1) In order to obtain a microbial strain having a strong yeast cell wall lytic activity, about 156 isolates capable of forming clear zones on baker's yeast-peptone-bouillon agar plate were obtained from soil, mud and water samples and a strain K-42 with the highest lytic activity was identified as Bacillus circulans. 2) Effect of carbon sources on the lytic enzyme production by the K-42 strain was in the decreasing order of maltose>glucan>xylose>control in 2-day culture and of lactose>galactose>glucan>control in 3-day culture. Effect of inorganic nitrogen sources was in the decreasing order of ammonium acetate>sodium nitrate>control in 2-day culture and of ammonium chloride>ammonium oxalate>control in 3-day culture, whereas organic nitrogen sources except milk casein showed an increase in 2-day culture and a decrease in 3-day culture. Synergistic effect of carbon sources and nitrogen sources was not observed. 3) The enzyme production by the K-42 strain was greatly affected by pH change of the culture medium, thus a high lytic activity could be maintained by keeping the pH range of $7{\sim}8$ and adding carbon or nitrogen sources. 4) Optimum conditions for the lytic activity of the K-42 strain were obtained at $pH\;7{\sim}8$ and $60^{\circ}C$ and the extent of hydrolysis toward heated yeast cell wall was 65%.
Proteases catalyze hydrolytic cleavage of a peptide bond between amino acids and occupy pivotal positions in application in physiological and commercial fields. During the screening for novel bacteria producing extracellular protease, two bacterial strains, WD12 and WD32, were isolated from rotten trees and they made clear zone on LB plates supplemented with 1% skim milk. The similarities of 16S rRNA gene sequence of either WD12 or WD32 to GenBank database showed the highest to Pseuoxanthomonas mexicana as 97.8 and 99.8%, respectively. Phylogenetic analysis showed that both isolated was located within the cluster comprising P. mexicana and P. japonesis. WD12 and WD32 were catalase- and oxidase-positive, Gram-negative rod strains. In case of WD12, it could assimilate malate, but could not assimilate D-mannose, which were different characteristics from P. mexicana. Both Pseuoxanthomonas sp. WD12 and WD32 optimally produced extracellular protease at $35-37^{\circ}C$, and maximal activity showed as 656 unit/ml and 267 unit/ml, respectively.
In, Man-Jin;Kim, Hye-Min;Jin, Hea-Jin;Kim, Dong-Chung;Oh, Nam-Soon;Chae, Hee-Jeong
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.53
no.1
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pp.51-55
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2010
A lactic acid bacterial strain showing fast growth and high acid production in Korean pear puree was isolated from Kimchi. This strain was analyzed by API 50 CHL kit and 16S rRNA sequencing analysis and identified as Leuconostoc (Ln.) mesenteroides KACC 91495P. Korean pear puree was fermented using Ln. mesenteroides KACC 91495P strain at $30^{\circ}C$ for 18 h. The changes of pH, titratable acidity and viable cell number during fermentation were investigated. The pH and titratable acidity were reached to pH 3.86 and 1.09% after 18 h fermentation, respectively. The viable cell population of Ln. mesenteroides KACC 91495P was rapidly increased to $2.0{\times}10^9\;CFU/g$ during the 9 h of cultivation. The contents of lactic acid, acetic acid and malic acid were determined to be 0.213, 0.259, and 0.217% after 18 h fermentation, respectively. The content of polyphenolic compounds, known as antioxidants, in pear puree were enhanced by Ln. mesenteroides KACC 91495P cultivation. The level of total polyphenolic compounds was increased to around 140% of initial concentration. When the fermented pear puree was kept at $4^{\circ}C$, pH, titratable acidity and number of viable cells population were nearly maintained for 13 days.
Analysis of genetic characteristics of Flammulina velutipes showed that strains have a range of 85% in genetic distribution diagram. According to this result, we divided these strains into five groups. In experiment of determinating the optimum media and condition in cultivating F. velutipes, we found the optimum temperature and pH range for hypha growth were $25^{\circ}C$ and 6.0 to 7.0, respectively. in addition, the best media for growth of that in plate was MCM (Mushroom Complete Media) which have a growth length from 68 to 83 mm. In vivo test, we observed that fast growth and good density of hyphae in mixture media of douglas fir sawdust, cotton seed meal and beet pulp (6:2:2 V/V). Also when we cultivated F. velutipes in this media, we harvested high yield of fruiting body.
Ginseng saponins (a secondary metabolite, termed ginsenosides) are the principal bioactive ingredients of ginseng, and modification of the sugar chains may markedly change the its biological activity. One of soil bacteria having $\beta$-glucosidase (to transform ginsenoside $Rb_1$) activity was isolated from soil of a ginseng field in Daejeon. 16S rRNA gene sequence analysis revealed that the isolate belonged to the genus Cellulosimicrobium, with highest sequence similarity (99.7%) to Cellulosimicrobium funkei ATCC BAA-$886^T$. The strain, Gsoil 235, could transform ginsenoside $Rb_1$ into Rd, $Rg_3$ and 3 of un-known ginsenosides by the analyses of TLC, HPLC. By investigating its deglycosylation progress, the optimal broth for, $\beta$-glucosidase was nutrient broth (In 48 hours, almost ginsenoside $Rb_1$ could be transformed into minor ginsenosides). On the contrary, the optimal broth for growth was determined as trypic soy broth (TSB).
A potential fungal lipid producer from starch, which was identified as Muror plumbeus, was isolated from natural sources and its optimum cultivation condition for lipid production was investigated. The Mucor plumbeus FRI 0007 showed the highest felt weight and lipid content which were 2.09 $\pm$ 0.24g per 50$m\ell$ of medium and 37.43% on dry weight basis respectively after 20 days incubation on the medium containing 21% of starch as a carbon source. The urea was the best nitrogen source as compared with sodium nitrate, potassium nitrate, magnesium nitrate, ammonium nitrate and ammonium acetate and its optimum concentration was 2.14g/$\ell$, showing 2.39 $\pm$ 0.07 g felt/50$m\ell$ of medium and 50.73% lipid content on dry weight basis after 25 days incubation. Besides the starch as a carbon source and urea as a nitrogen source, the Mucor plumbeus FRI 0007 utilized ZnSO$_4$, MgSO$_4$, NaH$_2$PO$_4$, $K_2$SO$_4$and FeCl$_3$as mineral sources. However, it did not require ail the above 5 minerals in group in-dispensably for its growth and lipid accumulation. The lipid and economic coefficient of Mucor plumbeus FRI 0007 grown on the medium containing 0.44g $K_2$SO$_4$or 5.00g MgSO$_4$/$\ell$solely were 14.96 and 15.37 and 31.12 and 26.10 which was higher than those on the medium containing the above 5 minerals.
In order to develop a multi-microbial biofungicide against several important plant pathogenic fungi, strains were isolated from the phtophthora blight suppressive red-pepper field soil of Gyeongsangbuk-do, Korea. Strains AY1, AY6, AB1, BB2 and F4, which had strong antagonistic ability against Phytophthota capsici and Fusarium oxysporum, were selected for their involvement with strains of biocontrol fungicide. There were no antagonism among the selected strains and were compatible for making the biofungicide. Their antagonistic mechanisms, except for strain BB2, were an antibiosis by the production of antibiotic, while BB2 produced not only an antibiotic but also cellulase as an antagonistic mechanism against blight causing P. capsici. They were identified as Halobacterium sp. AB1, Xenorhadus sp. AY1, Bacillus sp. AY6, Bacillus sp. BB2, Zymomonas sp. F4 by various cultural, biochemical test and $Biolog^{TM}$ System 4.0. The highest levels of antifungal antibiotic could be produced after 48 hrs of incubation under the optimal medium which were 0.1% galactose, 0.1% $NaNO_2$, 5 mM $Na_2{\cdot}HPO_4$ (pH 5.5). The cultured multi-microbial biofungicide showed strong biocontrol activity against bacterial wilt disease and fusarium wilt disease in cucumber and tomato fields.
A lactic acid bacterial strain showing high acid production in saccharified-rice suspension was isolated from Kimchi. This strain was analyzed by API 50 CHL kit and 16S rRNA sequencing analysis and identified as Leuconostoc mesenteroides 310-12. Saccharified-rice suspension was fermented using L. mesenteroides 310-12 strain at $30^{\circ}C$ for 15 h. The changes of pH, titratable acidity and viable cell number during fermentation were determined. The pH and titratable acidity were reached to pH 3.57 and 0.40% after 15 h fermentation, respectively. The viable cell population of L. mesenteroides 310-12 was rapidly increased to $8.9{\times}10^8$ CFU/g during the 15 h of cultivation. The contents of lactic acid and acetic acid were determined to be 0.077% and 0.065% after 15 h fermentation, respectively. The rice-based fermented beverage was manufactured by blending L. mesenteroides 310-12 fermented broth and some food additives. When this beverage was stored at $4^{\circ}C$, the viable cells population was decreased to $1.0{\times}10^7$ CFU/g and pH was nearly maintained for 25 days.
Six plasmids of B. thuringiensis serovar. kurstaki HD73 were detected, with approximate sizes of 7.4, 7.8, 8.1, 11.3, and 75 Kb, as well as a low copied plasmid of similar length to 75 Kb. Partially cured mutants from B. thuringiensis HD73 were obtained either by the treatment of the curing agent, ethidium bromide(0.02 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$) or by spontaneous curing, Acrystalliferous mutants(Cry$^-$) were identified by microscopic observation and immunoblotting with polyclonal antibody against 133 KD deltaendotoxin of HD73. Ten Cry$^-$ mutants were found to be lack of 75 Kb plasmid. These results implicated that this plasmid was associated with delta-endotoxin production, After isolating the mutants, we streaked them on potato dextrose agar, spizizen casamino acid glucose, starch agar, and nutrient agar. Only on starch agar medium did morphologies of Cry$^-$ appear translucent and light greyish. On the other hand, the mutants of B. thuringiensis isolated from Korean soil, designated KBS722, were obtained by the treatment of novobiocin (3 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$). Acrystalliferous mutants of KBS722 were less translucent than HD73 mutants' only on nutrient agar medium. Compared the plasmid profile of the mutants with delta-endotoxin production, the results seemed to indicate that the insecticidal protein gene of B. thuringiensis isolates KBS722 located on about 225 Kb plasmid DNA.
Hyun, Se Hee;Mun, Hye Yeon;Lee, Hyang Burm;Kim, Ha-Kun;Lee, Jong-Soo
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.41
no.4
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pp.383-390
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2013
Several yeasts were isolated from flowers found in Gyonggi-do Province and Jeju island in Korea. They were then identified by a comparison of their PCR-amplified D1/D2 regions of 26S rDNA, internal transcribed spacer 1 and 2 inclusive of 5.8S rDNA, using the BLAST database. A total of fifty four yeast strains were isolated from wild flowers in Gyonggi-do and the genus Pseudozyma was noted as being dominant. A total of thirty two strains were isolated from Songaksan and Seongsan-ilchulbong in Jeju island and Sporobolomyces ruberrimus was seen to be dominant. The anti-gout xanthine oxidase inhibitory activities of the culture broths and cell-free extracts from eighty six yeast strains were then determined. The cell-free extracts of Pseudozyma hubeiensis 228-S-1 exhibited the highest xanthine oxidase inhibitory activity of 19.6%. The XOD inhibitor was also maximally produced when Pseudozyma hubeiensis 228-S-1 was cultured at $30^{\circ}C$ for 36h in YEPD medium.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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