총 15두의 초유를 섭취하지 않은 신생자견을 대상으로 난황항체를 경구투여한 후 개 파보바이러스를 경구 접종하여 실험감염을 유발시켜 난황항체의 수동 면역에 의한 예방효과를 알아보고자 한다. 항체역가는 면역화된 산란계로부터 분리한 난황항체를 투여한 자견이 비면역 난황항체를 투여한 자견에 비해 높았다. 개 파보바이러스 접종 직전의 항체역가는 대조군의 경우 1:40에서 1:80, 실험군의 경우는 1:320에서 1:1280이었다. 모든 대조군의 자견들은 바이러스 접종후 4일에 임상증상을 나타내었고 총 7두중 6두가 폐사된 반면 실험군 자견은 2두만이 증상을 나타내었고 폐사 자견은 없었다(p<0.01). 개 파보바이러스를 경구 접종한 후 전체 자견의 혈구응집억제반응역가는 접종후 6일까지 감소하는 경향을 보였다. 접종후 5일의 분변내 혈구 응집반응역가는 실험군 자견의 경우 < 2에서 64였으며 대조자견은 216에서 2048로 높았다.
This experiment was carried out to develope the production of specific yolk antibody from laying hens immunized with antigens from Salmonella enteritidis. Antigenic protein isolated from the flagella of Salmonella enteritidis, determined by SDS-PAGE, was pure and has a molecular mass of approximately 54.6 kDa. It was observed that the antibody titers both in egg yolk and serum were performed at 2 weeks after immunization with flagella antigen to the laying hen. And the level was increased gradually to 6 weeks after immunization. At the time of 6 weeks, the antibody titer of yolk showed higher than that of serum. According to the results of specificity test(ELISA), the yolk antibody did not react with different bacterial strains(S. choleraesuis, ETEC Kl2:K99, K88,987P), but reacted only with S. enteritidis strain. The contents of immunoglobulin(IgY) in an egg yolk was 106mg approximately. By the isolation procedure of IgY from the egg yolk, 88.3 percent of IgY content was recovered in this study.
Effects of anti-Helicobacter pylori IgY powder on H. pylori infection were evaluated 3 and 7 weeks after powder feeding by urease, PCR, and histological tests, and specific IgG assay of murine gastric tissue using mouse model. To produce anti-H. pylori IgY powder, laying hens were immunized with H. pylori prior to egg yolk harvest. C57BL/6 mice showing high response to H. pylori were infected with H. pylori and fed with the anti-H. pylori IgY powder. In urease and PCR tests, urease activity and gene count of anti-H. pylori IgY powder-fed group significantly decreased in comparison with control. Histological results indicated anti-H. pylori IgY powder effectively protected mice from H. pylori.
Staphylococcal enterotoxin B (SEB), which is a bacterial superantigen produced by Staphylococcus aureus, is associated with serious diseases, including food poisoning and atopic dermatitis. This study was performed to produce about 30 kDa of recombinant SEB protein and to immunize in chickens to acquire the specific egg yolk antibody (IgY) against the recombinant SEB. Chickens were immunized with the recombinant SEB intramuscularly in the breast muscle by injection 3 times at intervals of two weeks. Serum- and egg yolk-antibody titers of hens against SEB were highest at 4 weeks after first immunization. In western blot, anti-recombinant SEB IgY was reacted immunospecifically against the recombinant SEB and commercialized SEB. These results suggested that the recombinant SEB antigen could be used as an immunogen to elicit antibody (IgY) against SEB and the anti-recombinant SEB IgY could neutralized staphylococcal enterotoxin B effectively.
This study was performed to produce specific egg yolk antibodies against bovine rotavirus (BRV) and bovine coronavirus (BCV) that are major pathogens causing diarrhea in calves. Chickens were immunized with BRV and BCV intramuscularly in the breast muscle by injection 5 times at two weeks interval. At 6 weeks after the first immunization of BRV or BCV, cross reactivity of each serum derived from BRV- or BCV-immunized hens was tested. Each serum antibody against BRV or BCV was reacted with only specific BRV or BCV antigens. Serum and egg yolk-antibody titers of hens against BRV or BCVwere highest at 8~12 weeks after first immunization. Specific serum and egg yolk-antibody titers against BRV were about 104,000 and 107,000, respectively, and those against BCV were about 145,000 and 155,000, respectively. Hemagglutination inhibition titers in the immunized egg yolk antibodies against BRV and BCV were 5,120 and 1,280, respectively, and were ${\geq}8$ times higher than that in non-immunized control. These results suggested that the immunized egg yolk antibodies could effectively neutralize BRV and BCV.
Egg yolk antibodies(IgY) from laying hens immunized with antigens from Salmonella choleraesuis, Salmonella typhimurium and Salmonella dublin were produced. The Antigenic proteins isolated from those flagella of Salmonella sp., determined by SDS-PAGE, were pure and had a molecular mass of approximately 53.4, 51 and 54.6 kDa, respectively. The IgY titers were found at two weeks after first immunization and increased gradually to maximum of 330,000 300,000 and 440,000 respectively. According to the results of specificity test by ELISA, the IgY raised against Salmonella sp. were found highly specific activity levels. Concentration of Salmonella sp. incubated with anti-Salmonella sp. IgY were drastically reduced to the levels of 2.8∼4.0 log CFU/ml. The contents of IgY in an egg yolk was approximately 31∼33 mg/ml.
산란계에 불활화 개 파보바이러스 백신을 근육내로 1주 간격으로 4회 접종하여 면역화시키고 최종 접종 2주후에 채란하여 $4^{\circ}C$에 보관하며 사용하였다. 난황항체는 5% HPMCP를 이용하여 분리하였고 0.5% HPMCP 용액은 lipid 침전에 매우 효과적이었으며 희석배수 10배에서 투명한 상층액을 나타내었다. 1차분리한 상층액의 단백질 농도는 2.5mg/ml이었고 최종 단백질 용액의 경우는 26.53mg/ml이었다. SDS-PAGE 전기영동상에서 분자량 60~70 KD 및 30~40 KD의 2 band가 나타났으며 non-reducing 전기영동에서는 닭 혈청 IgG와 같은 120~160 KD의 분자량을 보인 band가 각각의 분리용액에서 나타났다. 난황 항체의 개 파보바이러스에 대한 혈구응집억제반응 항체역가는 혈청의 역가에 비해 1주의 차이를 주며 증가했으며 난황 항체는 1:640에서 1:2560, 혈청은 1:640에서 1:5120을 나타내었다.
Fowl adenovirus (FAV) is an important cause of several diseases, which result in considerable economic losses to the poultry farm. An outer capsid protein of FAV, fiber 2 is essential for virus growth, assembly or spread. This study was performed to produce about 22 kDa of recombinant fiber 2 protein and to immunize in laying hens to acquire the specific IgY antibody against the recombinant fiber 2. Laying hens were immunized with the recombinant fiber 2 intramuscularly in the breast muscle by injection 4 times at intervals of three weeks. At 12 weeks, serum- and egg yolk-antibody titers of hens against fiber 2 were increased up to 430,000 and 414,000, respectively. The recombinant fiber 2 could be recognized be the anti-His monoclonal antibody. Anti-fiber 2-IgY antibody could recognize the fiber 2 specifically in western blot analysis. These results suggested that the recombinant fiber 2 antigen could be used as an immunogen to elicit IgY antibody against fiber 2 and the anti-fiber 2-IgY could neutralize fowl adenovirus fiber 2 effectively.
Jeon, Ik Soo;Kang, Hwan Ku;Kim, Chan Ho;Hwangbo, Jong;Park, Seong Bok
Korean Journal of Poultry Science
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v.43
no.3
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pp.143-148
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2016
This study was conducted to investigate the effect of dietary egg yolk antibody (IgY) powder supplementation on the growth performance, blood component profile, intestinal microflora, and immunoglobulin G in ducks. A total of 300 1-day-old ducks (Cherry Valley) were randomly divided into 5 groups, with 3 replicates of 20 birds. The treatment groups were the negative (NC), positive (PC), egg yolk antibody powder 0.1% (T1), egg yolk antibody powder 0.5% (T2), and egg yolk antibody powder 1.0% (T3) groups. In the growth performance of ducks during the entire experimental period, the IgY groups and positive control group (PC) showed significantly higher (P<0.05) body weights and body weight gains compared to the negative control group (NC). However, no significant differences were observed in the feed intake and feed conversion ratio. The blood component profiles showed that the IgY 0.1 and 1.0% groups decreased in total cholesterol content compared to the NC group. The aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotranferease (ALT) contents were lower in the IgY 1.0% group, but there were no significant differences. Regrading the leukocyte content after feeding IgY, the heterophil: lymphocyte ratio decreased in the IgY groups, especially in the IgY 0.1% group, which had a lower content than the other groups. However, these results showed no significant differences. The Lactobacillus count in the intestines significantly increased (P<0.05) in the IgY 0.1 and 0.5% groups, the level of IgY increased, and the Escherichia coli count decreased. However, no significant difference was observed in the total plate count. The immunoglobulin G content was lower in the IgY groups than in the NC group, and compared with the IgY groups, the IgY 0.5% had a lower content, which was not a significant difference.
Human pancreatic lipase is a digestive enzyme which is synthesized in pancreas, secreted into small intestine, and there hydrolyze the fat in food. Pancreatic lipase protein composes of catalytic domain and colipase-binding domain. In this research, the gene segments corresponding to total protein, catalytic domain, and co lipase-binding domain were cloned by PCR method, inserted into an expression vector, and then used to transform Escherichia coli BL21 (DE3). The recombinant proteins produced were purified and injected intramuscularly three times into laying hens. The egg yolk antibodies (IgY) were obtained from the egg yolks and tested for their antibody titer. Among three IgY, the IgY against colipase-binding domain showed the highest antibody titer. All three IgY had inhibitory effects on the porcine pancreatic lipase. Among them, the IgY against colipase-binding domain showed the highest inhibition effects. The fat diet with corn oil and IgY was administrated to the experimental rats and their blood compositions were examined with time course. The triglyceride concentration of treated rats was decrease meaningfully when compared with those of control rats. This suggested that the IgY against colipase-binding domain antigen inhibited pancreatic lipase in vivo.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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