In this study, nitric oxide (NO) production in a macrophage-lymphocyte co-culture system was used to assess the cytokine producing capability of cells during endotoxin tolerance in mice. Incubation of peritoneal macrophages with interferon-$\tau$ (IFN-$\tau$) in the presence of lipopolysaccharide (LPS) augmented NO synthesis. Exogenous tumor necrosis factor-$\alpha$(TNF-$\alpha$) could also replace LPS for the stimulation of NO production. Macrophages co-cultured with splenic lymphocytes showed augmented NO synthesis by LPS alone. However, pretreatment of mice with 2.5 mg/kg LPS completely prevented the lethality and the increase of blood TNF-$\alpha$ and IFN-$\tau$ after the second challenge with a lethal dose of LPS. In addition, when macrophages prepared from LPS-tolerant mice were co-cultured with normal splenocytes, LPS also could not induce the production of NO, even in the presence of exogenous TNF-$\alpha$. Moreover, when normal macrophages were co-cultured with splenocytes obtained from LPS-tolerant mice, stimulation with LPS could not evoke the NO production enhancement. However, this down-regulation was able to reverse by exogenous IFN-$\tau$ or concanavalin A (ConA), a stimulator of IFN-$\tau$ production. Our results indicate that not only macrophages but also lymphocytes contribute to LPS tolerance. As INF-$\tau$ can enhance the expression of TNF-$\alpha$, the decrease of INF-$\tau$synthesis from lymphocytes may orchestrate with the decrease of TNF-$\alpha$ synthesis from LPS-tolerant macrophages for the production of tolerant state and the prevention of excessive inflammation. Therefore, LPS tolerance may be exploited for prophylaxis of severe sepsis in patients at risk.
Proceedings of the Korean Society of Veterinary Pathology Conference
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2002.11a
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pp.150-150
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2002
40두 규모의 농장에서 사육된 홀스타인 종, 4개월령의 수컷 송아지에서 거세 후 고열, 식욕부진, 기침 등의 증상과 함께 전신 체표 림프절의 종대가 관찰되어 백혈병으로 잠정진단 하고 도태를 권유하였으나 축주가 치료를 원해 항생제와 해열제 및 기타 대증요법을 실시한 후 치료반응이 없어 폐사하여 부검을 실시하였다. 혈액 검사상 이상핵과 다형핵을 가진 다수의 림프구 및 백혈구, 호중구, 림프구 및 단핵구의 증가가 관찰되었다. 또한 백혈병 바이러스에 대한 분리 및 PCR 검사는 음성이었다. 부검 소견으로 체표 림프절, 슬관절 부위 및 비장과 간의 종대가 관찰되었으며 비장 중심에 12x11 cm의 종괴와 폐의 전엽부 유착 및 폐문, 종격동 림프절의 심한 종대가 관찰되었다. 견갑전 림프절을 비롯하여 대퇴골 전, 서혜, 폐문, 이하림프절 등 전신 림프절의 종대 및 소성의 연한 황색의 매끄러운 절단면을 보였다. 전지 관절의 종대와 관절강 내부는 증가된 농성 활액을 보였으며 고관절 강 내에 농성 활액의 증가와 공기 노출 후 젤리양 응고를 보였다. 심장은 장액성 위축과 함께 섬외막성 점상출혈이 나타났다. 병리조직학적 소견으로 비장은 지주 주변에 미성숙형의 세포들의 침윤이 보이며 유사분열상이 다수 관찰되었고 백색 수질에도 유사분열상의 증가와 함께 림프아구성 세포들이 다수 나타났다. 이들 주요한 비정상 세포들은 다형성의 큰 핵을 가진 다양한 림프아구의 형태를 지녔으며 핵내 공포가 인정되었다. 비장의 종괴 주변에는 증식된 섬유조직으로 둘러싸여 있었으며 미세농양 형성되어 있고, 일부 석회화가 진행된 부위도 있었다. 간소엽성 중심성 울혈과 가벼운 간세포내 지방침윤, 혈관 내 림프아구 형태의 세포와 소수의 호중구가 관찰되었다. 간삼조 주변에는 가볍거나 중등도의 단핵세포의 침윤이 미만성으로 관찰되었다. 폐에서는 중등도의 기관지 폐렴과 함께 일부는 무기폐가 관찰되었으며 폐포강과 세기관지내에는 염증성 삼출물이 다량 들어 있었다. 다병소성 미세농양과 함께 괴사가 있었고 실질의 섬유화가 진행되어 있었다. 또한 중등도의 간질성 신장염과 림프절은 지주 주변에 간극 내 비정상 림프구 세포의 형태는 비장의 그것과 유사하였으며 적수와 백수의 구이 힘들며 림프소절이 증가되어 있었다. 한 시야에서 유사분열상이 6-8 개로 그 지수가 매우 높으며 이와 더불어 큰 림프구가 전반에 걸쳐 침윤되어 있었다. 주변부 동(sinus)에는 많은 물질들이 침윤되어 있으며 렴프소절내 미만성의 성상현상이 관찰되었다. 회장은 파이어판내 심한 림프구 소실이 나타났다. 이상의 소견을 바탕으로 본 증례는 산재성 송아지 백혈병으로 진단되었다
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.33
no.7
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pp.1092-1097
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2004
The objective of the current study was to determine the effects of the crude polysaccharide isolated from fruit body of Pleurotus eryngii on mouse splenocytes, B cells, and macrophages in vitro. The crude polysaccharides directly induced the proliferation of spleen cells in a dose-dependent manner and increased IL-6 and IFN-${\gamma}$ synthesis. The crude polysaccharides also increased the proliferation of B cells in a dose-dependent manner. The production of immunoglobulin Gl, G2a and IgG3 in the presence of the crude polysaccharides was increased progressively in the culture supernatant. When the crude polysaccharide were used in macrophage cell line (RA W264.7) stimulation, there were marked induction of NO synthesis in a dose-dependent manner and IL-6, TNF- r and GM-CSF synthesis. These results suggest that the crude polysaccharide isolated from fruit body of Pleurotus eryngii seem to act as a potent immunomodulator causing augmentation of immune cell activity, and thus could be used as a biological response modifier having possible therapeutic effects against immunological disorders, without any side effects.
Park, Jong-Sang;Park, Jong-Dae;Lee, Bong-Chun;Choi, Kang-Ju;Ra, Sang-Wook;Chang, Ki-Woon
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.8
no.4
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pp.291-296
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2000
To evaluate the biological effects of boxthorn (Lycium chinense Mill.) extracts on the immune response systems, the mitogenic effects were tested by LPS (lipopolysaccharide) and Con A (concanavalin A) using water extracts from various parts of Lycium chinense Mill. The proliferation of B-lymphocytes which were activated by the mitogen, LPS, was markedly increased in the concentration of 0.1mg/ml to 0.5mg/ml, but inhibited in more than 0.5mg/ml. It increased only proliferation of B-lymphocytes but not that of T-lymphocytes by Con A. There was no difference between boxthorn species in immune response. Water extracts of various parts in boxthorn enhanced the humoral immune response which was related to B-lymphocytes.
Effects of wheat arabinoxylan on mouse spleen lymphocytes and peritoneal macrophages were examined in vitro. Among three wheat arabinoxylans (A1: low MW, A2: medium MW, A3: high MW), A3$(50{\sim}100\;{\mu}g/mL)$ increased the viability of spleen lymphocytes up to $114{\sim}125%$ of the control. A1 and A3 $(20\;{\mu}g/mL)$ increased the viability of lipopolysaccharide-treated lymphocytes synergistically. Viability of murine peritoneal macrophages treated with wheat arabinoxylans $(10{\sim}100{\mu}g/mL)$ was increased up to $135{\sim}175%$ of the control. The cytotoxic activity of macrophages against murine lymphocytic leukemic cell increased in the presence of wheat arabinoxylan. Phagocytic index of macrophages treated with wheat arabinozylans $(20\;{\mu}g/mL)$ significantly increased $197{\sim}232%$ compared with the control, and lysosomal phosphatase and myeloperoxidase activities also increased significantly (p<0.05). Treatment of wheat arabinoxylans tended to decrease nitrite production, but significantly stimulated $H_2O_2\;and\;O_2$ productions of macrophages (p<0.05). These results indicate that the immunostimulating effect of wheat arabinoxylan may be closely related with lysosomal enzyme activity and reactive oxygen intermediate production of macrophages.
The purpose of this research was to investigate the effect of Orostachys japonicus A. Berger (OJB) on the immune system. Administration of OJB (500 mg/kg) enhanced viability of splenocytes and thymocytes in BALB/c mice, and also OJB increased of splenic T lymphocytes, significantly, increased CD4 positive $T_H$ cells and CD8 positive Tc cells. OJB markedly, enhanced the production of ${\gamma}-interferon$ in mice serum. OJB accelerated the apoptosis of L1210 and U937 leukemia cells and increased the expression of apoptosis-related ICE, c-myc, p53 gene. These results suggest that OJB have an immuno-regulatory and anti-cancer activity.
This study was performed to evaluate regenerative effects of intrasplenic stem cell transplantation after partial hepatectomy. To evaluate the regenerative effects, Sprague Dawley rats were used. In vivo the embryonic stem cells of blastocysts were collected from superovulated rats on day 3.5 after the vaginal plug checked. The embryonic stem cells were cocultured with hepatocytes for 8 days, they were transplanted into the spleen. After the intrasplenic transplantation of cultured stem cells, they were initially distributed near the periarterial lymphatic sheath after transplantation in the hematoxylin-eosin staining. Their number were formely increased and their size enlarged at forming small lobules. The embryonic stem cells in the culture proliferated and initially proliferated around the periarterial lymphatic sheath and later they around the trabecula with blood vessels. After the transplantation of stem cells, their cell organelles were well developed rough endoplasmic reticulum at the 20th with prominent epidermal growth factor reaction, developed smooth endoplasmic reticulum at the 30th day, well differentiated bile canaliculi with increased transforming growth factor-$\beta$ and apoptosis reactions.
This aim of this study was to examine the immunomodulatory activities of crude polysaccharides from Perilla frutescens Britton var. acuta Kudo (PCP) in mouse bone marrow-derived dendritic cells (BMDC) and splenocytes. The immunomodulatory activity was determined by cell viability, nitric oxide (NO) production, cell surface marker expression (CD 80/86 and MHC class I/II), and cytokine production in BMDC, and cell viability, and cytokine production in splenocytes. Cell proliferation and cytokine production (tumor necrosis factor; TNF-${\alpha}$, interleukin (IL)-6, IL-$1{\beta}$, and IL-12) tested in BMDC were significantly increased by PCP treatment. Additionally, the cell surface markers (CD 80/86, MHC class I/II) were highly increased by PCP treatment. For cytokine production in splenocytes, PCP treatment significantly increased the production of Th 1 cytokines [IL-2 and interferon (IFN)-${\gamma}$], but not Th 2 cytokines (IL-4). Therefore, PCP can induce immune cell activation and is a potential candidate for the development of nutraceuticals to boost the immune system.
The purpose of this study was to investigate the immuno-stimulatory activity of the high-molecular-weight fraction (HMWF) of Cynanchum wilfordii (CW) extracts obtained by ultrafiltration in murine macrophage RAW 264.7 cells and to assess its immuno-stimulatory effect in mice. Ultrafiltration was performed with polyethersulfone membranes (30 kDa cutoff) in a cross-flow filtration system to obtain the HMWF of CW. The results showed that the HMWF increased the production of various cytokines such as tumor necrosis factor-${\alpha}$, interleukin-6, and nitric oxide in dose-ependent manners. In addition, HMWF treatment increased the relative spleen weight as well as splenocyte proliferation induced by concanavalin A or bacterial lipopolysaccharide in mice. Natural killer (NK) cell activity in the HMWF-treated group was significantly increased compared to that in the control group. These results suggest that the HMWF of CW can support the immune system through secretion of macrophage cytokines, thereby enhancing NK cell activity and murine splenocyte proliferation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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