Proceedings of the Korean Society of Life Science Conference
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2000.12a
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pp.39-43
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2000
HBV는 인체에 감염하여 간염, 간경변 및 간암을 유발하는 hepadnaviruses의 일종으로써 임상적으로 매우 중요한 바이러스이다. 그러나 이 바이러스에 의한 간암(HCC)의 발생 메커니즘은 아직 불확실하다. 최근에는 HBV의 X 단백질(HBx)이 간암 발생에 중요한 역할을 수행하는 것으로 보고되고 있다. HBx 단백질은 전사 활성인자(transcriptional activator)로써 숙주세포의 유전자발현에 영향을 미치어 세포증식 및 분화에 영향을 줄 수 있다. 본 연구에서는 HBx 단백질이 NIH 3T3 cell의 증식 및 형질전환에 미치는 영향을 조사하였다. HBx 단백질을 발현하는 세포주는 정상세포에 비하여 증식 속도가 2배 정도 빠르며, soft agar assay 결과에 의하면 대조군과 비교하여 더 많은 수의 colony를 형성하였다. 또한, 이들 HBx 발현 세포들은 접촉 저해 능력을 상실하여 HBx가 세포 형질 전환 능력을 가짐을 알수 있다 또한 HBx 발현 세포주에 있어서 p21의 RNA 및 protein수준이 정상세포에 비하여 낮으므로 HBx에 의한 증식 촉진 및 세포 형질 전환이 p21을 매개하여 이루어 짐을 알 수 있었다. HBx에 의한 p21 유전자의 발현 감소는 p21의 전사 수준에서 이루어지며 이는 p53-비의존적 경로에 의하여 이루어졌다.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1994.04a
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pp.255-255
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1994
MIEF는 소의 초유중에 함유되어 있는 분자량 22,000 dalton의 peptide로서 말초혈액 림파구의 배양액에 첨가할 경우 자연살해세포를 활성화 시켜 암세포에 대한 자연살해능을 증가시키는 것으로 이미 보고된 바 있다. 본 연구에서는 수유기간별 MIEF의 함량 및 MIEF가 B세포의 증식 및 분화에 미치는 영향을 조사하였다. 수유기간별 MlEF의 함량을 competitive ELISA inhibition assay를 이용하여 조사한 결과 MIEF의 함량은 수유 첫째날의 초유에 109$\mu\textrm{g}$/ml로 가장 높았으며, 그 이후로 급격히 감소하여 3일째 이후에서는 3-4$\mu\textrm{g}$/ml이하로 존재하였다. MIEF가 B세포의 분화에 미치는 영향은 사람의 편도선에서 분리한 림파구의 배양액에 MIEF를 가하고 5-9일간 배양한후 항체를 생산하는 세포의 수를 ELISPOT assay로 측정하여 조사하였다. MIEF는 10-30$\mu\textrm{g}$/ml의 농도에서 B세포의 분화를 촉진시켰으며, 그 정도는 양성대조군으로 사용한 LPS와 유사하여 MIEF가 B세포의 분화를 유도하는 작용이 아주 강력함을 알수 있었다.
In order to know the effect of proliferation and differentiation on edipocyte 3T3-L1 by prescriptions and herbs, Taeyangin(太陽人)'s Okapijangcheok-tang(五加皮壯脊湯) Mihudeungsikjangtang Acanthopanacis Cortex(五加皮) Phragmitis Rhizoma(蘆根) and Taeumin(太陰人)'s Taeumjowi-tang(太陰調胃湯) Cheongsimyonja-tang(淸心蓮子湯) Cheongpaesagan-tang(淸肺瀉肝湯) Galkeunbupyong-tang(葛根浮萍湯) Coicis Semen(薏苡仁) Rhei Undulati Rhizoma(大黃) Mori Cortex(桑白皮) Ulmi Cortex(楡根白皮) Holotrichia Vermiculus Kalopanaxii Cortex(海桐皮) Ephedrae Herba(麻黃) Imperatae Rhizoma(白茅根), were used and had some effects. 1. The proliferation effect of edipocyte 1) At the Taeyangin(太陽人)'s prescriptions and herbs, Okapijangcheok-tang(五加皮壯脊湯) Mihudeungsikjang-tang Acanthopanacis Cortex(五加皮) have a control effect at the boiling water-extract and ethyl alcohol-extract. Phragmitis Rhizoma(蘆根) have a control effect at the ethyl alcohol-extract. 2) At the Taeyangin(太陽人)'s prescriptions and herbs, Taeumjowi-tang(太陰調胃湯) Cheongsimyonja-tang(淸心蓮子湯) Cheongpaesagan-tang(淸肺瀉肝湯) Galkeunbupyong-tang(葛根浮萍湯) have a control effect at the boiling water-extract and ethyl alcohol-extract. Coicis Semen(薏苡仁) Rhei Undulati Rhizoma(大黃) Morl Cortex(桑白皮) Ulmi Cortex(楡根白皮) Kalopanaxii Cortex(海桐皮) · Ephedrae Herba(麻黃) of the boiling water-extract, Holotrichia Vermiculus Kalopanaxii Cortex(海桐皮) of ethyl alcohol-extract have a control effect on edipocytes. Rhei Undulati Rhizoma(大黃) Ulmi Cortex(楡根白皮) Ephedrae Herba(麻黃) of high-density have a cyto-toxicity. 2. The differentiation effect of edipocyte 1) At the Taeyangin(太陽人)'s prescriptions and herbs during the natural differentiation, Phragmitis Rhizoma(蘆根) of the boiling water-extract, Okapijangchek-tang(五加皮壯脊湯) Acanthopanacis Cortex(五加皮) of the ethyl alcohol-extract have a cyto-toxicity on the first-differentiation. 2) At the Taeumin(太陰人)'s prescriptions and herbs during the natural differentiation, Ulmi Cortex (楡根白皮) Kalopanaxii Cortex(海桐皮) of the boiling water-extract have a cyto-toxicity on the first-differentiation. Cheongsimyonja-tang(淸心蓮子湯) Ephedrae Herba(麻黃) of ethyl alcohol-extract have a control effect on the redifferentiation. 3) At the Taeyangin(太陽人)'s prescriptions and herbs on the first-differentiation during the induced differentiation, Acanthopanacis Cortex(五加皮) of ethyl alcohol-extract has a control effect. Okapijangchek-tang(五加皮壯脊湯) Acanthopanacis Cortex(五加皮) Phragmitis Rhizoma(蘆根) of the boiling water-extract have a cyto-toxicity. 4) At the Taeumin(太陰人)'s prescriptions and herbs on the first-differentiation during the induced differentiation, Coicis Semen(薏苡仁) Ephedrae Herba(麻黃) Imperatae Rhizoma(白茅根) of the boiling water-extract and Ephedrae Herba(麻黃) of the ethyl alcohol-extract have a control effect. Kalopanaxii Cortex(海桐皮) of the boiling water-extract and the ethyl alcohol-extract has a cyto-toxicity. Considering this result, the Taeyangin(太陽人) Taeumin(太陰人)'s prescriptions and herbs have a control effect on edipocytes during the proliferation. Acanthopanacis Cortex(五加皮), Coicis Semen(薏苡仁) Ephedrae Herba(麻黃) Imperatae Rhizoma(白茅根) have a control effect on edipocytes during the induced differentiation. In the future, for treating a obesity need a vivo assay and hope this study to help to know the mechanisms of obesity.
The current study was undertaken to determine the effects of sex steroid hormones(estrogen, testosterone and 19-nortestosterone) on differentiation and proliferation of pig preadipocytes. The preadipocytes were isolated from the backfat of new-born female pigs by collagenase digestion. 10-8M and 10-7M sex steroid hormones were treated to the cultured preadipocytes. Sex steroid hormones treated during the early stage of cell growth did not affect differentiation and proliferation of preadipocytes. However, testosterone and 19- nortestosterone treated during the late stage of cell growth stimulated differentiation of pig preadipocytes.
Adefovir dipivoxil (ADV) is used for the treatment of hepatitis and acquired immunodeficiency syndrome, but long-term use can cause osteoporosis. In this study, the effect of ADV on the osteocyte maturation process was evaluated at the level of undifferentiated cells using mesenchymal stem cells (MSCs) and osteoblasts (MG63). First, MSCs and MG63 cells were treated with ADV at different concentrations, and then a Cell Counting Kit-8 analysis was performed to determine the effect on the proliferation of each cell. Additionally, crystal violet and Hoechst staining were performed for the morphological analysis of each cell and nucleus. To determine the cause of cell hypertrophy, the transforming growth factor-beta (TGF-β) expression was investigated, and alkaline phosphatase (ALP) staining and activity were measured to determine the degree of differentiation of the MSCs and MG63 cells into mature osteocytes. The results confirmed that the ADV increases the expression of TGF-β in MSCs and MG63 cells, causing cellular and nuclear hypertrophy, and can cause osteoporosis by inhibiting cell proliferation and affecting the differentiation of mature osteocytes. Therefore, it is believed that these results can be used as a basis for understanding the adverse effects of ADV at a cytological level in basic medicine and clinical research.
It is researched to elucidate the effects of Taeumjowuitang(TE,太陰調胃湯), Sibimikwanjungtang(SE, 十二味寬中湯) and Yangkeogsanwhatang(SY,凉膈散火湯) on the obesity induced by gold thioglucose and the differentiation and growth of preadipocyte 3T3-L1 in the mouse. The result were as follows: 1. TE,SE and SY extracts improved the blood level of transaminase in the obese mouse induced by gold thioglucose. 2. TE,SE and SY extracts inhibited the increase of liver fat and body fat in the obese mouse induced by gold thioglucose. 3. TE,SE and SY extracts inhibited the increase of body weight in the obese mouse induced by gold thioglucose. 4. TE,SE and SY extracts inhibited the growth of undifferentiate preadipocyte 3T3-L1. 5. TE,SE and SY extracts showed inhibitory effect on the differentiation of preadipocyte 3T3-L1. The above results suggest that the TE,SE and SY extracts may be used on the obesity induced by the overgrowth and differentiation of adipocyte, and the accumulation of fat in liver and body.
Implantation of blastocyst into the uterine endometrium is established by the existence of histologically and functionally prepared uterine endometrium. Doc-1, an oral cancer suppressor gene, is expressed under the control of steroid hormones and has been suggested as a proliferation regulator of endometrial cells. However, the role is not much clear and in this study we examined the expression modulation of Doc-1 in decidualizing cells in vitro. In vitro decidualization was performed in endometrial stroma cells using progesterone and estrogen. Until 24 hr after decidual induction the proliferation of stroma cell was significantly increased but decreased after then. On the other hand, most of the cells differentiated into decidual cell after 48 hr of induction. The Doc-1 protein was co-localized in a specific deciudal cells and colocalization rate was increased in a parallel manner with the induction time. Based on these results, it is suggested that Doc-1 expression is under the control of both steroid hormones and decidual signals, and Doc-1 protein is involved in suppression of the proliferation of decidualizing cells.
알려진 녹용의 효능을 과학적으로 증명하고 활성성분을 이용하여 신의약품 개발에 기여하고자 한다. 본 연구실에서는 녹용의 가장 대표적인 효능인 조혈작용을 하는 성분을 구조 분석하여 MADG임을 밝히었다. MADG는 조혈촉진기능뿐만 아니라 대식세포 증식기능 그리고 비장세포성장을 촉진하는 등 면역활성 조절제로써의 기능도 나타내었다. 그리고 녹용에 존재하는 인지질 중에서 포화지방산을 가지고 있는 phophatidylcholine도 면역활성을 촉진시키었다. 항진균작용을 하는 성분을 구조 분석한 결과 lysophophatidylcholine임을 밝히었으며 그 유도체인 CHJ-ester가 숙주세포에는 해를 주지 않으면서 항진균작용을 하는 것을 관찰하였다. 그리고 골다공증치료효과를 검색하기 위해 녹용 정제성분으로 연구한 결과 파골세포로의 분화를 100$\%$ 저해함을 밝히므로 녹용이 골다공증 치료효과가 있음을 증면하였다. 녹용성분의 유도체인 SCOH가 파골세포분화를 억제함을 밝혀 현재 골다공증치료제로써의 가능성을 조사하고 있다. 본 연구실에서는 1999년부터 녹용연구를 시작하여 현재까지 10여 개의 활성성분을 분석한 바 있다. 현재 조혈세포촉진작용, 면역증진작용, 골다공증치료작용, 대식세포 증식작용, 항진균작용, 항간질작용에 대한 성분 분석 및 그 약리 기전을 연구하고 있다.
The current study was undertaken to investigate the mechanism of action of insulin-like growth factors (IGFs) on proliferation and differentiation of pig preadipocytes. The preadipocytes were isolated from the backfat of new-born female pigs and cultured in serum-deprived medium in the presence and absence of recombinant native IGFs or recombinant mutant IGFs that have reduced affinity for binding to both type-1 IGF receptors and insulin receptors. Fifty ng/ml of either IGF-I, [Leu60]IGF-I, IGF-Ⅱ or [Leu27]IGF-Ⅱ were included in the media in which preadipocytes were cultured for 4 days. IGF-I, [Leu60]IGF-I, IGF-Ⅱ and [Leu27]IGF-Ⅱ stimulated proliferation of pig preadipocytes by 39%, 8%, 25% and 2% respectively, as measured by increased numbers of cells. This indicates that both IGF-I and -II promote replication of pig preadipocytes by actions mediated either by type-1 IGF receptor or insulin receptor. IGF-I, [Leu60]IGF-I, IGF-Ⅱ and [Leu27]IGF-Ⅱ stimulated differentiation of pig preadipocytes by 50%, 17%, 37% and 30%, respectively, measured as glycerolphosphate dehydrogenase activity. Reducing the affinity of IGF-I for type-1 IGF receptors or insulin receptors significantly reduced the differentiation response. However, the differentiation response to [Leu27]IGF-II was not significantly different from the response to IGF-II. This shows that IGF-I and IGF-Ⅱ promote cell differentiation by different receptor-mediated mechanisms. IGF-II promotes differentiation of pig preadipocytes by actions that do not involve either type-1 IGF receptors or insulin receptors. These actions therefore appear to be mediated by binding of IGF-II to type-2 IGF receptors(also known as cation-independendent mannose-6-phosphate receptor[CIM6P/IGF2 receptor]). This is the first study to find evidence that IGF-II promotes differentiation of preadipocytes from any animal species by actions mediated by CIM6P/IGF2 receptors. In summary, this study shows that IGF-I and IGF-Ⅱ promote differentiation of pig preadipocytes by mechanisms that involve different cellular receptors.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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