Plant disease caused by root-knot nematode is a major problem in crop production. Using of chemical pesticides, one of the most efficient methods to control nematodes, have raised issues in toxicity to humans and animals and environmental pollution. In this study, to select actinomycete strains that have potential to serve as a microbial agent for control of nematodes, we investigated nematicidal activity of culture broth from 670 Streptomyces isolates. A culture filtrate of KRA15-528 isolate that was identified as S. flavogriseus on the basis of 16S rRNA sequence analysis, showed strong nematicidal activity against second stage of juveniles of Meloidogyne incognita and inhibited egg hatching; exposure to 10% of culture filtrate resulted in 71% juvenile mortality at 48 hours afters treatment and suppressed egg hatching by 54% at 9 days after treatment. When the KRA15-528 culture filtrate was partitioned with ethyl acetate and butanol, ethyl acetate layer exclusively showed strong activity; 91%, 53%, 30% of mortality at 1,000, 500, $250{\mu}g/ml$, respectively. Additionally, the culture filtrate suppressed gall formation on cucumber plant by M. incognita with no phytotoxicity. These results suggest that S. flavogriseus KRA15-528 has potential to serve as a microbial nematicide for the control of root-knot nematode disease.
Lee, Boyoung;Kim, Jae Deok;Kim, Young Sook;Ko, Young Kwan;Yon, Gyu Hwan;Kim, Chang-Jin;Koo, Suk Jin;Choi, Jung Sup
Weed & Turfgrass Science
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v.2
no.1
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pp.38-46
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2013
With increasing environmental issues from synthetic chemical herbicides, microbe-originated herbicides could be a fascinating alternative in current agriculture. We isolated Streptomyces strains that produced herbicidal active metabolite(s) against a grass weed Digitaria sanguinalis. According to the result from 16S rDNA sequence comparison with the close strains, the best isolate (Code name MS-80673) was identified as Streptomyces scopuliridis KR-001. The closest type strain was Streptomyces scopuliridis RB72 which was previously reported as a bacteriocin producer. The optimal culture condition of S. scopuliridis KR-001 was $28^{\circ}C$, pH 7.0 and culture period 4 to7 days. Both of soil and foliar application of the crude culture broth concentrate was effective on several troublesome or noxious weed species such as a Sciyos angulatus in a greenhouse and field condition. Phytotoxic symptoms of the culture broth concentrate of S. scopuliridis KR-001 by foliar application were wilting and burndown of leaves, and stems followed by discoloration and finally plant death. In crops such as rice, wheat, barley, hot pepper and tomato, growth inhibition was observed. These results suggest that the new S. scopuliridis KR-001 strain producing herbicidal metabolites may be a new bio-herbicide candidate and/or may provide a new lead molecule for a more efficient herbicide.
Kim, Jae Deok;Sin, Hoon Tak;Kim, Young Sook;Ko, Young Kwan;Cho, Nam Kyu;Hwang, Ki Hwan;Koo, Suk Jin;Choi, Jung Sup;Park, Kee Woong
Weed & Turfgrass Science
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v.4
no.4
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pp.288-294
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2015
This study was conducted to investigate efficient adjuvants to increase herbicidal efficacy of metabolites from Streptpmyces scopuliridis KR-001. Commonly used 21 adjuvants mixed with the metabolites were applied to eight weed species (six grass weeds and two broadleaved weeds). Based on the visual evaluation, two adjuvants, LE7 (Polyoxyethylene lauryl ether) and EP4C (Sodium bis (2-ethylhexyl) sulfosuccinate), were selected as most efficient adjuvants to elevate herbicidal efficacy of the metabolites. Higher efficacy in the LE7 and EP4C was obtained when overall spray volume was $2,000L\;ha^{-1}(65{\mu}g\;a.i.\;ml^{-1})$ than $1,000L\;ha^{-1}(130{\mu}g\;a.i.\;ml^{-1})$. Field study demonstrated that $1,300{\mu}g\;ml^{-1}$ of metabolites from KR-001 applied with EP4C at concentration of $2{\mu}g\;ml^{-1}$ provided a highly effective post-emergence weed control which was almost equivalent to the glufosinate-ammonium at $540g\;a.i.\;ha^{-1}$. On the basis of these results, combination and multiple application methods could be developed to enhance herbicidal efficacy of metabolites from KR-001.
Pathogenic variations of Xanthomonas campestris pv. oryzae were observed to Korean rice cultivars depending upon isolates in the same pathotype of the pathogen grouped by reactions of Japanese rice differentials. Using 201 Korean isolates of X. campestris pv oryzae 1,307 rice cultivars and promising lines were inoculated, and they were grouped into four varietal groups based on reactions. Of rice cultivars showing similar reactions to X. campestris pv. oryzae, five Korean rice cultivars Milyang 42, Hangangchalbyeo, Pungsanbyeo, Cheongcheongbyeo, and Milyang 23 were selected for classification of the pathogen into races The isolates only virulent to Milyang 23 were designated as race K1, the isolates virulent to Cheongcheongbyeo and Milyang 23 were designated as race K2, the isolates virulent to Pungsanbyeo, Cheongcheongbyeo and Milyang 23 were designated as race K3, the isolates virulent to Hangangchalbyeo, Pungsanbyeo, Cheongcheongbyeo and Milyang 23 were designated as race K4, and the isolates virulent to Milyang 42, Hangangchalbyeo, Pungsanbyeo, Cheongcheongbyeo and Milyang 23 were designated as race K5. Of 201 isolates tested, 114 isolates (56.7%) were classified as race K1, 47 isolates (23.4%) as race K2, 38 isolates (18.9%) as race K3, and 2 isolates (1.0%) as race K4. Reaction in each rice cultivar used as differentials in this test was also compared with that of rice differentials used for classification of X. campestris pv. oryzae into pathotypes in the previous work.
Lee, Ho Il;Choi, Yeon Jae;Mamuad, Lovelia;Kim, Eun Joong;Oh, Young Kyoon;Park, Keun Kyu;Lee, Sang Suk
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.34
no.4
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pp.269-276
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2014
This study was conducted to determine the quality of italian ryegrass (IRG) and whole- crop barley (WCB) silage combined with heterofermentative lactic acid bacteria (LAB) during fermentation. Six strains of LAB (L. plantarum IMAU 70164, L. acidophilus KACC 12419, L. casei KACC 12413, L. reuteri KCTC 3594, L. buchneri KACC 12416 and L. diolivorans KACC 12385) were used in this study. L. casei and L. reuteri had the highest propionic acid production and were therefore used for fermenting the forages. The forages were fermented using monoculture and co-culture of L. casei and L. reuteri for 30, 45 and 60 days of ensiling. Addition of LAB lowered the pH of the IRG silage (p<0.05). Moisture content, lactic acid and acetic acid contents were higher (p<0.05) after addition of LAB. Water soluble carbohydrate was significantly lower (p<0.05) in WCB with a co-culture containing L. casei and L. reuteri. Propionic acid production was comparatively higher after addition of LAB to WCB on days 30, 45 and 60 while butyric acid was only detected in the IRG control on day 60. Fungi was not detected within 60 days after addition of LAB in IRG and WCB. Through this experiment, improved forage preservation was achieved using a co-culture containing L. casei and L. reuteri. WCB silage had higher propionic acid concentration and thus, it was a better forage for ensiling using co-culture of L. casei and L. reuteri.
Han, Joon-Hee;Park, Gi-Chang;Kim, Joon-Oh;Kim, Kyoung Su
Research in Plant Disease
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v.21
no.4
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pp.280-289
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2015
Maize (Zea mays L.) is an economically important crop in worldwide. While the consumption of the maize is steadily increasing, the yield is decreasing due to continuous mono-cultivation and infection of soil-borne fungal pathogens such as Fusarium species. Recently, stalk rot disease in maize, caused by F. subglutinans and F. temperatum has been reported in Korea. In this study, we isolated bacterial isolates in rhizosphere soil of maize and subsequently tested for antagonistic activities against F. subglutinans and F. temperatum. A total of 1,357 bacterial strains were isolated from rhizosphere. Among them three bacterial isolates (GC02, GC07, GC08) were selected, based on antagonistic effects against Fusarium species. The isolates GC02 and GC07 were most efficient in inhibiting the mycelium growth of the pathogens. The three isolates GC02, GC07 and GC08 were identified as Bacillus methylotrophicus, B. amyloliquefaciens and B. thuringiensis using 16S rRNA sequence analysis, respectively. GC02 and GC07 bacterial suspensions were able to suppress over 80% conidial germination of the pathogens. GC02, GC07 and GC08 were capable of producing large quantities of protease enzymes, whereas the isolates GC07 and GC08 produced cellulase enzymes. The isolates GC02 and GC07 were more efficient in phosphate solubilization and siderophore production than GC08. Analysis of disease suppression revealed that GC07 was most effective in suppressing the disease development of stalk rot. It was also found that B. methylotrophicus GC02 and B. amyloliquefaciens GC07 have an ability to inhibit the growth of other plant pathogenic fungi. This study indicated B. methylotrophicus GC02 and B. amyloliquefaciens GC07 has potential for being used for the development of a biological control agent.
Among the strains isolated form the various sources, the strain AC-12 producing a powerful pectinase was selected by the extensive screening test. The selected strain was indentified and its toxicity investigated. The conditions of the pectinase production, the characteristics of the purified enzyme and the clarification effect on the apple juice were studied. 1. The selected strain AC-12 was identified by the classification method of paper and fennel and named as Aspergillus sp. AC-12. 2. As a result of the breeding test of the white mouse, no toxicity was found from this enzyme. 3. The yield of pectinase in the medium of defatted rice bran was much better than that in the medium of wheat bran. 4. The optimum conditions for the culture of the strain in the medium of defatted rice bran were that the cultural time was 72hrs, the amount of water to be added about 80%, temperature $30{\sim}35^{\circ}C$ and pH $3.0{\sim}5.0$. 5. The yield of pectinase was slightly increased by the addition of pectin to the medium of defatted rice bran and by the addition of pectin, $NaNO_3$ and $K_2HPO_4$ to the medium of wheat bran, respectively. 6. The optimum conditions for the enzyme activity were pH $3.0{\sim}4.0$ and temperature $40{\sim}50^{\circ}C$. The enzyme was stable below $40^{\circ}C$ and pH $2.0{\sim}8.0$, respectively. But above $50^{\circ}C,$ this enzyme was abruptly inactivated. The activity was slightly increased by the addition of $MnSO_4\;and\;CuSO_4.$ 7. It was regarded that the opimum temperature for the clarification of the apple juice was $40{\sim}50^{\circ}C$, the optimum pH 3.0 and the optimun concentration of the enzyme 0.1%, and the apple juice was almost clarified by the reaction at $45^{\circ}C$ for 60 minutes.
Kim, Yong-Ki;Lee, Seong-Don;Ryu, Jae-Gee;Ryu, Jae-Dang
Research in Plant Disease
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v.9
no.4
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pp.229-236
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2003
The 1080 epiphytic bacteria obtained from 370 samples of pome and stone fruits including apple, pear, peach, grape, apricot and Chinese quince were screened for antagonistic activity against postharvest pathogens, Penicillium expansum, Alternaria alternata and Botrytis cinerea. Among tested antagonistic bacteria, eight bacterial isolates inhibited mycelial growth of the postharvest pathogens and were identified as Bacillus amyloliquefaciens (three strains), B. megaterium, B. subtilis var. gladioli, B. licheniformis, B. pumilus and Serratia marcescens based on biochemical characteristics and utility of carbon and nitrogen compounds (Biolog system). Eight carbohydrates were evaluated for their effect on mycelial growth and germination of the postharvest pathogen, P. expansum to select nutrients for enhancing bio-control efficacy. The growth of four selected antagonists, B. amyloliquefaciens P43-2, B. amyloliquefaciens A71-2, B. licheniformis P94-1, and S. marcescens P76-9 were also tested. As a result, 1% glucose (w/v) strongly stimulated growth of the antagonists, suppressed mycelial growth of the postharvest pathogen, and had a little comparatively stimulatory effect on germination of the the postharvest pathogen. It was confirmed that the addition of 1% glucose (w/v) greatly enhanced biocontrol effect of B. amyloliquefaciens P43-2, B. licheniformis P94-1, and S. marcescens P76-9. Application of B. amyloliquefaciens P43-2, B. licheniformis P94-1, and S. marcescens P76-9 with the addition of 1% glucose (w/v) increased the control efficacy up to 48%, 46%, 14% compared with those of the antagonists without glucose, respectively. When the antagonists were applied to control postharvest disease caused by P. expansum in apple wounds, the population of B. amyloliquefaciens P43-2 and B. licheniformis P94-1 increased until 4 days after inoculation (DAI) of the antagonists and then decreased from 10 DAI. Meanwhile the population of S. marcescens P76-9 decreased at early stage (4 DAI), but increased from 7 DAI, and finally maintained constantly until 10 DAI in apple wounds.
Park, Myung-Soo;Jeong, Bo-Ram;Jang, Kyoung-Soo;Choi, Yong-Ho;Kim, Jin-Cheol;Choi, Gyung-Ja
Horticultural Science & Technology
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v.30
no.4
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pp.426-431
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2012
This study was conducted to establish an efficient screening method for resistant tomato to Fusarium wilt caused by Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (FOL). The resistance degrees of the six commercial cultivars of tomato to the pathogen were evaluated by dipping roots of the seedlings in spore suspension of five FOL isolates. On the basis of the results, two cultivars (Dotaerangmaster, resistant cultivar to FOL race 1; Supersunload, resistant cultivar to FOL race 2) and two isolates (KACC40043, FOL race 2; TF104, FOL race 3) were selected for system establishment. The disease development of the FOL isolates on the cultivars according to several conditions including root wounding, incubation temperature, inoculum concentration and dipping period of roots in spore suspension was investigated. The resistance of each cultivar to the disease was a race-specific response and hardly affected by the tested conditions except for incubation temperature of $20^{\circ}C$. The optimum temperature for disease development caused by FOL was 25 to $30^{\circ}C$. On the basis of the results, we suggest that an efficient screening method for resistant tomato cultivars to Fusarium wilt is to dip the non-cut roots of tomato seedlings at two-leaf stage in spore suspension of $1{\times}10^7\;conidia{\cdot}mL^{-1}$ for 0.5 hours and transplant the seedling to plastic pot with horticulture nursery media, and then to cultivate the plants in a growth room at $25^{\circ}C$ for 3 weeks with 12 hours light a day.
Violacein has received much attention due to its various important biological activities, including broad-spectrum antibacterial and antifungal activity, anti-malarial, anti-tumoral, anti-oxidant, and anti-diarrheal activities. EP15224 strain isolated from forest soils in Korea was found to be a new species belonged to the genus Massilia based on its 16S ribosomal DNA sequences. The 16S ribosomal DNA of strain EP15224 displayed 97% homology with Massilia sp. BS-1, the nearest violacein-producing bacterium. Strain EP15224 produced bluish-purple pigment well in a synthetic MM2 medium containing glucose, $(NH_4)_2SO_4$, $Na_2HPO_4{\cdot}7H_2O$, $KH_2PO_4$, $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, and 1 mM $\small{L}$-tryptophan. The chemical analysis of the pigment by LC/MS/MS showed that it is violacein with molecular weight of 343.34. This is the second report on the production of violacein by a Massilia species. In this study, the optimal culture conditions for violacein production were established under which 280 mg/l crude violacein was produced : glucose 2 g/l, $(NH_4)_2SO_4$ 1 g/l, $Na_2HPO_4{\cdot}7H_2O$ 2 g/l, $KH_2PO_4$ 1 g/l, $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ 0.1 g/l, L-tryptophan 0.24 g/l, 25 ml medium in a 250 ml flask, with an inoculumn size of 10% (v/v), 72 h of cultivation with 250 rpm at $25^{\circ}C$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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