본 연구는 Percoll,Swim-up 그리고 Glass-wool 여과법의 세가지 정자분리 방법에 대한 정자 회수율, 생존율과 첨체반응율, 그리고 체외수정 후 배양시간에 따른 전핵형성율,수정란의 발달율과 세포할구수에 대한 효과를 조사하고자 실시하였다. 도축된 암소로 부터 채취한 난자를 22시간 체외배양 후 성숙된 난자를 체회수정시켰다. 수정 후 배양시간에 따라 존핵율을 조사하였으며 48시간에 분할율,192시간에 배반포기 발달율 및 세포할구수를 각각 비교 조사하였다. 정자의 첨체반응과 생존율은 처리군간에 차이가 없으나 회수율에 있어서 percoll 처리군이 다른 두 처리군보다 유의적으로 높았다(p<0.001).수정 후 배양시간별 전핵형성에 있어서도 percoll 처리군이 다른 두 처리군보다 빨리 진행됨을 볼 수 있다. 분할율에 있어서는 처리군간에 유의적 차이가 없으나.배반포기 발달율과 세포할구수에 있어서는 pecoll 처리군이 다른 두 처리군보다 유의적으로 높았다(P<0.05). 이상의 결과로 보아 percoll 처리에 대한 정자분리 방법은 정자 회수율이 높고 수정시 전핵형성 시간이 단축되어, 그 결과로 배반포기 발달율과 수정란의 세포할구수에 효과적임을 알 수 있었다.
Proceedings of the Korea Information Processing Society Conference
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2021.11a
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pp.663-665
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2021
이미지에 대한 정보를 식별하는 기술인 이미지 인식은 현재 무인 자동차의 자율주행, 안면 인식, 의료 등의 여러 산업 분야에 적용되어 활발히 사용되고 있다. 이 중에서 이미지 객체 인식을 활용하여, 단순히 세포를 인식하는 것에서 더 나아가 TBHP 처리 세포에 대해 용액의 투입량과 시간 등의 다양한 조건을 고려함으로써 하나의 이미지에 포함된 세포의 전체 생존율을 판단하여 구분해보고자 한다.
In this study, basic research was conducted to provide guidelines for selecting fluorescent dye and using proper concentration of fluorescent dye to use evaluation of cell viability and fluorescent dye delivery efficiency. Propidium iodide and Yo-Pro-1 were used as fluorescent dyes. In the evaluation of cell viability and the efficiency of delivery using Propidium Iodide and Yo-Pro-1, the histogram of each fluorescent dye was different depending on the type of fluorescent dye and the concentration used. These results were related to the characteristics of the fluorescent dyes used. This was related to the properties of the fluorescent dyes used. From these results, it was found that the analytical results depending on the characteristics of the fluorescent dyes used in the cell analysis. The effect of the fluorescent dye on the cell was confirmed, but it was confirmed that it did not affect the analysis result. In addition, the influence of interference between fluorescent signals was confirmed when two or more kinds of fluorescent dyes were used for analysis. The higher the concentration of Yo-Pro-1 was, the larger the effect of interference was, and the concentration of Propidium Iodide did not affect the interference of fluorescence signal. This study confirmed that the evaluation of the cell viability and the evaluation of the delivery efficiency were influenced by the type and concentration of the fluorescent dyes and it was related to the characteristics of the fluorescent dyes. Based on the results, appropriate concentrations of fluorescent dyes suitable for evaluation of cell viability and delivery efficiency were suggested.
Kim, Kyu-Jin;Kim, Hyun-Man;Ko, Jea Seung;Kim, Dae-Joon;Han, Jung-Suk
Journal of Dental Rehabilitation and Applied Science
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v.18
no.2
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pp.73-80
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2002
치과용 임플란트의 세라믹 지대주를 위해 개발된 지르코니아 함유 세라믹 시편의 생체 적합성을 평가하기 위하여 시험관내 세포 독성을 검사를 시행하였다. L929 섬유모세포를 $37^{\circ}C$, 90% 습도, 5% CO2 및 95% 공기의 조건을 유지하는 세포 배양기에서 배양하여 실험에 사용하였다. 배양 2일, 4일, 6일 마다 시편을 넣은 배양 접시 내의 전체 세포 수와 생존 세포 수를 세어 세포 증식과 세포 생존율 검사를 시행하였다. millipore filter test를 이용하여 succinate dehydrogenase 효소 활성을 검사하였으며, 세포막 투과성의 변화를 관찰하기 위해 agar overlay test를 시행하였다. 음성 대조군은 시편을 사용하지 않았으며, 양성 대조군은 시편과 같은 크기의 구리를 사용하여, 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 세포 증식과 세포 생존율 검사에서는 지르코니아 함유 세라믹을 넣은 실험군과 음성 대조군 모두에서 시간이 경과함에 따라 세포가 증식하는 양상을 보였다. 세포 생존율 검사에서도 실험군과 음성 대조군이 유사한 결과를 나타내었다. 2. millipore filter test에서는 실험 시편 모두에서 염색 정도의 변화가 없이 음성 대조군과 동일한 결과를 나타냈다. 반면에 구리 시편을 넣은 양성 대조군에서는 중등도의 세포 독성을 나타냈다. 3. agar overlay test에서도 시편을 넣지 않은 음성 대조군에서는 세포 성장에 변화가 나타나지 않았으며, 실험군에서도 시편 주위로 탈색이 관찰되지 않아서 음성대조군과 같은 결과를 나타냈다. 양성 대조군에서는 심한 세포 독성을 나타내었다. 4. 실험결과, 치과용 임플란트의 세라믹 지대주를 위해 개발된 지르코니아 함유 세라믹 시편은 시험관내 세포 독성을 나타내지 않았다.
This research was performed to evaluate the superparamagnetic iron oxide nanoparticles'(SPIONs) cell toxicity and to measure the radiation cell survival curve changes of SPIONs-uptake glioblastoma multiforme cells. The results could be practically used as the fundamental data to ameliorate proton beam cancer therapy, for example, providing necessary GBM treatment dose in the proton beam therapy when the therapy takes advantage of SPIONs. The assessment of the toxicological evaluation of synthesized SPIONs was accomplished by MTT assay as an in vitro experiment. The results showed no meaningful differences in the cell survival rate at the $1-100{\mu}g/ml$ SPIONs concentrations, but the cell toxicity was shown as the cell survival rate decreased up to 74.2% at the $200{\mu}g/ml$ SPIONs concentration. Then, we measured each radiation cell survival curve for U373MG cells and SPIONs-uptake U373MG cells with 0~5 Gy of proton beam irradiations. It is learned from the analysis of the experimental results that the SPION-uptake cells' radiation survival rate was more rapidly decreased as the irradiation dose increased. In conclusion we confirmed that SPIONs-uptake in U373MG cells induces cell death at the much less dose than the lethal dose of SPION-non-uptake cell. This research shows that the therapeutic efficacy of glioblastoma multiforme treatment in proton beam therapy can be improved by SPIONs targeting to the GBM cells.
Potentially lethal damage repair (PLDR) in HFL-I was investigated by delayed plating experiments. The surviving fraction data were fitted to the linear Quadratic equation ($LogSn=-n{\gamma}({\alpha}d+{\beta}d^2$) where ${\gamma}=1$ for immediate plating). And a repair factor ${\gamma}$ was developed to compare survival for immediate and delayed plating. When we only took into account the repair factor of PLDR ${\gamma}$ which was derived from the delay assay, the cell survival response th fractionated carbon ion irradiation was not fully matched. This gap suggested that consideration of another repair process is necessary. So this suggests that the various repair process plays an important role in the fractionated irradiations.
조류의 배자는 포유류의 배자처럼 모체로부터 영양분을 공급받는 것이 아니라 알속에 저장되어 있는 영양물질로 발육한다. 배자의 발육은 대부분 체외에서 진행된다. 난자는 배란된 후 수정되어 난관팽대부에서 1세포기 수정란이 된다. 그 후 난관협부로 이동하여 최초로 분열이 일어나 배자의 발육이 진행되고, 산란시에는 세포수가 약6만여 개에 달한다. 따라서 수정란에 유전조작기법을 사용하기 위해서는 모체의 난관속에서 일어나는 배발생과 난각속에서 일어나는 개체발생을 위한 체외배양법과 대리난각 배양법이 확립되어 있어야 한다. 그와 같은 기술은 닭 수정란의 배 발생 관찰 및 분석과 유용한 물질을 생산하기 위한 형질전환 가금 연구에 중요한 기술로 사용되고 있다. 따라서 본 연구는 1세포기 닭 수정란의 체외배양과 대리난각 배양에 있어서 수정란의 조건과 대리난각의 조건이 배자의 생존율과 부화율에 미치는 영향을 조사하여 체외배양과 대리난각 배양에 의한 병아리 생산 효율을 제고하기 위한 기초자료를 얻고자 실시하였다. 주요 조사 항목은 수정란의 채란위치, 배자의 발생단계, 수정란의 무게, 대리난각용 계란의 보존 기간, 대리난각의 두께, 대리난각 두께의 감소율, 대리난각의 크기 등을 조사하여 배자의 생존율과 부화율에 미치는 영향에 대하여 조사하였다. 본 실험의 결과는 초기 발생이 빠른 배자가 생존율과 부화율이 높았으며, 본 실험에 사용한 대리난각용 계란의 보관기간이 짧을수록 배자의 생존율과 부화율이 높은 것으로 조사되었다(p<0.05). 그러나 대리난각용 계란의 크기와 대리난각의 두께 차이는 배자의 생존율과 부화율에 큰 영향이 없는 것으로 조사되었다.하였을 때 분할율은 68.0%였으며, 이중 12.0%가 상실배 또는 배반포로 발달하였다. 뿐만 아니라 10% FBS가 첨가된 TCM-199 배양액에 난관상피세포와 공배양을 실시하였을 경우는 72.0%가 분할하였으며, 이중 16.7%가 상실배 또는 배반포로 발달하였다. 이상의 결과로 볼 때 활성화 처리는 ionomycin과 6-DMAP 용액처리가 적합하며, 단위발생란의 체외배양은 보다 적합한 배양조건의 확립이 필요한 것으로 생각된다.icalcium lactate 공동배양은 체외배양에 별다른 영향을 미치지 못하는 것으로 나타났다.생산하는 것을 확인할 수 있었다.4시간에 등급별 회수율이 각각 GI(27.4%), GII(14.7%), GIII(43.2%), GIV(14.7%)로 나타났으며, 46~50시간에는 GI(12.0%), GII(12.0%), GIII(28.0%), GIV(48.0%)로 나타났다. 이상의 결과로 볼 때 미성숙 난자의 회수는 hCG 투여 후 29~34시간이 적합한 것으로 생각된다. 가금의 생산에 있어서 매우 효율적이고 주목할 만한 방법으로 사료된다. 것으로 나타났다.적외선.열풍 복합건조방법이 높게 나타나 이것은 곡물 표면에 원적외선 방사에의한 복사열이 전달되어 열장해를 받았기 때문으로 판단되며, 금후 더 연구하여 적정 열풍온도 및 방사체 크기를 구명해야 할 것이다.으로 보여진다 따라서 옻나무 유래 F는 포유동물의 생식기능에 중요하게 작용하는 것으로 사료된다.된다.정량 분석한 결과이다. 시편의 조성은 33.6 at% U, 66.4 at% O의 결과를 얻었다. 산화물 핵연료의 표면 관찰 및 정량 분석 시험시 시편 표면을 전도
Jo, Jae-Hyun;Kim, Seong-Oh;Choi, Hyung-Jun;Lee, Jae-Ho;Son, Heung-Kyu;Choi, Byung-Jai
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.34
no.1
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pp.36-42
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2007
To compare the survival rate of periodontal ligament cells preserved in storage media with good availability at the time of an avulsion injury, periodontal ligament cells were incubated in ${\alpha}-MEM$ culture medium containing 10% FBS in condition of $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$. These cells were then cultured in HBSS, ${\alpha}-MEM$, milk(S co., P. co.) and tap water at the temperature of 4, 25, $37^{\circ}C$ each in 60 min. The groups were measured by MTT assay. The results were as follows : 1. Among the storage media at $4^{\circ}C$, ${\alpha}-MEM$ and P-milk had the highest preserving ability of periodontal ligament cells, while that of HBSS S-milk and tap was low in order. 2. Among the storage media at $25^{\circ}C$, ${\alpha}-MEM$ had the highest preserving ability of periodontal ligament cells, while that of P-milk, HBSS, S-milk, tap water was low in order. 3. Among the storage media at $37^{\circ}C$, the preserving ability of periodontal ligament cells was very high in ${\alpha}-MEM$, P-milk, HBSS and S-milk, it's lowest in tap water. 4. The preserving ability of periodontal ligament cells in ${\alpha}-MEM$ was high at $4^{\circ}C$ and it's low in order of $25^{\circ}C$, $37^{\circ}C$, but in HBSS was high at $4^{\circ}C$ and it's low at $25^{\circ}C$, $37^{\circ}C$ 5. The preserving ability of periodontal ligament cells in S-milk and P-milk was high at $4^{\circ}C$, $25^{\circ}C$ and it s low at $37^{\circ}C$. In conclusion, HBSS is the storage medium of choice in an avulsion, but in this study it is preferable to choose milk at $4^{\circ}C$ for tooth since it is easy to get and affect cell viability.
Purpose: To determine the effect of marketed multipurpose contact lens solutions (MPSs) on human corneal epithelial cells (HCEpiCs) toxicity by using image analysis. Methods: HCEpiCs were exposed six MPSs (product A-F) at 0.05~50% for 2h, 12h, 24h, and 48h respectively. HCEpiCs were fixed and stained with Draq5 after exposure with MPSs, and the cell viability and apoptosis were evaluated by using confocal microscope and ImageXpress UltraTM. Results: Viabilities of HCEpiCs exposed to MPS A-F for a 2h were not affected, while reductions (52~75%) in cell viability over a 12h exposure of MPS B, MPS C, MPS D and MPS F, and significant more reductions (29~73%) over a 24h and 48h-exposure. Apoptosis of HCEpiC was not affect over a 12h MPS exposure, however was significantly increased (199~526%) over 24h and 48h MPS exposure. Among the products MPS D, E and F reduced viability of HCEpiCs and apoptosis increased more than MPS A (p<0.05). Conclusions: Lower concentration of MPSs have not an cytotoxic effect on HCEpiCs, however higher concentration of MPSs induce apoptosis and reduce viability of HCEpiCs. Therefore, it need to develop MPS having antimicrobial effectiveness with low cytotoxicity.
The objective of this study was to investigate the anticancer effects of Acer tegmentosum M. extracts. HepG2 hepatocarcinoma cells were treated with ethanol, chloroform, ethylacetate, butanol, aqueous fraction and hot water extract. The antiproliferative effect was evaluated by trypan blue exclusion, MTT-based viability assay and morphology. The trypan blue test showed that anticancer effect of the A. tegmentosum M. extracts on HepG2 cells increased gradually in proportion to the increasing concentration of the fractions. The butanol fraction showed the highest anticancer activity against HepG2 cells (p<0.05). The MTT assay indicated that the growth inhibition by the butanol fraction was dose-dependent. These results suggest that A. tegmentosum M. has the potential to inhibit the growth of hepatocarcinoma cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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