This study was carried out to evaluate the suitability of microsatellite markers for varietal identification and genetic relationship of 170 commercial pepper cultivars. The relationship between marker genotypes and 11 pepper cultivars with different morphological traits was also analyzed. Of the 302 pairs of microsatellite primers screened against 11 pepper cultivars, 24 pairs were highly polymorphic in terms of number of alleles. These markers were applied for the construction of DNA profile data base for 170 commercial pepper cultivars. A total of 164 polymorphic amplified fragments were obtained from 24 microsatellite primers. The average polymorphism information content was 0.673 ranging from 0.324 to 0.824. One hundred and sixty four microsatellite alleles were used to calculate Jaccard's distance coefficients using unweighted pair group method. A clustering group of varieties, based on the results of microsatellite analysis, were categorized into 3 major groups corresponding to morphological traits. The phenogram discriminated all varieties by markers genotypes. These microsatellite markers will be useful as a tool for protection of plant breeders' intellectual property rights through variety identification in distinctness, uniformity and stability test.
Song, Kyo-Hong;Jung, Jong-Woo;Koo, Hye-Young;Kim, Won
Korean Journal of Ecology and Environment
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v.40
no.1
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pp.143-148
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2007
The introduced exotic species has often caused severe problems to the native ecosystem. One of such species is the freshwater fish gengorobuna (Carassius cuvieri) introduced from Japan. The first step to assess harmful effects of this species on the Korean freshwater ecosystem is to discriminate it from the most similar native crucian carp (Carassius auratus). Because traditional morphological identification often gives unreliable results due to their highly similar phenotype, a new more efficient method is needed. For this purpose, molecular markers produced by the efficient one-step PCR method using three primers (DDF, DDR and DDR1) were developed and tested in the present study. This molecular marker will play an important role in monitoring fish community of Korean freshwater ecosystem.
Cultivated tomato, Lycopersicum esculentum, is a very important crop. We selected 36 cultivars and studied them for identification and polymorphism by employing random amplified DNA (RAPD) analysis with 80 oligonucleotide primers. Of the 80 primers, 36 primers (45.0%) were polymorphic. Detection of polymorphism in cultivated tomato opens up the possibility of development of its molecular map by judicious selection of genotypes. Molecular markers can also be used for cultivar identification and protection of the plant breeder's intellectual property rights (plant breeders' rights, PBRs). As an example, DNA polymorphism using OPC-13 primer that did not produce the OPC-13-01 band was only found in Junk Pink and Ailsa Craighp cultivars. OPA-12-03 and OPB-15-07 were fragments specific to the TK-70 cultivar and were absent in other cultivars. DNA polymorphism in cultivated tomato in this study was correlated with a type of inflorescence, although some cultivars had exceptions. These approaches will be useful for developing marker-assisted selection tools for genetic enhancement of the tomato plant for desirable traits.
Choi, Jong In;Jung, Hwa Jin;Na, Kyeong sook;Oh, Min-Ji;Kim, Min-Keun;Ryu, Jae-San
Journal of Mushroom
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v.19
no.1
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pp.76-80
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2021
To develop a method for the differentiation of Pleurotus ostratus cultivars, the multiplex-simple sequence repeat (SSR) primer set based on the SSRs obtained from whole genomic DNA sequence analysis was designed with two polymerase chain reaction (PCR) primer sets. These SSR primer sets were employed to distinguish 10 cultivars and strains. Twenty polymorphic markers were selected based on the genotyping results. PCR with each primer produced 1-4 distinct bands ranging in size from 150 to 350 bp, which was within the expected range. However, since a sole SSR marker was unable to detect polymorphisms in every cultivar, multiplex PCRs with composite PCR primer sets were employed. The multiplex primer, "166+115," completely discriminated 12 cultivars and strains with 40 loci, which were 12 more than the simple arithmetic addition of each locus of the primers 115 and 166. These results might be useful to provide an efficient method for the differentiation of P. ostreatus cultivars with separate PCRs for the quality control of spawn and protection of breeders' rights.
Kim, Sun-Young;Kim, Se-Joo;Min, Gi-Sik;Yang, Eun-Jin;Yoo, Man-Ho;Choi, Joong-Ki
The Sea:JOURNAL OF THE KOREAN SOCIETY OF OCEANOGRAPHY
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v.12
no.3
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pp.225-233
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2007
To verify which loop regions of 18S rRNA gene are suitable as species-specific genetic markers in ciliates, we analyzed the genetic variation of 18S rRNA gene among 9 Euplotes species (Hypotrichia : Ciliophora). In our result, no inter-specific variation was detected from V1, V3 and V5 regions, and the length of V7 and V8 are 44 bp and 79 bp, respectively, which are too short to make genetic marker. In contrast, V2 and V4 may be good candidate segments of species-specific diagnostic molecular markers because these two regions are most variable ($1.75{\sim}20.61%$) and showed good inter-specific phylogeny. Furthermore, the sequences of V2 and V4 are 123 bp and 306 bp, respectively in length which are enough to make species-specific marker.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2018.04a
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pp.56-56
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2018
토마토에서 과형은 과실의 여러 가지 형질 중에서 눈에 가장 잘 띄는 형질이며, 소비자의 토마토를 구매를 결정하는데 많은 영향을 미치는 중요한 형질이다. 토마토의 과형을 결정하는 여러 가지 유전자 중에 OVATE는 둥근 토마토 과일을 서양 배 모양(pear shape)의 과일로 전환하는데 결정적인 역할을 하는 유전자이다. OVATE 유전자에 의해서 과일의 모양이 변하는 것은 조기종결 코돈을 초래하는 열성 돌연변이에 의해서 유도되며, 단백질의 C-말단 영역이 제거됨에 따라 그 기능을 상실하여 나타나는 현상이다. OVATE 유전자는 주로 식물의 생식기관에서 발현되며, 꽃에서는 개악하기 10일전부터부터 전사체가 만들어지고 발달중인 과실에서는 개약 후 8일까지 전사체를 확인할 수 있다. 토마토 분자육종 과정에서 과형 판별을 위해서 OVATE 유전자 연관 분자표지는 보고된 바 있으나 OVATE 유전자 유래 분자표지는 보고된바가 없다. 본 연구에서 국내에서 육성된 육종 라인들의 resequencing을 통해 OVATE 유전자 염기서열간의 SNP를 발견하고 이들을 dCAPS 마커로 전환하여 분자표지를 개발했다. 이러한 분자표지는 둥근 토마토(round)와 서양 배모양(pear shape)토마토 육종 프로그램의 효율성과 정확성을 향상시키는데 활용할 수 있을 것으로 기대한다.
Solanum brevicaule is one of the tuber-bearing wild Solanum species. Because of its resistance to several important pathogens infecting potatoes during cultivation, it can be used for potato breeding. However, the fact that S. brevicaule used in this study has an EBN value of two causes the sexual reproduction barriers between the species and cultivated potatoes. In this study, specific markers for discriminating S. brevicaule from other Solanum species were developed on the basis of the results of sequence alignments with the whole chloroplast genomes of S. brevicaule and seven other Solanum species. The chloroplast genome of S. brevicaule was completed by next-generation sequencing technology described in other recent studies. The total sequence length of the chloroplast genome of S. brevicaule is 155,531 bp. Its structure and gene composition are similar to those of other Solanum species. Phylogenetic analysis revealed that S. brevicaule was closely grouped with other Solanum species. BLASTN search showed that its genome sequence had 99.99% and 99.89% identity with those of S. spegazzinii (MH021562) and S. kurtzianum (MH021495), respectively. Sequence alignment identified 27 SNPs that were specific to S. brevicaule. Thus, three PCR-based CAPS markers specific to S. brevicaule were developed on the basis of these SNPs. This study will facilitate in further studies on evolutionary and breeding aspects in Solanum species.
The tetraploid Solanum acaule is a wild potato species from Bolivia widely used for potato breeding because of its diverse attractive traits, including resistance to frost, late blight, potato virus X, potato virus Y, potato leafroll virus, potato spindle tuber viroid, and cyst nematode. However, the introgression of useful traits into cultivated potatoes via crossing has been limited by differences in endosperm balance number between species. Somatic fusion could be used to overcome sexual reproduction barriers and the development of molecular markers is essential to select proper fusion products. The chloroplast genome of S. acaule was sequenced using next-generation sequencing technology and specific markers for S. acaule were developed by comparing the obtained sequence with those of seven other Solanum species. The total length of the chloroplast genome is 155,570 bp, and 158 genes were annotated. Structure and gene content were very similar to other Solanum species and maximum likelihood phylogenetic analysis with 12 other species belonging to the Solanaceae family revealed that S. acaule is very closely related to other Solanum species. Sequence alignment with the chloroplast genome of seven other Solanum species revealed four InDels and 79 SNPs specific to S. acaule. Based on these InDel and SNP regions, one SCAR marker and one CAPS marker were developed to discriminate S. acaule from other Solanum species. These results will aid in exploring evolutionary aspects of Solanum species and accelerating potato breeding using S. acaule.
The diploid Solanum cardiophyllum, a wild tuberbearing species from Mexico is one of the relatives to potato, S. tuberosum. It has been identified as a source of resistance to crucial pathogens and insects such as Phytophthora infestans, Potato virus Y, Colorado potato beetle, etc. and is widely used for potato breeding. However, the sexual hybridization between S. cardiophyllum and S. tuberosum is limited due to their incompatibility. Therefore, somatic hybridization can introduce beneficial traits from this wild species into the potato. After somatic hybridization, selecting fusion products using molecular markers is essential. In the current study, the chloroplast genome of S. cardiophyllum was sequenced by next-generation sequencing technology and compared with those of other Solanum species to develop S. cardiophyllum-specific markers. The total length of the S. cardiophyllum chloroplast genome was 155,570 bp and its size, gene content, order and orientation were similar to those of the other Solanum species. Phylogenic analysis with 32 other Solanaceae species revealed that S. cardiophyllum was expectedly grouped with other Solanum species and most closely located with S. bulbocastanum. Through detailed comparisons of the chloroplast genome sequences of eight Solanum species, we identified 13 SNPs specific to S. cardiophyllum. Further, four SNP-specific PCR markers were developed for discriminating S. cardiophyllum from other Solanum species. The results obtained in this study would help to explore the evolutionary aspects of Solanum species and accelerate breeding using S. cardiophyllum.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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