Cordyceps has a reputation for its broad biological activities and as a tonic which replenishs vital function in Chinese traditional medicines. As an attempt to obtain fundamental data for the development of new type Cordyceps, the effects of the fruiting bodies of cultivated fungus of Paecilomyces japonica grown on silkworm larvae on radiationinduced damages were investigated. We performed this study to determine the effect of Dongchongxiacao (Paecilomyces japonica) on jejunal crypt survival, endogenous spleen colony formation, and apoptosis in jejunal crypt cells and hair follicles of mice irradiated with high and low dose of gamma-radiation. Treatment with Dongchongxiacao showed no significant modifying effects on the jejunal crypt survival and endogenous spleen colony formation. The frequency of radiationinduced apoptosis was reduced by pretreatment of Dongchongxiacao (i.p.: 50 mg/kg of body weight, at 12 and 36 hours before irradiation, p<0.01). The spontaneous levels of apoptotic cells are $0.082{\pm}0.041$ in intestinal crypts and $0.231{\pm}0.084$ per hair follicle section of skin. Pretreatment of Dongchongxiacao was associated with decreases of 26.86% in intestinal crypt and 66.36% in hair follicle decrease in the number of cells with nuclei positively stained for apoptosis compared with the irradiation control group. We demonstrated for the first time that Dongchongxiacao administration could reduce the extent of apoptosis produced by radiation in the hair follicle. The results presented herein that Dongchongxiacao given before irradiation is capable of reducing the severity of cell loss as a result of apoptosis.
8개 연구기관의 지역적응 시험을 통해 황보잠은 기존 보급 누에품종인 금황잠보다 화용비율이 높은 강건성 품종으로 대조 품종대비 5령 3일 유충 무게가 3%정도 무겁고, 전견중이 무거워 수량성이 높은 다수성 양친한성황견 품종으로 육성하게 되었다. 이 품종의 일본종계 원종 잠317는 1994년에 Y1, 8013의 교잡으로 2011년에 육성기호 Y9411으로 명명하였다. 암수 모두 무늬가 있는 형잠 품종으로 고치모양은 땅콩형이며 암수고치색깔이 다른 한성황견 품종이다. 중국종계 잠318은 1994년에 Y1, 9134 의 교잡으로 2004년에 육성기호 Y9416으로 명명하였다. 암수 모두 무늬가 없는 희잠 품종으로 고치모양은 타원형이며 암수고치색깔이 다른 한성황견 품종이다. 황보잠은 춘잠기에 적합한 품종으로 사육성적에서 화용 비율이 93.2%, 1만두 수견량이 21.3 kg, 견층중이 54.8 cg으로 대조 품종 금황잠보다 우수하였으며, 또한 실켜기 성적에서 해서율, 생사량이 80%, 4.65kg로 대조 78%, 4.05 kg보다 우수하였다. DNJ(1-Deoxynojirimycin)함량은 황보잠이 대조 금황잠보다 낮았고, 누에 동충하초 생산성에서 감염율은 대조보다 3,9%로 높았고 생체중은 개당 1.32 g으로 대조 1.19 g 보다 무거웠다.
본 연구에서는 버섯추출물 (42개)의 in vitro 항알레르기 효능탐색을 위해 랫드비만세포 (RBL-2H3 cell)에서 면역글로불린 (IgE)가 매개한 탈과립에 대한 저해 효과를 실험하였다. 이를 위해 anti-DNP IgE 및 DNP-HSA에 의해 알레르기반응이 유발된 랫드비만세포에서 버섯 추출물의 IL-4과 ${\beta}$-hexosaminidase 분비량에 대한 저해활성과 세포생존에 대한 영향이 분석되었다. 실험결과, IL-4 분비에 대해서는 팽이버섯 물추출물 등 5개의 버섯 추출물이 20% 이상의 우수한 저해효과를 나타내었으며, ${\beta}$-hexosaminidase 분비에 대해서는 영지버섯의 물추출물 등 8개의 버섯 추출물이 20% 이상의 비교적 우수한 저해활성을 나타내었다. 세포증식에 대해서는 잎새버섯의 물추출물등 대부분의 버섯 추출물이 우수한 세포증식효과를 나타내었다. 팽이버섯의 물추출물과 상황버섯의 물추출물은 ${\beta}$-hexosaminidase 및 IL-4 분비에 대해 모두 비교적 우수한 저해효과를 나타내었다. 추가로 2, 10, 50 ug/ml에서 실험된 영지버섯, 편각영지버섯, 눈꽃동충하초, 상황버섯 그리고 느타리버섯의 물추출물들은 ${\beta}$-hexosaminidase의 분비량을 농도-의존적으로 감소시켰다. 이상의 결과를 살펴볼때, 이들 in vitro 항알레르기 효과를 나타낸 버섯 추출물들은 추가실험을 통해 항알레르기 소재로의 활용성 검토가 필요하다고 사료되었다.
본 연구는 동충하초(Cordyces militaris) 유래의 기능성 물질인 코디세핀의 면역활성을 검증하기 위하여 C57BL6 마우스 복강 대식세포를 이용하여 코디세핀이 대식세포의 활성화에 미치는 영향에 대하여 시험하였다. 그 결과 LPS에 의해 유도된 마우스 복강세포는 코디세핀의 작용에 의해 IL-$1{\beta}$, IL-12, TNF-${\alpha}$의 염증성 사이토카인의 생성이 증대되어 초기 염증매개 반응을 유도하여 선천면역반응의 활성화와 그리고 면역작용에 있어 후기 적응면역의 전환으로의 T 림프구의 활성화가 예상된다. 또한 IL-6의 생성증대로 활성화된 T 림프구에 의해 B 림프구의 항체생성반응을 매개하는 면역반응도 상승할 것으로 사료된다. 그리고 대식세포에 의한 염증반응에서 염증매개인자인 NO와 $H_2O_2$의 생성을 증대시킴에 따라 대식세포의 독성작용을 활성화시켜 염증반응을 효과적으로 유도할 것으로 보이며, 또한 $H_2O_2$의 후기 생성을 저해하였는데 이는 염증반응에 유도될 수 있는 세포의 손상으로부터 세포를 보호할 수 있을 것으로 사료된다. 따라서 코디세핀은 외부인자로부터 염증매개성 면역반응의 증강작용을 나타내는 것으로 사료된다.
영지버섯과 기타 약용버섯류를 에탄올 용매로 추출하여 농축한 뒤, $100{\mu}g/ml$의 농도로 처리하여 아질산염 소거능을 실험한 결과 양성대조구인 Ascorbic acid는 25%의 소거능을 보이는데 반해 영지버섯 중 ASI 7080은 40%이상 소거하는 것으로 나타났으며, 그 다음으로는 상황버섯이 37%를 보였다. ASI 7002도 양성대조구보다 높게 나타났고, 그 이외의 다른 실험구는 양성대조구인 Ascorbic acid보다 낮은 아질산염 소거능을 보였다. NO assay 실험을 한 결과, 양성대조구로 쓰인 Ascorbic acid는 항염증 효능이 55%인데 반해 ASI 7002는 78.5%로 가장 높은 항염증 효능을 보였으며, 그 다음으로 ASI 7063이 67.5%를 보였다. 기타 약용버섯류인 동충하초는 71.2%로 가장 높게 나타났으며, 노루궁뎅이 버섯은 59.7%의 소거능을 보였다. 영지버섯 ASI 7002를 에탄올 용매로 추출하여 농축한 뒤, 농도별(10, 50, $100{\mu}g/ml$)로 처리하고 LPS $10{\mu}g/ml$ 처리한 RAW 264.7 cell 에서 RNA를 추출하여 cDNA를 합성한 후 Real-time PCR kit를 이용하여 염증 관련 유전자인 iNOS와 COX-2와 TNF-a의 primer를 Table 1과 같이 제작하였고, iNOS와 COX-2와 TNF-a의 발현정도를 본 결과 세 유전자 모두 농도 의존적으로 발현이 억제되는 것을 확인할 수 있었다.
눈꽃 동총하초의 인공재배를 위한 최적배양조건을 구명하기 위해 본 시험을 수행하였으며 그 결과 colony는 직경 32 mm/14 days로 생장하였으며 분생포자는 불규칙한 장타원형으로 평균 4.07${\times}$1.56 ${\mu}$m 크기이며 분생자병은 투명다발의 분자형으로 발생하였다. 자실체는 지상부에서 30~50 mm로 다발형태로 발생하며 평균 55개의 분지를 형성한다. 종균배양 액체배지 선발결과 PD배지가 건중량 3.15${\pm}$0.16 mg/50 m/로 균사생장에 가장 효과가 우수하였다. 분생포자 생산 최적 환경조건은 산도 pH 5.0 온도는 24$^{\circ}C$에서 20$^{\circ}C$로 변온을 가한 경우 4.30${\pm}$0.35${\times}$10$^8$ conidia/m/로 기타 처리구에 비해 포자형성율이 가장 우수하였다.
This study was performed to investigate the effects of dried powders and water extracts of Paecilomyces tenuipes(P. tenuipes) and Cordyceps militaris(C. militaris) on lipid metabolism, lipid peroxidation and antioxidative capacity and immune status in rats. Thirty-five male Sprague-Dawley rats weighting 195$\pm$21g were grouped into five according to body weight. Ratw were raised for four weeks with diet containing either 4%, 2%(w/w) of dried P. tenuipes powders(TP-4, TP-2) or water extracts from equal amounts of each 4% P. tenuipes and C. militaris powder(TE-4, ME-4). Food intake, weight gain of all groups were not significantly different from those of control group. Lipid metabolism in general was not significantly different among all the groups. However both dried P. tenuipes powder lowered plasma cholesterol level slightly, water extract groups showed tendency of higher plasma HDL-cholesterol and lower liver cholesterol levels than control. Plasma and liver thiobarbituric acid reactive substance(TBARS) concentrations of all the experimental groups were lower than control group. Red blood cell(RBC) and liver superoxide dismutase(SOD) activities were not generally different among all groups. Liver xanthine oxidase(XOD) activities of all groups were tended to be lower than control group. Proliferation of aplenocytes induced by mitogens, concanavalin A and lipopolysaccharide, were increased in TP-2 group. The TP-4 group showed increased CD8 T cells and MHC class II expression without changes in CD4 T cells, B cells and G/M ratio, suggesting activated cytotoxic T cell activity in vivo. Increase of G/M ratio but not of MHC class II in TP-2 group indicated the possible acute inflammatory reaction by the ingested substances in gastrointestinal tract. ME-4 group showed enhanced cellular immunity without vigorous changes of immune parameters in brief periods. In conclusion, both P. tenuipes and C. militaris stimulated antioxidant capacity and immune status in rats. Among groups, water extract of C. militaris was most effective in both capacities, though dried powder of P. tenuipes at 2% dietary level was more effective in antioxidant activity, as various results by different strains were observed.(Korean J Nutrition 34(3) : 271~284, 2001)
Objectives : It has been reported that Cordyceps militaris Mycelia(CMM) has an effect on deficiency allergic asthma(虛喘) clinically. The aim of this study was to determine an appropriate oriental treatment and the doses of CMM to treat asthma. Methods : In order to study the effect of herbal acupuncture solution of the CMM on allergic asthma, the mouse were pretreated by CMM herbal acupuncture at BL13, LU4 before antigen sensitization. 2 days later Mice were actively sensitized with a subcutaneous injection of ovalbumin(OA) and 13 days later they were provoked with OA aerosols. IL-4, lymphocyte, macrophage in bronchoalveolar lavage fluid(BALF), IgE in serum, WBC, RBC, HGB in blood, and in vitro isometric contractile responses of the isolated tracheal smooth muscle(TSM) to acetylcholine$(ACh,\;0.1-1000\;{\mu}M)$, KCl were measured. Results : Contractile responses of TSM to ACh were significantly increased in CMM herbal acupuncture 1 group $(Ach\;1000\;{\mu}M)$, CMM herbal acupuncture 2 group $(ACh\;1,\;10\;{\mu}M)$, CMM herbal acupuncture 3 group $(Ach\;0.3,\;1,\;30,\;300\;{\mu}M)$. The sensitivity of TSM to ACh was significantly decreased in CMM herbal acupuncture 3 group. The maximal contractile response of TSM to ACh was significantly decreased in CMM herbal acupuncture 1, 3 group. The maximal contractile response of TSM to KCl was significantly decreased in CMM herbal acupuncture 1, 2, 3 group. The counts of lymphocytes in BALF was significantly increased in CMM herbal acupuncture 3 group. The counts of macrophages in BALF was significantly decreased in CMM herbal acupuncture 3 group. Interleukin-4 level in BALF was significantly increased in CMM herbal acupuncture 1,3 group. and it was increased in CMM herbal acupuncture 2 group, but there was no significance. Serum IgE level was significantly decreased in CMM herbal acupuncture 1, 2, 3 group. The counts of WBC in blood was significantly increased in CMM herbal acupuncture 1, 3 group Conclusion : Based on the above results it is assumed that CMM herbal acupuncture at BL13, LU4 can help the treatment of deficiency allergic Asthm.
Cordycepin은 동충하초로부터 분리한 생리활성 물질로써 항암활성을 가진다고 보고되어 있다. 하지만 그 정확한 항암 기전은 아직 확실하게 밝혀져 있지 않다. 이에 인간 전립선 암 세포주인 PC-3 세포를 이용하여 apoptosis와 그에 관련한 경로를 조사함으로써 cordycepin의 항암효과를 연구하였다. MTT assay를 통해 세포독성을 알아보았고 Annexin-V/PI 염색과 $Ca^{2+}$ 농도, ROS의 생성, MMP의 변화를 관찰하여 apoptosis 경로를 확인하였다. 뿐만 아니라 Western blot analysis를 이용하여 apoptosis와 관련된 단백질의 발현 정도를 확인하였다. 본 연구의 결과에서 cordycepin은 apoptosis 관련 단백질의 발현을 조절함으로써 apoptosis와 관련이 있음을 확인할 수 있었고, 미토콘드리아 관련 apoptosis 경로를 확인한 결과, ROS의 생성, $Ca^{2+}$의 증가 그리고 미토콘드리아 막 전위의 붕괴를 통해 apoptosis 기전이 유도됨을 알 수 있었다. 이상의 결과로부터 cordycepin은 PC-3 세포에 대하여 ROS와 $Ca^{2+}$의 농도 증가를 통해 MMP를 변화시켜 미토콘드리아 관련 apoptosis 기전을 거쳐 caspase의 활성을 증가시킴으로써 apoptosis를 유도함을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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