Calli were successfully induced from immature embryos of Citrus junos SIEB. cultured on 1/2 MS medium supplemented with 40.4 BA. Plant were regenerated from immature embryo derived callus on MS medium with 5 $\mu$M BA. The calli were morphologically characterized by two types: one was whitish and the other was yellowish. After 16 weeks of culture, shoots and root were formed on calli. Plantlets were transplanted to soil and successfully grown to a whole plant Also, the arrangement of the cells showed many differences according to developmental stages of callus and organogenesis. The small cells were compact in callus cultured for 6 weeks and the extended cells which divided actively appeared in it after 8 weeks of culture. The globular protrusion of compacted cells occurred in callus after 10 weeks of culture, and the neighboring cells were liquefied. Oil sac surrounded by the liquefied cell was observed in the leaf and was formed by rupture of liquefied cells.
Park, Song-Yi;Hwang, Jin-Taek;Lee, Yun-Kyoung;Kim, Young-Min;Park, Ock-Jin
Journal of Life Science
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v.19
no.4
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pp.423-428
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2009
Selenium was investigated using human origin preadipocytes to see whether it possesses preventive or therapeutic effects for obesity. Unveiling the potential of selenium in the reduction of adipogenesis can help predict the therapeutic capabilities of selenium in obesity. In the present study, the molecular mechanism of the inhibition of adipogenesis by selenium was explored to unravel the involvement of the AMP-activated protein kinase. There is emerging evidence that AMPK, a sensor of cellular energy status, is a possible molecular target of controlling adipocyte differentiation on the basis of discovery that AMPK is responsible for the major metabolic responses to exercise, and integration of nutritional and hormonal signals to modulate feeding behavior or energy expenditure in the hypothalamus. Treatment of selenium resulted in inhibition of the adipocyte differentiation process and induction of mature apoptosis in 3T3-L1 adipocytes. We hypothesized that selenium may exert anti-adipogenic potential though modulating AMPK. We have found that selenium significantly activated AMPK and phosphorylated its substrate acetyl-CoA carboxylase ($ACC-serine^{79}$) during the inhibitory process of adipocytes. Also, the inhibition process of adipocyte differentiation by selenium was comparable to either reveratrol or a synthetic AMPK activator, AICAR (5-aminoimidazole-4-carboxamide-1-${\beta}$-D-ribofuranoside). To evaluate the involvement of AMPK in anti-lipogensis, we applied AICAR and Compound C, an AMPK inhibitor, to 3T3-L1-adipocytes and found that AMPK is required for the adipocyte differentiation blocking process. These results suggest that selenium has a potential to control adipogenesis and that this effect is mediated by AMPK, an essential kinase for both inhibition of adipocyte differentiation and apoptosis of mature adipocytes.
Park, Jong-Tae;Cho, Kwang-Hee;Bae, Hyun-Sook;Cho, Young-Sik;Kim, Heung-Joong
Journal of dental hygiene science
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v.11
no.1
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pp.55-61
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2011
The purpose of this study was to investigate the biological function of ODAM and its signal transduction pathway in the steps of ameloblast differentiation and enamel mineralization. An ODAM recombinant protein was produced and stable ODAM transgenic cell lines were also established using ameloblast-lineage cells (ALCs). To verify the ODAM signal transduction pathway, BAMBI recombinant protein, an inhibitor of BMP2 and BMP receptor 1B (BMPR-1B), was treated and BMPR-1B siRNA was used to silence expression of BMPR-1B. Mineralization was augmented by the ALCs treated with the ODAM recombinant protein and the sense ODAM overexpressing cells. The ALP activity was also increased markedly in the sense ODAM overexpressing cells and the ALCs treated with ODAM recombinant protein. The inactivation of ODAM in the ALCs down-regulated the expression of BMPR-1B, whereas its expression was up-regulated markedly when ODAM was overexpressed. These results provide deeper insights into the process of ameloblast maturation and in enamel mineralization. It also suggested that ODAM augmented enamel mineralization.
This study was performed to investigate the role of phytohormones in the bulbing of garlic in order to assess the yield and quality. The effect on endogenous plant hormones such as gibberellin (GA) content was also examined during growth stage i.e. clove differentiation to bulbing in garlic. More than 18 gibberellins in garlic were identified with extensive gas chromatograph-mass spectrometry-selected ion monitoring (GC-MS-SIM) quantitative analysis. The results showed that GAs were biosynthesized by both non C-13 hydroxylation pathway (NCH) and early C-13 hydroxylation pathway (ECH) in garlic plant. It was also revealed that NCH pathway leading to synthesis of bioactive $GA_4$ was the more prominent GA biosynthesis pathway than ECH pathway in which bioactive $GA_1$ was synthesized. Total GAs level was gradually increased from clove differentiation to bulbing and later decreased, which portrays the active role of GA in differentiation. The biosynthesis ratio of bioactive $GA_4$ and $GA_1$ concentration was similar to that of total GAs content, which was closely related with bulb development in garlic.
Differentiation and degeneration of spikelets in paddy rice has been studied in high yielding Indica$\times$Japonica hybrid cultivar, Milyang 23 and a Japonica type cultivar, Koshihikari. Germinated seeds planted in 5000$^{-1}$ a pots filled with submerged soil and cultured under natural conditions. The young panicles of main stem were continuously dissected and observered by Cryo-SEM from the panicle initiation stage, and investigated about formation position of the differentiation and degeneration spikelet within a panicle of 7 days after heading. The degeneration of spikelet appeared simultaneously throughout panicle just after closure of spikelet by the palea and lemma. Differentiated and degenerated spikelets per panicle were about 240, 80 for Milyang 23 and 87, 6 for Koshihikari, respectively. The spikelets degeneration in Milyang 23 was mainly on the secondary and tertiary branch which were developed from primary branch of middle-basal panicle node and hardly not the spikelets of primary branch, and degeneration rate of secondary and tertiary rachis branch and spikelets for Milyang 23 were 2.5 times greater than those of Koshihikari. The proper relation equation between total differentiation or normal spikelets number per panicle(Y) and each rachis branch number were different between cultivars, Le., Y=5.5X$_1$+3.0X$_2$ for Koshihikari as previously proposed, but those of Milyang 23, Y=5.7X$_1$+3.5X$_2$+2.8X$_3$ for total differentiation spikelets and Y=5.6X$_1$+3.2X$_2$+2.4X$_3$ for normally developed spikelets, where X$_1$, X$_2$, X$_3$ are number of primary, secondary, tertiary rachis branch, respectively.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.43
no.11
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pp.1688-1694
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2014
Jeju Hallabong Tangor (Citrus kiyomi${\times}$ponkan) is a Citrus species with a variety of physiological properties such as anti-oxidant, anti-inflammation, anti-cancer, and anti-obesity. We investigated the anti-obesity effects of Hallabong Tangor peel extracts before (HLB) and after (HLB-C) bioconversion with cytolase based on modulation of adipocyte differentiation and lipid metabolism in 3T3-L1 adipocytes. Treatment with cytolase decreased flavanone rutinoside forms (narirutin and hesperidin) and increased flavanone aglycone forms (naringenin and hesperetin). During adipocyte differentiation, 3T3-L1 cells were treated with 0.5 mg/mL of Sinetrol (a positive control), HLB or HLB-C. Adipocyte differentiation was inhibited in both citrus groups, but not in control and Sinetriol groups. HLB and HLB-C tended to reduce insulin-induced mRNA levels of CCAAT/enhancer-binding protein ${\alpha}$ ($C/EBP{\alpha}$) and sterol regulatory element-binding protein 1c (SREBP1c). Compared to the control and Sinetrol groups, HLB and HLB-C markedly suppressed insulin-induced protein expression of $C/EBP{\alpha}$ and peroxisome proliferator-activated receptor gamma ($PPAR{\gamma}$). The HLB and Sinetrol groups, but not HLB-C group, significantly increased adipolytic activity with higher release of free glycerol compared to the control group in differentiated 3T3-L1 adipocytes. These results suggest that bio-conversion of Hallabong Tangor peel extracts with cytolase increases aglycone flavonoids. Irrespective of bioconversion, both Hallabong Tangor peel extracts exert anti-obesity effects that may contribute to prevention of obesity through inhibition of adipocyte differentiation or induction of adipolytic activity.
This study was conducted in order to elucidate the effects of nitrogen level and split application method, and shading treatment during reproductive stage on sink formation. Japonica variety Choocheongbyeo and Hwaseongbyeo and indica$\times$japonica cross type variety Nampoongbyeo were used. Five levels (6 to 30 kg/10a at 6 kg/10a interval) of nitrogen fertilization, and two split application methods (50-25-25% and 30-30-40% as basaltillering-panicle fertilizer) for each nitrogen treatment were applied. In addition shading treatments (shading rate, 65%) were performed for N 12 kg/10a and 24 kg/10a plot. Shading were applied for 30 days from panicle initiation to heading, 15 days from panicle initiation and 15days before heading. Panicle per square meter, and primary rachis branches per panicle and differentiated number of secondary branch per panicle increased according as applied nitrogen amount increased up to 18 to 24 kg/10a, and there was no significant difference between two nitrogen application methods. Primary rachis branch and secondary branch per square meter also increased according as the amount of applied nitrogen increase up to 18 to 24 kg/10a, and there was no significant difference between nitrogen application methods. Panicle per square meter and primary rachis branch per panicle were significantly decreased due to shading treatments only in Choochengbyeo. In all varieties, shading reduced secondary rachis branch per panicle significantly and the reduction was greatest in 30 days shading during reproductive stage. Spikelets per square meter increased according as the amount of applied nitrogen increases up to 18 to 24kg/10a, but showed no move increase above this nitrogen application level. Significant difference was not shown between nitrogen split methods. Spikelets per square meter also decreased significantly due to shading treatment during reproductive stage, showing the greatest reduction by 30 days shading during reproductive stage, and the least by 15 days shading during booting stage. The variation of spikelets per square meter was influenced greatest by the variation of panicles per square meter and spikelets per secondary rachis branch.
Here we describe a procedure for Chinese cabbage protoplast culture and effects of various treatments. Chinese cabbage protoplasts were isolated from different parts of young seedlings as using an enzyme mixture, of which yield was maximized in seven hours around after digestion. The highest rate of initial cell division followed by micro-callus formation was obtained in the medium with 1.0 mg/L 2,4-D, 0.5 mg/L NAA, and 1.0 mg/L BA when the cotyledon-derived protoplasts were cultured. Initiation of cell division and micro-callus proliferation significantly depended upon Chinese cabbage genotype under a same culture circumstances. The micro-calli developed from cotyledon tissue of Norang-Bom cultivar successfully grew toward callus colonies on the solidified medium with 0.2 mg/L zeatin and 0.1 mM spermidine. The callus colonies generated de novo shoots at the maximum frequency of 4.3% on the medium with 5.0 mg/L BA and 1.0 mg/L NM. Our results might be helpful for further studies to enhance the regeneration efficiency in Chinese cabbage protoplast culture.
The nonobese diabetic / severe combined immune deficiency (NOD/SCID) has been used for determination of proliferation and differentiation of hematopoietic stem cells as xenotransplantation animal model. In this study, we transplanted porcine hematopoietic cells from bone marrow into NOD/SCID mice via intravenous injection to confirm the activity of differentiation and proliferation for porcine hematopoietic cells in vivo. Interestingly, we observed the result of high efficiency with pig T lymphocytes in hematopoietic organs, liver, spleen lymph node, and bone marrow in NOD/SCID mice. The porcine $CD3^{+}$ T cells were detected with $5.4{\pm}1.9%$ in bone marrow, $15.4{\pm}7.3%$ in spleen, $21.3{\pm}1.4%$ in liver, and $33.5{\pm}32.8%$ in lymph node of NOD/SCID mice at 6 weeks after trans-plantation Furthermore, immunohistochemical analysis showed the high engraftment of porcine T lymphocytes in spleen of NOD/SCID mice. Our data suggest that NOD/SCID mice are excellent animal model to determinate the generation md function of pig T lymphocytes.
Understanding molecular mechanisms that control embryonic stem cell (ESC) self-renewal and differentiation is important for the development of ESC-based therapies. Statins, inhibitors of 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase (HMG-CoA reductase), potently reduce cholesterol level. As well as inhibiting cholesterol synthesis, statins inhibit other intermediates in the mevalonate pathway such as farnesyl pyrophosphate (FPP) and geranylgeranyl pyrophosphate (GGPP), major substrates for protein isoprenylation. Studies showed that pleiotropic effects of statins beyond cholesterol lowering property arise from inhibition of protein isoprenylation that is involved in various cellular functions including proliferation and differentiation. It has been determined that statins have inhibitory effect on ESC self-renewal and stimulatory effect on ESC differentiation into adipogenic/osteogenic lineages. Importantly, statins mediate downregulation of ESC self-renewal by inhibiting RhoA-dependent signaling, independently of their choresterol-lowering properties. Understanding statin's actions on ESCs may provide important insights into the molecular mechanisms that regulate self-renewal or differentiation of ESCs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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