국내분리 소 로타바이러스의 genomic RNA 형태, 분리주간의 교차면역반응 그리고 단클론 항체를 이용한 중화시험에 의해 혈청형을 조사한 바 다음과 같은 결과를 얻었다. 국내분리주들의 genomic RNA 형태는 크게 NCDV 형태(7/11 시료)와 non-NCDV 형태(4/11 시료)의 두가지로 나타났다. 교차면역시험에서 표준주인 NCDV주에 대한 양성혈청은 국내분리주들에 대해서는 비교적 낮은 중화력을 나타내었으나 국내분리주에 대한 양성혈청들은 타 국내분리주 뿐만 아니라 NCDV주에 대해 서로 높은 중화력을 나타내었는데, 분리주 중 678, P44, M4에 대한 양성혈청은 NCDV를 포함한 대부분의 분리주에 대해 100%의 중화력을 나타내었다. 또한 288주에 대한 양성혈청은 288, 678,P44, M4주에 대해서는 높은 중화력을 나타내었으나 다른 분리주들에 대해서는 비교적 낮은 중화력을 나타내었다. 국내분리주의 단크론 항체를 이용한 G혈청형 감별결과는 G6유사형이 45.8%(11/24주), G10 유사형이 54.2%(13/24주)로서 두가지 G형이 존재하였다. 한편 G6형에 반응한 것들의 P형은 표준주인 NCDV주(P1)와는 다른 것으로 확인되었으며, G10 유사형에 속하는 14주는 모두 P11 혈청형으로 판명되었다.
Isolates of soybean mosaic virus (SMV) strains classified based on virulence in silt resistant soybean cultivars caused the same reactions in soybean cultivars used as differentials as those obtained by sap inoculations to the same cultivars. Five species of aphids (Myzus persicae SULZ., Aphis craccivora KOCH, Aphis citricola VAN., Rhopalosiphum maidis FIT., End R. padi L.) were able to transmit each of SMV strains. However, R. maidis and R. padi were inefficient vectors for transmission of SMV strain G3. Spread if four SMV strains (G2, G3, G6, and G7) was monitored in the field from sapinoculated plants in a one meter row of Williams soybeans (source plants) to plants in an adjacent row of Williams 80cm away (test plants). Test plants wert downwind from the source plants. A complete block design was used. Spread of strain G6 was significantly greater than that of other three strains. Two hundred six aphids were collected from June 27, 1979 to August 2, 1979 in the same field. A. citricola was the mist prevalent, comprising $68\%$ of the total aphids. Yields of Williams inoculated with each strain were also compared. Yields were the least from plants inoculated with strain G2 following G6, G3, and G7 in that order.
Human Aichivirus (Aichivirus A; AiV-A) is a positive-sense single-strand RNA non-enveloped virus that has been detected worldwide in various water environments including sewage, river, surface, and ground over the past decade. To develop a method with excellent sensitivity and specificity for AiV-A diagnosis from water environments such as groundwater, a combination capable of reverse transcription (RT)-nested polymerase chain reaction (PCR) was developed based on existing reported and newly designed primers. A selective method was applied to evaluate domestic drinking groundwater samples. Thus, a procedure was devised to select and subsequently identify RT-nested PCR primer sets that can successfully detect and identify AiV-A from groundwater samples. The findings will contribute to developing a better monitoring system to detect AiV-A contamination in water environments such as groundwater.
Jeon, Young Ju;Song, Sung Moon;Lee, Chang Soo;Kim, In Ho
Korean Chemical Engineering Research
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v.49
no.5
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pp.628-632
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2011
L-ribose has recently attracted interest as a starting material for antiviral drug. It could be obtained from L-arabinose by epimerization reaction. Epimerization reaction was carried out with molybdenium oxide or molybdic acid catalyst and methanol/water solution. Reaction temperature, methanol percentage, and catalyst kind were selected to find an optimum reaction condition. Ion exhange chromatography was used for separating epimerization reaction mixture, and then HPLC chromatogram of L-ribose fraction obtained to calculate the yield of the reaction. Shodex ion exchange HPLC column(Model SC1011) and Phenomenex Luna $NH_2$ HPLC column were compared to employ a convenient HPLC analysis. It was found that the usage of 20% methanol, $60^{\circ}C$, and 40 g/L molybdic acid gives the best reaction condition with a yield of 21%.
Seo, Hyun Joo;Jung, Yu Jin;Park, Soo Kyung;Choi, Seo Hui;Lee, Ji Hyuk;Kim, Myo Jing;Chang, Yun Sil;Park, Won Soon
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.52
no.1
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pp.56-60
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2009
Purpose : This study aimed to test whether rotavirus-associated necrotizing enterocolitis (RV+NEC) produced different clinical findings or outcomes from those of non-rotavirus necrotizing enterocolitis (RV-NEC). Methods : Eight patients from the RV+NEC group and 22 patients from the RV-NEC group diagnosed with modified Bell stage II or higher NEC were selected for this study. Fecal specimens from all infants were tested for rotavirus infection using a monoclonal antibody-based enzyme immunoassay (EIA). Clinical, radiographic, and clinical outcome data were analyzed retrospectively. Results : RV+NEC infants had a significantly higher birth weight and were born at a significantly higher gestational age ($33.5{\pm}3.3$ weeks vs. $29.3{\pm}4.4$ weeks; P=0.01). There were no differences in the occurrence of thrombocytopenia, mural gas, and pneumoperitoneum between the 2 groups. However, portal vein gas was more common in the RV+NEC group (88% vs. 9%; P<0.01). Neither the incidence of Bell stage III (or higher) NEC nor surgical intervention differed between the two groups. The number of complications and mortality rates were also similar. Conclusion : Rotavirus-associated NEC occurs in infants with a higher birth weight and those born at a greater gestational age. However, the severity of the condition and the resulting outcomes did not differ from those for infants affected by non-rotavirus NEC.
In vitro-tested ribozyme against synthesized cucumber mosaic virus (CMV) RNA (Agric. Chem. & Biotech. 37:56-63(1994)) was expressed in tobacco plant to develop virus resistant plants. The ribozyme sequence was linked to cauliflower mosaic virus 35S promoter and nopaline synthase(nos) terminator and this chimeric 35S-ribozyme-nos gene was sequenced. The sequenced chimeric gene was transferred to Agrobacterium tumefaciens LBA4404 using tri-parental mating system. The E. coli HB101 containing chimeric gene was incubated with E. coli HB101(pRK2073) as a helper and Agrobacterium tumefaciens LBA4404. Then Agrobacterium cells containing the ribozyme construct was cocultivated with tobacco leaf pieces. Ten different plants were regenerated from kanamycin containing MS medium. The presence of the ribozyme construct in the transgenic tobacco plants was confirmed by polymerase chain reaction (PCR). Seven different transgenic plants in ten different kanamycin resistant plants showed the expected size (570 base pairs) of 35S-ribozyme-nos gene fragment. Total RNAs were isolated from four different transgenic plants and separated on a 1% agarose gel containing formamide. Northern hybridization with 35S-ribozyme-nos gene fragment as a probe indicated that ribozyme transcripts may be degraded tv nuclease. Therefore, nuclease-resistant ribozymes are needed for the development of virus-resistant transgenic plants using ribozymes.
Park, Ji-yong;Kim, Chul-joong;Shin, Kwang-soon;Kim, Won-yong;Kang, Shien-young;Park, Yong-ho;Han, Hae-jung;Park, Yong-ha
Korean Journal of Veterinary Research
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v.35
no.3
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pp.515-530
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1995
Coronaviridae에 속하는 transmissible gastroenteritis virus(TGEV)와 porcine epidemic diarrhea virus(PEDV)를 specific하게 detection할 수 있는 방법을 개발하고자 본 연구를 수행하였다. 두 바이러스 모두 RNA 바이러스이기 때문에 reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR)으로 nucleocapsid(N) protein gene의 cDNA를 증폭시켰다. SmaI으로 처리한 pTZ19R에 ligation시킨 후 염기서열을 밝히고자 sequencing하였다. 각각의 prototype virus와 비교하여 상동성을 밝혔다. 두 바이러스에 대한 cDNA probe를 제작하여 Southern blot hybridization을 실시하였다. TGEV의 경우 백신주인 P45와 병독주인 Miller strain을 사용하였다. cDNA를 증폭시키기 위해 N1/N1R과 N2/N2R 두 가지 primer를 이용한 결과, N1/N1R primer의 경우 586bp 크기의 PCR product를 얻을 수 있었고, N2/N2R primers로 582bp의 cDNA를 증폭시킬 수 있었다. PEDV 실험을 위하여 PED 임상 증상을 나타내는 분변을 이용하여 RT-PCR을 실시하였다. P2/P2R primer로 753bp의 PCR product를 얻을 수 있었다. TGEV의 두 가지 strain의 N protein gene을 sequencing하여 prototype인 Purdue strain과 염기서열 상동성을 조사한 결과, 97%이상의 높은 homology를 나타내었다. PED-V 역시 N protein gene을 sequencing하여 CV777과 염기서열 상동성을 조사한 결과 97%이상의 homology로 PEDV임을 알 수 있었다. TGEV와 PEDV의 염기서열을 비교한 결과 29%의 낮은 homology를 관찰할 수 있었다. 두 가지 바이러스의 N protein gene에 대한 cDNA probe를 제작하여 Southern blot hybridization을 한 결과, 각 바이러스에 매우 특이적 반응을 나타내었다.
Cho, Ja Young;Yi, Yi Kyaw;Seong, Mi So;Cheong, JaeHun
Journal of Life Science
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v.32
no.2
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pp.94-100
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2022
Chronic infection by hepatitis B virus (HBV) greatly increases the risk for liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma (HCC). The outcome of HBV infection is shaped by the complex interplay of the mode of transmission, host genetic factors, viral genotype, adaptive mutations, and environmental factors. The pregenomic RNA transcription of HBV for their replication is regulated by the core promoter activation. Core promoter mutations have been the reason for acute liver failure and are associated with HCC development. We obtained HBV genes from a patient in Myanmar who was infected with HBV and identified gene variations in the core promoter region. For measuring the relative transactivation activity of the core promoter, we prepared the core-promoter reporter construct. Among the gene variations of the core promoter, the mutations of C1731T and G1806A were associated with increase in the transactivation of the HBV core promoter. Through computer analysis for searching for a tentative transcription factor binding site, we showed that the mutations of C1713T and G1806A newly created C/EBPβ and XBP1-responsive elements of the core promoter, respectively. The ectopic expression of C/EBPβ largely increased the HBV core promoter containing the C1713T mutation and that of XBP1 activated the M95 promoter containing the G1806A mutation. Our efforts to treat and prevent HBV infections are hampered by the emergence of drug-resistant mutations and vaccine-escape mutations. Our results provide the biological properties and clinical significance of specific HBV core promoter mutations.
International trade is one of the primary ways that non-native species spread worldwide. Korea and China are geographically close and have a large mutual trade volume. To investigate the population movement of the invasive whitefly(Bemisia tabaci Gennadius) between the two countries, we compared the biotype distribution, insecticidal response, and the TYLCV(tomato yellow leaf curl virus) viruliferous rate of local populations collected in 2019. Based on the mitochondrial DNA COI sequences of B. tabaci, only the Q biotype was found in all populations in Korea, whereas the B biotype (14.3%) and Q biotype (85.7%) were found in China. In the haplotype composition of the B. tabaci Q biotype, only the Q1 group[Q1H1(79.8%) and Q1H2(20.2%)] was observed in China, but the Q1 group [Q1H1(1.7%) and Q1H2(97.5%)] and the Q2 group(only one individual) were found in Korea. The Korean populations showed high mortality(more than 80%) from 15 commercial insecticides, but the Chinese populations showed significantly low mortality from eight insecticides. No TYLCV infections were observed in the Korean populations while the average TYLCV viruliferous rate was 21.4% in the Chinese populations. Taken together, the results suggest that the population structures of B. tabaci in the two countries are different and may have different immigration histories.
본 논문에서는 H1N1 인플루엔자 A 바이러스(influenza A H1N1 virus) 검출을 위한 산화아연 나노구조(zinc oxide nano structure) 기반의 전기화학적 면역센서를 제작하고 그 특성을 분석하였다. H1N1 인플루엔자 A 바이러스는 빠른 전파 속도 때문에 정확하고 빠른 검출이 필요하다. 먼저, 2 $mm^2$의 표면적을 갖는 패턴된 금 전극 위에 열수방식(hydrothermal method)으로 성장시킨 산화아연 나노구조가 선택적으로 형성되도록 리프트-오프(lift-off) 방법을 사용하였다. 0.01 M phosphate buffered saline(pH 7.4)에서 2 ${\mu}g$/mL 농도의 1차 항체를 정전기력에 의해 산화아연 나노구조에 고정화한 후, 10 pg/mL ~ 5ng/mL 농도의 H1N1 항원을 적용하여 포획 항체에 결합시키고 HRP(horseradish peroxidase) 효소가 결합된 검출 항체를 항원에 결합시키는 샌드위치 ELISA법을 이용하였다. HRP와 반응하는 TMB(3,3', 5,5'-tetramethylbenzidine)와 과산화수소가 포함된 acetate buffered 용액(pH 5)을 전해질로 사용하고 순환전압전류 측정법(cyclic voltammetry)으로 센서의 특성을 분석하였다. 측정된 순환전압전류그래프(cyclic voltammogram)에서 H1N1 항원 농도 10 pg/mL ~ 5 ng/mL의 응답 전류는 276.47 ${\pm}$ 21.72 nA (평균 ${\pm}$ 표준편차, n=4) ~ 478.89 ${\pm}$ 6.21 nA로 측정되었고, logarithmic하게 증가하는 응답 전류 특성을 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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