Two types of somatic embryos were directly induced from the immature zygotic embryos of the wild prunus yedoensis in Mt. Halla after 16 weeks of culture on MS medium supplemented with 0.1mg/L $GA_3$ and 0.1mg/L BAPor 0.5mg/L $GA_3$ and 0.1mg/L BAP. One was normal single embryo with a single basal part. Normal somatic embryos germinated successfully on 1/2 MS medium. However, abnormal nulticotyledonary somatic embryos, formed shoots only on hormone free MS medium and about 80% of shoots rooted on MS medium with 0.5mg/L IBA. The mximum frequency (62.5%) of normal somatic embryos was directly obtained from the zygotic embryo 30 days after full blooming but it was decreased with further maturation.
Optimal conditions for the preservation of mushroom cultures in sterile distilled water were investigated. Mycelial disks from 12 mushroom cultures were preserved at room temperature, $5^{\circ}C,\;-20^{\circ}C$ and $-75^{\circ}C$ using sterile water and 6 cryoprotectants for 12 months. The maximal viability of mycelial disks was observed at room temperature and $5^{\circ}C$ with the value of 91.7%. At $-75^{\circ}C$, the viability was highest in polyethylene glycol (PEG) and lowest in 10% dimethyl sulfoxide (DMSO). The average mycelial growth was highest for disks preserved at $-75^{\circ}C$ in PEG. PEG was the most suitable for the preservation at $-75^{\circ}C$, although this chemical has rarely been used as a cryoprotectant in fungal culture preservation. The laccase isozyme patterns of the preserved isolate of H. ferrugineum were not changed during preservation at $5^{\circ}C$ in sterile distilled water as compared to that of slant culture.
A Bacillus strain capable of hydrolyzing locust bean gum was isolated as a producer of extracellular mannanase by way of an enrichment culture in an acidic medium from homemade soybean pastes. The isolate YB-1401 showed a biochemical identity of 61.1% with Brevibacillus laterosporus, while the nucleotide sequence of its 16S rDNA had the highest similarity with that of Bacillus amyloliquefaciens. The mannanase productivity of the Bacillus sp. YB-1401 was drastically increased by mannans. Particularly, maximum mannanase productivity was reached at approximately 265 U/ml in LB medium supplemented with konjac glucomannan (4.0%). The mannanase was the most active at $55^{\circ}C$ and pH 5.5. Mannanase activity was completely maintained after pre-incubation at pH 3.5 to 11.0 for 1 h. The predominant products resulting from the mannanase hydrolysis were mannobiose and mannotriose for LBG, guar gum or mannooligosaccharides. A small amount of mannose was also detected in the hydrolyzates.
A genome contains all genetic information of an organism. Within a specific species, unique traits appear for each individual, which can be identified by analyzing nucleotide sequences. Many Genome-Wide Associations Studies have been carried out to find genetic associations and cause of diseases from slightly different base among the individuals. It is important to identify occurrence of slight variations for polymorphisms of individuals. In this paper, we introduce an analysis and visualization tool for specific variation pattern identification of polymorphisms in nucleotide sequences and show the validity of the tool by applying it to analyzing nucleotide sequences of subcultured pOka strain of varicella-zoster virus. The tool is expected to help efficiently explore allele frequency variations and genetic factors within a species.
Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa), Escherichia coli (E. coli) and Staphylococcus aureus (S. aureus) are typical opportunistic pathogens. Moreover, these bacteria are known to possess multidrug-resistant (MDR) properties. This study investigates the antimicrobial activity of six fermented products, which have varying efficacies against P. aeruginosa, E. coli, and S. aureus. To identify novel candidate genes, differential expression analysis was performed using an annealing control primer. In the disk diffusion method, Fig vinegar (FV) and Diospyros kaki Thunb vinegar (DTV) showed the greatest increase in inhibition compared to other fermented products, whereas fermented Korean traditional nature herb (FKTNH) had no antibacterial effect. This study identified down-regulation of Escherichia coli O157:H7 ompW gene for outer membrane protein W, whereas gene for synthetic construct Lao1 gene for L-amino acid oxidase were up-regulated in E. coli treated with 5% FV. Consuming fermented vinegar helps prevent bacterial infections. Especially, FV and DTV are potentially useful alternative natural products for multidrug resistance. Furthermore, both are expected to be used as effective natural antimicrobial agents, such as disinfectants.
Transgenic lily plants have been obtained after particle bombardment, using PDS-1000/He system and scale explants of lilies, followed by PPT (D-L-phosphinothricin) selection. In this study, scales of the lily plants cv. 'red flame' were bombarded with a plasmid containing the bar gene as a selectable marker, and the AtSIZ gene as a gene of interest, showing salt tolerance and drought tolerance respectively, and both being driven by the CaMV 35S promoter. For optimization of a protocol, factors which optimized and showed a high transformation efficiency under following conditions, were considered: a bombardment pressure of 1100 psi, a target distance of 6 cm and $1.0{\mu}m$ of gold particle, and 24-h pre-culture and post-culture on MS medium containing 0.2 M sorbitol and 0.2 M mannitol as osmoticum agents. After bombardment, all the bombarded scales of lily were transferred to MS medium without selective agents, for a week. Subsequently, these bombarded scales were transferred to a selection MS medium containing 10 mg/l PPT, and incubated for a month for further selection, after which they were cultured for another 4-8 weeks with a 4-week subculture regime on the same selection medium. After transferring into hormone-free MS medium, the PPT-resistant scales with shoots were successfully rooted and regenerated into plantlets. PCR analysis revealed that the surviving putatively transformed plantlets indicated the presence of both the bar gene and the AtSIZ gene. In conclusion, when 100 scales of lily cv. Red flame are bombarded, this study produced approximately 17-18 transgenic plantlets with an optimized bombardment protocol. The protocol described here can contribute to the breeding program of lilies.
To establish a optimum culture condition in vitro for production of seedlings in Wasabia japonica, the effects of salt strength, sucrose concentration, and $NH_4/NO_3$ ratio on the shoot growth in MS medium were investigated. The full strength of MS medium was the best condition for shoot growth, and in $1/4{\sim}1/2x$ or 2x MS medium the growth was significantly suppressed. Growth of shoots was enhanced when sucrose was added in MS medium after 2 weeks of culture, and the best result was found at 3% sucrose addition. ${NH_4}^+/{NO_3}^-$ ratio of 10:50 gave the highest biomass of shoot in the liquid culture with MS medium, and increasing the ${NH_4}^+$ ratio in the medium significantly reduced the growth of shoot.
To establish the optimum conditions of in vitro plant regeneration, the leaf, rhizome, and root explants of Belamcanda chinensis were cultured on the MS medium supplemented with different concentration of 2,4-D and BA. The callus induction was more effective in the root explants than the leaf and rhizome explants, and was the best on MS medium containing 3.0 mg/L 2,4-D or 1.0 mg/L 2,4-D and 3.0 mg/L BA. The highest numbers of shoots were regenerated when callus were cultured on MS medium containing 3.0 mg/L 2,4-D for 4 weeks. However, the multiple shoots were induced on MS medium supplemented with the combination of 2,4-D and BA. The normal root formation from shoot was effective on the MS medium lacking any plant growth regulators. For acclimatization, the regenerated plantlets were cultured on MS medium without sucrose and plant growth regulators for 2 weeks, and then transferred to the pot.
This study was conducted to investigate the effect of quiescent treatment of the donor cells on the nuclear remodeling and in vitro development of fetal fibroblast cell-cloned bovine embryos. Serum starved, confluent and nonquiescent cycling fetal fibroblast cells were transferred into the enucleated oocytes. About 20∼25% of nuclear transfer embryos fused with a serum starved or confluent cell extruded a polar body, which was slightly lower than that of nontreated control (36%). About 49∼51% of nuclear transfer embryos fused with a serum starved or confluent cell had a single chromatin clump, which was slightly higher than that of nontreated control (40%). The proportion of embryos with a single chromatin clump was significantly higher (P<0.01) in nuclear transfer embryos without showing a polar body (60.5%) than with a polar body (4.7%). Development rates to the blastocyst stage were 21.7% and 20.9% when serum starved and confluent cells were transferred, which were slightly higher than that of control (14.1 %). The result of this study suggests that quiescent treatment by serum starvation or growth to confluency of donor cells could increase the number of embryos with a normal chromatin structure, which results in increased in vitro development.
Min, Sung Ran;Ko, Suk Min;Lyu, Jae Il;Park, Ji Hyun;Yi, So Young;Lee, In-Ha;Kim, Hyun Sook;Kim, Tae Il;Choi, Pil Son;Jeong, Won-Joong;Kim, Suk Weon;Kim, Jonghyun;Liu, Jang R.
Journal of Plant Biotechnology
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제42권3호
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pp.180-185
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2015
Leaf discs from 'Yeobong' and 'Maehyang' strawberry plants were used as explants for transformation. The Agrobacterium tumefaciens strain EHA105 harboring the monellin gene under the control of the CaMV 35S promoter was used in co-cultivation experiments. The frequencies of callus formation and plant regeneration from leaf explants after co-cultivation in 'Yeobong' were higher than those of 'Maehyang'. These transgenic plants showed normal growth patterns and flowering. PCR and Southern hybridization confirmed that 1 to 2 copies of the monellin gene were integrated into genome of the transgenic strawberry plants. Northern blot analysis confirm that the transcripts were expressed in transgenic strawberry plants. Although long-term subcultured transgenic strawberry plants showed a phenomenon to escape the transgene, the transformation system established in this study provides new opportunities for genetic improvement of strawberry plants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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