• Journal of Korean Neurosurgical Society
• /
• 제29권6호
• /
• pp.731-737
• /
• 2000

목 적 : 종양세포의 세포면에서는 성장인자 수용체들이 과발현되고 이들이 성장인자들과 결합함으로서 세포의 성장을 촉진하게 된다. 원발성 악성 뇌종양에 대한 새로운 치료법 중 하나가 면역독소를 사용하는 방법이다. 독소는 대상 세포의 세포면에 있는 수용체를 통해 세포질로 이행되며, 면역독소가 선택적인 항종양작용을 나타내기 위해서는 수용체가 과발현되어야 한다. 강력한 세포독성의 효과가 있음에도 불구하고 면역독소를 환자에 투여하였을 때 종양을 완치시키지는 못하였는데, 면역독소의 효과에 영향을 미치는 여러 인자들에 대한 더 많은 연구가 요구된다. 이러한 연구에 사용되어질 뇌종양세포주들에서 성장인자수용체들의 발현 여부를 알아보기 위해 본 연구를 시행하였다. 대상 및 방법 : 한 개의 수모세포종 세포주(Daoy)와 두 개의 교모세포종 세포주(U373 MG, T98 G)에서, transferrin 수용체, insulin-like growth factor-1 수용체, 그리고 interleukin-4 수용체들의 발현을 flow cytometric analysis를 이용하여 조사하였다. 결 과 : Transferrin 수용체와 interleukin-4 수용체는 Daoy, U373 MG, 그리고 T98 G 모두에서 발현되었다. Insulin-like growth factor-1 수용체는 Daoy와 U373 MG에서는 발현되었지만 T98 G에서는 발현되지 않았다. 결 론 : Transferrin 수용체와 interleukin-4 수용체는 면역독소 치료에 적합한 것으로 보인다. 본 실험의 결과는 상기의 세포주를 사용하여 면역독소와 관련된 실험을 하는데 참고가 되어야하며, 면역독소 치료에 있어서 적절한 면역독소를 선택하는 문제 등 치료 모델을 확립하는데 고려되어야 할 것이다.

• 식품기술
• /
• 제10권1호
• /
• pp.115-120
• /
• 1997

면역분석법(immunoassay)은 aflatoxin류, deoxynivalenol(DON), zearalenone(ZEA), fumonisin류 등을 포함하는 다양한 진균독소분석에 적용되고 있다. 이들 분석법을 이용하여 여러 종류의 matrix내에 존재하는 물질들을 분석할 수 있다. 그리고 많은 시료를 빨리 분석해야 하는 경우에 이 방법이 적용되고 있다. 상업적인 면역화학적 분석키트들은 흔히 검출감도(sensitivity), 특이성(specificity), 재현성(reproducibility), 비용(cost), 안정성(stability), 편리성(ease of use)등의 관점에서 평가된다. 실험실적으로 품질보증을 위하여 표준곡선과 양성대조구 등에 대한 사전 검토가 필수적이다. 또한 높은 농도의 분석물의 경우에는 matrix에서 기인한 간섭때문이 아닌지를 구분하는 것도 중요하다. 본문에서 곡류와 곡류가공품 및 특정의 감시대상물 질내 aflatoxin류, DON, ZEA 그리고 fumonisin류와 같은 진균독소의 분석에 면역화학적 방법을 사용하여 얻어진 공동연구의 결과에 대한 해석기준이 제시된다. 또한 yes/no로 구분해야 하는 정성시험의 결과해석에 필요한 기준이 제시된다. 진균독소의 면역분석법을 평가하기 위한 몇몇기준들과 그 방법들을 감시도구로 사용하는 예는, 식품중의 잔류농약을 검출하기 위한 접근방법과 유사한 모델로서 활용될 수 있을 것이다.

• 한국식품영양과학회지
• /
• 제22권1호
• /
• pp.91-95
• /
• 1993

Vibrio vulnificus가 생산하는 용혈독소의 단백화학적, 면역화학적 연구에 이용할 목적으로 이 균의 용혈독소에 대한 항혈청을 간편하게 만드는 방법을 실험한 결과는 다음과 같다. Vibrio vulnificus가 생산하는 조용혈독소를 인위적으로 만든 liposome (cholesterol-phos-phatidyl-liposome)에 혼합하여 반응시킨 결과 분자량 50kD의 단백질인 용혈독소만 선택적으로 liposome에 결합되었다. 그러므로 liposome에 결합시킨 조용혈독소를 면역원으로 하고 이 면역원을 토끼의 등근육에 주사하여 항혈청을 간편하게 만들 수 있었으며 이 항혈청은 용혈독소에 대한 특이성이 높았다. 환자와 환경에서 분리된 Vibrio vulnificus의 용혈독소와 liposome를 이용하여 제조한 항혈청을 gel 내 침강반응으로 확인한 결과 단일 침강선을 형성하였다.

• 농약과학회지
• /
• 제18권3호
• /
• pp.181-190
• /
• 2014

곤충병원세균인 Bacillus thuringiensis (비티)는 포자 형성과 더불어 살충성 Cry 독소단백질을 생산한다. Cry 독소단백질은 대상 곤충의 중장에 위치한 수용체와 특이적으로 결합하며 살충작용을 발휘하기에 비티의 적용해 충범위가 비교적 좁다. 본 연구는 비티의 적용해충범위와 살충력을 증가시키기 위한 일환으로 실시되었다. 서로 다른 네 가지 비티 균주에서 분리된 Cry 독소단백질은 각각 좁은 적용해충범위를 나타냈다. 이들 Cry 독소단백질을 혼합한 결과 적용범위가 현격하게 증가했다. 벡큘로바이러스가 비티의 적용범위를 증가시키는 지 알아보기 위해 Cry1Ac 또는 Cry1Ca 독소단백질을 각각 발현시키는 재조합바이러스로 검정한 결과 벡큘로바이러스는 Cry 독소단백질의 적용범위를 증가시키는 데 유효하지 않았다. Xenorhabdus nematophila (Xn) 세균 배양액은 조사된 모든 곤충의 세포성 면역을 억제하고 Cry 독소단백질의 살충력을 증가시켰다. 이 Xn 세균배양액을 혼합 Cry 독소단백질에 추가한 결과 적용해충범위와 살충력을 모두 증가시켰다.

• 농약과학회지
• /
• 제19권3호
• /
• pp.301-311
• /
• 2015

Bacillus thuringiensis (비티)의 약효를 증가시키기 위한 일환으로 Cry 독소단백질의 혼합효과를 검정하였다. 서로 다른 네 가지 비티 균주에서 분리된 Cry 독소단백질 추출물들은 각각 좁은 적용해충범위를 나타냈다. 이들 Cry 독소단백질을 혼합한 결과 적용범위가 현격하게 증가했다. Xenorhabdus nematophila (Xn) 세균 배양액은 조사된 모든 곤충의 세포성 면역을 억제하고 Cry 독소단백질의 살충력을 증가시켰다. 이 Xn 세균배양액을 혼합 Cry 독소단백질에 추가한 결과 적용해충범위와 살충력을 모두 증가시켰다.

• 한국가금학회지
• /
• 제39권4호
• /
• pp.273-278
• /
• 2012

본 연구는 식중독은 물론, 아토피성 피부염의 원인물질로 알려져 있는 포도상구균 장내독소 B(Staphylococcal enterotoxin B; SEB)에 대한 특이 난황항체를 개발하고자 실험을 실시하였다. 우선, SEB 유전자를 클로닝한 다음, 대장균 발현시스템을 이용하여 약 30 kDa 정도의 재조합 SEB 단백질을 생산하였다. 재조합 SEB 단백질을 산란계에 2주 간격으로 3회 면역접종을 실시하고, 혈청 및 난황 내 항체가를 측정한 결과, 면역 후 4주경에 항체가가 최고치에 달하였으며, 산란계로부터 획득한 난황항체를 이용한 Western blot 결과, 재조합 SEB 단백질은 물론, 상용화 SEB 단백질과도 특이적으로 반응한다는 것을 규명하였다. 결론적으로, 식중독과 아토피성 피부염 등의 원인물질로 알려진 SEB에 특이적인 난황항체를 생산에 성공하였으며, 이러한 특이적인 난황항체는 식중독 및 아토피성 피부염의 예방 및 치료에 활용 가능할 것으로 사료된다.

• 한국응용과학기술학회지
• /
• 제35권4호
• /
• pp.1230-1242
• /
• 2018

곰팡이독소는 곰팡이의 2차 대사산물로 동물용 원료사료 중에서 특히 곡물 및 곡물부산물에서 가장 흔하게 발생한다. 돼지는 곰팡이독소에 대한 감수성이 다른 동물에 비해 높은 것으로 알려져 있다. 아플라톡신, 디옥시니발레놀 및 제랄레논은 동물용 원료사료에서 가장 흔하게 발생하는 곰팡이독소이며, 국내 외에서 허용기준을 설정하여 관리하고 있다. 곰팡이독소는 종류에 따라 서로 다른 독성작용을 가지지만 모두 면역체계를 표적으로 하며, 최종적으로 돼지의 성장저하를 초래한다. 따라서 곰팡이독소에 의한 피해를 최소화하기 위한 다양한 대책이 필요하다. 일반적으로 곰팡이독소에 오염된 사료를 섭취한 돼지는 사료섭취량이 감소하며, 그 결과 증체량 저하가 발생한다. 사료섭취량 감소로 인한 필수영양소의 불충분한 공급은 영양소함량을 강화시킨 사료를 급여함으로써 증체량 감소를 최소화할 수 있다. 또한 곰팡이독소 저감제를 이용하여 곰팡이독소에 의한 피해를 저감시킬 수 있으나, 곰팡이독소의 종류 및 농도, 환경적 요인, 저감제의 종류 등에 따라 저감제 사용 효과에 대한 변이가 존재한다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제19권1호
• /
• pp.25-30
• /
• 1991

국내농작물의 근부토양으로 분리한 Pseudomonas의 염색체 DNA에 Tn5를 사용하여 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki HD73의 독소유전자(cp)를 도입하였다. Tn5의 중심부위에 있는 BamHI위치 (Tn5-cp)와 BglII 위치 (IS5OL-cp)에 각각 독소유 전자를 도입하였으며 두 종류의 Pseudomonas 균주에는 Tn5-cp로써 그리고 다른 세 종류의 Pseudomonase 균주에는 IS5OL-cp로써 transposition하였다. 면역학적 방법과 흰불나방 애벌레에 대한 살충성 검정으로서 독소유전자의 도입과 발현을 확인하였다.

• 한국식품저장유통학회지
• /
• 제22권4호
• /
• pp.559-566
• /
• 2015

본 연구에서는 곡류 중 트리코테센류 곰팡이독소인 T-2 독소 및 HT-2 독소의 LC-MS/MS 분석방법을 검증하고 국내 유통 곡류 중 T-2 독소 및 HT-2 독소의 오염실태를 파악하였다. 곡류 중의 T-2 독소 및 HT-2 독소를 분석하기 위해, 염화나트륨을 포함한 90% 메탄올 용액으로 추출, 원심분리, 여과, 4% 염화나트륨용액으로 희석하고, 원심분리한 후, 여과한 후 면역친화성칼럼에 의해 정제한 시료를 LC-MS/MS 동시정량 분석하였다. T-2 독소 및 HT-2 독소의 검출한계 및 정량한계는 각각 $0.5{\mu}g/kg$ 및 $1.5{\mu}g/kg$ 얻었다. matrix-matched 표준 검량식에서 상관계수 0.99 이상의 직선성을 얻었으며, T-2독소와 HT-2 독소 2배에서 10배의 정량한계로 표준용액을 첨가한 시료에서 회수율은 T-2독소와 HT-2 독소 각각 $100.6{\pm}7.2%$, $96.8{\pm}9.4%$로 EU 가이드라인에서 제시하는 유효성 기준을 만족하였다. LC-MS/MS 정량법을 이용하여 국내 곡류 9품목 115건에 대해 T-2 독소와 HT-2 독소의 오염도를 조사하여 본 결과, 전체 곡류 115건 중에서 T-2 독소는 83건, HT-2 독소는 93건 검출되었으며 오염도는 T-2 독소는 N.D~37.1 ug/kg, HT-2 독소는 N.D~5.4 ug/kg 으로 낮은 수준이었으며, 오염도는 유럽기준치($100{\mu}g/kg$)이내 이었다. 본 연구에서 개발된 곡류 중 T-2 독소 및 HT-2 독소에 대한 분석법은 향후 우리나라 곡류 중 곰팡이독소 안전관리를 위한 시험법으로 활용가능하며, 오염도 자료는 안전성 평가의 기초자료로 활용이 가능할 것으로 사료된다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제17권4호
• /
• pp.295-300
• /
• 1989

B. thuringiensis가 생산하는 살충성 독소 단백질의 생태학적 응용방법을 개발하기 위한 목적으로 우선 독소 단백질 유전자를 옮겨 발현시키기에 적합한 숙주 미생물의 분리작업을 수행하였다. 국내 주요농산물인 고추, 감자, 무우 등 7가지 농작물의 뿌리부근에 군락을 형성하는 35종의 형광성Pseudomonas들을 분리하였고 독소 단백질 유전자를 함유하는 재조합 plasmid에 대한 숙주로서의 이응가능성을 검토해 보기 위하여 분리균주 35주에 대한 형질전환을 실시한 결과 4주에 독소 단백질 유전자의 도입이 가능하였고 생물검정과 면역학적인 방법 등에 의한 결과 BT 독소 유전자의 발현을 확인하였다.