The fusants which contain starch utilizing ability and alcohol fermenting ability were developed by protoplast fusion of Saccharomyces cerevisiae KOY-1 and Saccharomyces diastaticus KCTC 1804. Sacharomyces cerevisiae KH-12 was obtained by haploid induction from Saccharomyces cerevisiae KOY-1. The auxotropic mutants of yeast were obtained by using an ethylmethane sulfonate (EMS). The frequency of protoplast formation in Saccharomyces cerevisiae KOY-1 $(Met^-)$ and Saccharomyces diastaticus KCTC 1804 $(Trp^-)$ were 90.5% and 97.7%, respectively. The frequency of fusant formation was $1.79{\times}10^{-4 }$ for the regenerated protoplast and the 1,000 fusants were obtained. Fusant FA 776 was selected as a potential yeast which contain an alcohol fermenting ability in the starch medium. The genetic stability was 4.64% for 10 passages of generation. Fusant FA 776 produced 13mg/ml of alcohol in 24% starch medium and showed 1.86-fold higher alcohol fermenting ability than Saccharomyces diastaticus KCTC 1804.
This study was carried to identify a correct species and asses genetic diversity within the same species of Trametes spp. preserved in Division of applied Microbiology The morphological and cultural characteristics of preserved strains were observed through microscope and investigated on PDA, respectively. Contaminated isolates showed different growth rates, morphology and color of hyphae. We have reconstructed the phylogenetic tree of a select group of Trametes spp. using nucleotide sequences of the internal transcribed spacer region(ITS) region. The phylogenetic tree was constructed by using the neighbor-joining method. PELF primers of 20-mer were used to assess genetic diversity of preserved isolates. Sequence analysis showed that five strains were different species and six strains were identified completely different nomenclature. According to the analysis of ITS sequences, the genus Trametes clustered into four distinct group, most of which correlated with species-groups identified by RAPD method. Seven isolates included TM 01 strain showed high similarity with Trametes versicolr, TM 07 and TM 10 high similarity with Trametes gibbosa, and TM 05 high similarity with Trametes elegans. But isolates collected in the United States was identified as T. junipericola. T. gibbosa and T. versicolor by RAPD analysis of genetic polymorphisms showed a very different band patterns and these strains showed different band patterns on areas. As the result of RAPD and ITS region sequences analysis for preserved isolates, it seems likely that 11 isolates of Trametes spp. may be need to reclassify or eliminate from preserved catalogue.
Kim, Jong-Kun;Lim, Sun-Hwa;Lee, Dae-Sung;Choi, Jae-Eul;Yun, Hae-Keun;Park, Sang-Hun;Kang, Sung-Su;Kang, Hee-Wan
Research in Plant Disease
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v.12
no.3
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pp.205-212
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2006
Agrobacterium vitis is a causal agent of crown-gall disease on grapevine. Bacterial strains were isolated from crown galls of different grapevine varieties in grapevine farms of Kyungbuk(Kimcheon), Chungbuk(Okcheon), Chungnam(Daejon, Choenan) and Kyeonggi(Suwon, Ansung) areas in Korea from 2002 to 2005. Primer sets, Phe A and VirA, which were derived from pectate lysase gene and virA gene of Ti-plasmid in A. vitis were used to detect A. vitis strains from crown galls. PheA and VirA primers amplified DNA fragments of 0.25 kb and 0.5 kb from fifty-one bacterialstrains. They formed crown galls on grapevine variety, Kyoho, or carrot disks with variable pathgenecity It was confirmed that the biochemical characteristics of 10 bacterial strains that was strong pathogene city on grapevine were mostly in agreement with type culture strains of A. vitis, showing growth in the presence of 2% NaCl, non-production of acid from melezitose and negative response in production of 3-Ketolactose.
For the isolation of a plant growth-promoting rhizobacteria, strain YK-5 was selected from approximately 400 thermostable strains isolated from special soil samples. Strain YK-5 produced an antifungal compound, and optimum carbon and nitrogen sources for the production of the antifungal compound were investigated against Aspergillus flavus as a test strain. Modified LB medium containing 1% peptone, 1% yeast extract and 5% black sugar was determined to be the optimal medium for growth and antifungal compound production. Culture broth of strain YK-5 potently inhibited growth of the phytopathogenic fungus Fusarium oxysporum KACC 40052 for 7 days. The plant growth-promotion function of strain YK-5 was tested against radish and rice in pot trials. Leaf number, plant height and root length in YK-5-treated radish markedly exceeded (> 60%) those of untreated radish. Leaf length and white rootlet development were markedly more prominent than in commercially-treated rice plants. Strain YK-5 was determined to be Bacillus subtilis YK-5 by physiological, chemotaxonomical, and phylogenetical analyses.
A series of experiments was planned for practical application of rhizobia in grass lands in Korea. This is the report for the studies mainly on the isolation and characterization of alfalfa nodule bacteria, and on the assessment of their nodulation abilities and nitrogen fixation capacities. 1. Total number of 47 strains was isolated from nodules which were taken from alfalfa grown in Daekwanyong, Cheju and other places. 2. Morphological and cultural characteristics of the strains were studied, and attempts. were also made to investigate their antigenic properties and to demonstrate lysogenic strains. The results were; i) the isolates varied in their cultural characteristics on yeast mannitol broth and agar, and in degree of congo red absorption; ii) similarities in their antigenic prorerties were found between the strains: SU 47/M-11, M-13/M-15, and M-3/M-5; iii) no lysogeny was found in the strains. 3. Plant infection test by test tube method in light room were carried out to elucidate the ability of the strains to nodulate Luna alfalfa and of the capacity of such nodules to fix atmospheric nitrogen. The isolates were grouped info non-invasive, ineffective, or effective to the legumes. Those strains which produced effective nodules, supporting similar/higher level of growth as nitrate control were: M-8, 9, 14, 20, 21, 25 and 34.
Fusarium wilt, caused by Fusarium oxysporum f. sp. niveum (Fon) is a serious disease in watermelon cultivation. Most of commercialized watermelon cultivars to Fusarium wilt are susceptible in Korea. Fon isolates were divided into four races (races 0, 1, 2, and 3), based on pathogenicity in four watermelon differentials including 'Sugar baby', 'Charleston gray', 'Calhoun gray' and 'PI-296341-FR'. We obtained 7 isolates of Fon and tested to determine race of the fungal strains. Fon KACC 40902 and Fon HA were race 0 and Fon NW1, Fon NW2, Fon CW and Fon KACC 40901 were race 1. And Fon KACC 40905 was race 2, but race 3 isolate of Fon was not founded. We also tested virulence of seven Fon isolates on three-susceptible cultivars of watermelon. The isolates showed different virulence on the cultivars. In addition, to study the resistance characteristics of watermelon to Fon, we selected three moderately or highly resistant cultivars of watermelon and occurrence of Fusarium wilt in seedlings of the cultivars by seven Fon isolates was investigated. Among them, 'Calhoun gray' is highly resistant to six Fon isolates except Fon KACC 40905. On the other two cultivars, disease severity of Fusarium wilt caused by each isolate was positively correlated with the virulence of the Fon isolates. The results suggest that resistance of the watermelon cultivars to Fon isolates is likely affected by the virulence of the pathogen.
The objective of this study was to select yogurt starter from Korean traditional fermented foods. The 2 strains (KM24, KM32) among 50 strains of isolated lactic acid bacteria selected as starter based on milk clotting ability, antimicrobial activity against various pathogens, tolerance in artificial gastric and bile juice and growth in 10 % skimmed milk. The strains were identified as Lacobacillus plantarum (KM32) and Pediococcus pentosacesus (KM24) by 16S rRNA gene sequencing. Viable cell number of yogurt fermented with mixed strains (KM24 and KM32) was 9.66 log CFU/mL after fermentation for 48 h and maintained $10^9CFU/mL$ during fermentation for 72 h at $37^{\circ}C$. The pH and titratable acidity of mixed cultured yogurt were 4.25% and 0.83% after fermentation for 48 h at $37^{\circ}C$, respectively. The physico-chemical characteristics of mixed cultured yogurt after fermentation for 48 h were $38.45{\mu}g/mL$ (polyphenol content), 48.57% (DPPH radical scavenging activity) and 465.40 cp (viscosity), respectively. The mixed cultured yogurt maintained $10^9CFU/mL$ of lactic acid bacteria during storage 10 days at $4^{\circ}C$. The viable cell number of yogurt prepared with mixed culture(KM32+KM24) maintained higher and than that of control (L. casei) during storage. These results indicated the potential use of selected strains (KM32+KM24) isolated from kimchi as a yogurt starter with strong acid tolerance and probiotics properties.
Kim, Han-Woo;Lee, Kwang-Youll;Baek, Jung-Woo;Kim, Hyun-Ju;Park, Jong-Young;Lee, Jin-Woo;Jung, Soon-Je;Moon, Byung-Ju
Research in Plant Disease
/
v.10
no.4
/
pp.331-336
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2004
The fungus genus Sclerotinia contains a number of important plant pathogens. Vegetable growers in our country are probably most familiar with Sclerotinia sclerotiorum, the causes of sclerotinia rot on crisphead lettuce. S. sclerotiorum has a wide host range which can include lettuce as well as crops such as broccoli, cabbage, carrots, celery, beans, peppers, potatoes, stocks, and tomato. Some fungicides, including benomyl, are effective in some crops, but not all. So, we isolated a antagonistic bacteria that are active on sclerotinia rot caused by S. sclerotiorum and that can be used to control it. About 702 strains had been isolated from soil around plant roots in the field. Ten strains showed strong antifungal activity against S. sclerotiorum. In pot test for antagonistic activity, A-7 strain showed high control value against the pathogen when compared with others. The strain was, therefore, selected as a biocontrol candidate against sclerotinia rot and its biochemical properties and 16S rDNA sequence was analyzed. The A-7 strain was highly related to Bacillus subtilis and B. amyloliquefaciens. To confirm precise identification, we had performed gyr A gene sequences analysis. Its sequence had 96% similarity with B. amyloliquefaciens. Consequently, the isolate was identified as B. amyloliquefaciens A-7.
Rice blast is one of the most serious disease threatening stable production of rice. Breeding of resistant cultivars has been used as the most effective and useful method to controll rice blast caused by Magnaporthe oryzae. To collect rice blast isolates in fields and test their pathogenicity on new cultivars are important for establishment of new resistant cultivars breeding program of rice. Pathotypes of Korean rice blast isolates have been categorized to Korean differential race system developed in 1985. However, it is little known about genetic background of Korean differential cultivars, so that it is hard to understand for relationship between each pathogen and each host plant at genetic level. In this study, we suggested necessity of a new differential system by analyzing pathogenic responses between 24 monogenic rice lines and 200 Korean rice blast isolates. In addition, we determined the nine representative resistant genes based on the resistance responses of the monogenic lines to rice blast isolates, indexed resistant responses of the monogenic lines to ten representative rice blast isolates and selected 30 Korean representative rice blast isolates proper to Korean system. We think the newly developed differential race system can be broadly used to select resistant cultivars to rice blast in Korea.
The development of microbial inoculant was conducted using a by-product of oriental herbal medicine. The constituent of the by-product, which was high in organic matter, was 11.3% of crude protein, 5.1% of crude lipid, 49.7% of NDF (neutral detergent fiber), and 33.8% of ADF (acid detergent fiber). Microorganisms isolated from the by-product of oriental herbal medicine were 35 species. Among them, 6 bacterial species, 4 fungal species, 2 actnomycetes species, and 1 yeast species were effective in the utilization of the by-products. The 13 strains screened were tested for the plant growth-promoting effect in soybean seedling. BL-333 strain was found to increase the soybean yield by about 23% as compared with control. The strain BL-333 was identified as Paenibacillus marcerans. P. marcerans BL-333 showed high anti-fungal activities against virulent fungi, especially Fusarium sp. and Collectotrichum sp. Yields of plants which were inoculated with microbial inoculant prepared with P. marcerans BL-333 and by-product of oriental herbal medicine were found to be higher than control by $3{\sim}24%$. The yield was especially promoted in lettuce, radish, chinese cabbage and cucumber plants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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