulated cells was confirmed by caspase activity, which was increased in H2O2-stimulated SH-SY5Y cells compared to the unexposed group. Pretreatment of CLBE was observed to inhibit the H2O2-stimulated apoptosis. In addition, exposure to CLBE resulted in increased expression of the Bcl-2 (B cell lymphoma 2) protein and decreased expression of the Bax (Bcl2 associated X) protein. Conclusion: This study shows that exposure to CLBE alleviates the H2O2-stimulated neuronal damage in SH-SY5Y cells. Our results indicate the potential application of CLBE in neurodegenerative disease therapy or prevention.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.41
no.8
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pp.1072-1078
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2012
The potential antioxidant and anti-inflammatory effect of water and ethanol extracts from Flammulina velutipes (Curtis) Singer (FVS) on hydrogen peroxide ($H_2O_2$) and LPS-induced oxidative damage in PC-12 and RAW264.7 cells were investigated. The DPPH radical scavenging activities of the water extract from FVS was the highest, and the 50% inhibitory concentration value was 0.388 mg/mL. Also, the antioxidant activities of water and ethanol extracts were determined by ferric reducing antioxidant power, 2,2'-azino-bis-(3-ethybenzothiazoline-6-sulphonic acid) radical scavenging activity. In addition, water extract from FVS showed a strongly inhibitory effect on lipid peroxidation by measuring ferric thiocyanate values. The water extract decreased cell apoptosis in PC-12 cells against $H_2O_2$-induced oxidative damage. In addition, FVS extracts exhibited the strongest nitric oxide (NO) inhibition activity. It was also found that FVS extract inhibited LPS-induced iNOS and COX-2 expression in RAW264.7 cells. The findings of the present study suggest that extracts of FVS exhibit anti-oxidative and anti-inflammatory activity against oxidative stress and/or stimulated cells.
Recent advances in cell biological and genetic researches have revealed that mitochondrial morphology is highly dynamic and regulated by multiple molecular factors including dynamin-related proteins (DRPs). Considering that the mitochondria play critical roles in the cellular metabolism via ATP synthesis, calcium homeostasis in cooperation with endoplasmic reticulum, and apoptosis, the failure of mitochondrial dynamics is infrequently related to the failure in the normal growth and cellular integrity. In this respect, alteration of mitochondrial dynamics may greatly affect the development of nervous system. In this short review, we discussed molecules involved in the control of mitochondrial dynamics, and provide some perspectives on their significance in the neuronal development.
An immunocytochemical study of GABA-positive neuronal elements was performed at the electron microscopic level to examine subcellular distribution of the inhibitory neurotransmitter in the dog basilar pons. Electron-dense reaction product was observed in neuronal somata and dendritic processes. One or more unlabeled axon terminals made asymmetric synaptic contacts with these GABAergic somatic and dendritic profiles. A large number of GABA-positive axon terminals were also observed. They made symmetric as well as asymmetric synaptic contacts with unlabeled dendritic profiles. In axo-axonic synapses, postsynaptic axon-like processes were consistently GABA-immunoreactive. These observations suggest that the inhibitory local circuit neurons in the dog basilar pons play a major role in cerebro-ponto-cerebellar circuitry by integrating various afferent inputs and conveying them into the cerebellar cortex and the deep cerebellar nuclei.
Kim, Dong Wook;Park, Kimoon;Ha, Goeun;Jung, Ju Ri;Chang, Ounki;Ham, Jun-Sang;Jeong, Seok-Geun;Park, Beom-Young;Song, Jin;Jang, Aera
Food Science of Animal Resources
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v.33
no.2
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pp.258-267
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2013
This study was conducted to determine the antioxidative and neuroprotective effect of pig skin extracts (PS) and pig skin gelatin hydrolysates (LPS) using a human neuroblastoma cell line (SH-SY5Y). The extraction yield of PS was 3 fold higher than that of LPS. The protein content of PS was about 10 fold higher than that of LPS (p<0.05). Also LPS increased antioxidative activity dose dependently, and the activity was significantly higher than PS at all concentration (p<0.05). DPPH radical scavenging activity of LPS at 50 mg/mL was 92.97%, which was similar to $1{\mu}M$ vitamin C as a positive control. ABTS radical scavenging activity of LPS (20 mg/mL) was 89.83% and oxygen radical absorbance capacity of LPS at 1 mg/mL was $141.39{\mu}M$ Trolox Equvalent/g. No significant change of human neuroblastoma cells was determined by MTT test. Cell death by oxidative stress induced by $H_2O_2$ and amyloid beta 1-42 ($A{\beta}_{1-42}$) was protected by LPS rather than PS. Acetylcholine esterase was significantly inhibited, by up to 33.62% by LPS at 10 mg/mL. Therefore, these results suggest that pig skin gelatin hydrolysates below 3 kDa have potential to be used as anti-oxidative and neuroprotective functional additives in the food industry, while further animal test should be determined in the future.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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