Axillary bud explants from 3-year-old seedlings of Forsythia saxatilis N., rare and endangered species in Korea, were cultured on Murashige and Skoog's medium. The effect of various cytokinins(BAP, kinetin, and zeatin) at the different concentration(0.2, 0.5 and 1.0mg/L) was tested. Although an apparent shoot proliferation was not observed, zeatin showed slight promotional effect on normal shoot and leaf development. Both shoots and adventive roots could be induced simultaneously when the explants were cultured on the medium with kinetin, but adventive rooting was gradually reduced according as BAP and zeatin concentrations increased. Axillary shoot growth was promoted by the etiolation treatment. Shoot proliferation has been maintained more than three years with consecutive subculture. Rooted plantlets were successfully acclimatized in the artificial soil mixture and showed normal growth after transplantation into field.
A case of disease was occurred in tiger puffer, Takifugu rubripes, reared in circulated system (water temperature was about $20^{\circ}C$) on land in Korea. Diseased fish showed a unique external sign, the cloudy skin ulcer in various sizes. We investigated the cause of disease, and isolated one pure cultured bacterium, TP01. This had 99.7% homology with Vibrio atlanticus by sequence analysis of the 16S rRNA and rpoA genes. TP01 showed some differences with other reported V. atlanticus strains in the biochemical characteristics as like Voges-Proskauer test and gelatin hydrolysis.
The possibility of strain improvement of cellulolytic fungus, Penicillium verruculosum via protoplast fusion was investigated. The cellulolytic activities of the six fusants, finally selected for their hyper-cellulolytics were 2 times of those of wild type and 1.2 to 4.4 times of those parental auxotrophs. It was confirmed that the nuclear fusion occurred in fusants by their DNA contents and nuclear staining with Giemsa. It was also found that the fusants were aneuploids, and their genetic stability was demonstrated from the subculture for four months.
Park, Jung-Suk;Park, Woo-Tae;Kim, Haeng-Hoon;Park, Sang-Un
Korean Journal of Agricultural Science
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v.37
no.3
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pp.373-376
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2010
Peppermint (Mentha piperita L.) belongs to a member of the mint family (Lamiaceae) and is widely used in food, cosmetics and medicines. This study was carried to investigate the variation of essential oil content and its composition during callus subculture of M. piperita. For callus induction from the leaf explant of peppermint, the basal medium was supplemented with various concentrations of 2, 4-D. The best callus induction rate (93%) of M. piperita. was obtained in MS medium containing 2 mg/l 2, 4-D. The induced peppermint callus maintained on Lin-Staba medium were studied during a period of 20th subcultures for the stability of essential oil production. Growth rates of peppermint callus increased during prolonged subculture. However, there was a progressive decrease of essential oil content and unstability of monoterpene productions when callus cultures were serially subcultured.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2002.11b
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pp.30-30
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2002
꿩의비름 (Sedum erythrostichum)은 매우 우수한 지피식물이며 건조에 강한 대표적 식물로 바위정원 (rock garden)을 가꾸는데 있어서 중요한 수종으로 이용되며, 유럽등지에서는 지붕에 식재하기도 하며 최근에는 빌딩옥상녹화의 대표적 수종으로 식재되고 있다. 또한 한방에서는 경천이라 불리우기도 하는데 피부상처 치유 및 미백효과가 탁월하다고 알려져 있다. 본 연구에서는 Agrobacterium을 매개로한 꿩의비름의 형질전환 시스템을 개발하고 아울러 phosphinothricin-N-acetyltransferase (PAT) 유전자를 도입하여 제초제 저항 식물을 개발하고자 수행되었다. 꿩의비름 잎을 Agrobacterium에 담근후 0.5 mg/l NAA와 2 mg/1 BA가 첨가된 MS 배지에 3일간 공동배앙 하였다. 그 후 300 mg/1 cefotaxime이 첨가된 같은 배지에 옮겨 계대하면서 Agrobacterium을 제거하였다. 약 3주후에 잎 절편으로 부터 직접적으로 부정아가 형성되기 시작 하였는데 이 시기부터 잎 절편을 25 mg/1 kanamycin이 첨가된 선발배지에 옮겨 주었다. 이 결과 배양된 잎 절편 절편 중 3.75%에서 kanamycin에 저항하는 부정아를 얻을 수 있었다. 형질전환체는 X-gluc 반응, PCR, Southern, Nothern analysis를 통하여 확인하였다. 약 94%의 형질전환 식물체는 성공적으로 토양에 옮길 수 있었으며 약 3개월후에 꽃을 피웠다. 형질전환체는 제초제인 Basta ($^{(R)}$ phosphinothricine at 200 mg/1)를 살포하여 주었을 경우 생존함을 확인 하였다.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.20
no.1
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pp.25-30
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2000
The conditions for callus formation and plant regeneration were confirmed in Italian ryegrass (Lolium mulfiorum Lam.). Among SH (Schenk and Hildebrandt), MS (Murashige and Skoog) and N6 medium (Chu) MS medium was highest degree of efficiencies respectively in callus formation and plant regeneration. In this study, we determined volume of hormones and other compounds appended in media. For callus formation, only $5\;mg/\;{\ell}$ of 2,4-D (2,4-dichlorophenoxy acetic acid) was appended in their media. For plant regeneration, we used MS medium containing $1.0\;mg/\;{\ell}$ of BA and $0.1\;mg/\;{\ell}$ of NAA.
In order to evaluate the mutagenic potentential in mammalian system for those pesticides which were proved to be mutagenic in Salmonella microsome assay system, we have studied drug-resistant mutagenesis in cultured L5178Y cells and unscheduled DNA synthesis in human lymphocytes in vitro. We have tested five pesticides: insecticides DDVP and trichlorfon, fungicide TMTD and herbicides MO and NIP. Of these pesticides, TMTD induced weak mutation to MTX-resistance in L5178Y cells in vitro and gave positive responses in DNA repair assay system. Therefore, its potential genetic risks in human beings should be re-evaluated. DDVP and trichlorfon gave negative response in L5178Y mutagenesis test system but stimulated incorporation of $^{3}H$-TdR in DNA repar assay. MO and NIP gave also negative responses both in L5178Y mutagenesis test systemand in DNA repair assay system.
The fusion between protoplasts of Ganoderma applanatum and oidia of Lyophyllum ulmarium (Hypsizigus marmoreus) was induced with polyethylene glycol and $CaCl_2$. When transferred to Ganoderma complete medium plates, fusants showed mixed morphologies both parents. During three times subcultivation the fusants were changed similar to those of L. ulmarium type. All fusants produced oidia, clamp connections and basidiocarps similar to those of L. ulmarium. Isozyme pattern of esterase of interorder fusants showed both parental and non-parental bands. Each individual fusant did not showed both parental and non-parental bands. Each individual fusant did not show any differences in mycelial growth rate, colony morphology, esterase band pattern and basidiocarp.
One of the limitation for Agrobacterium-mediated transformation via organogenesis from cotyledon explants routinely in cucumber is the production of chimeric plants. To overcome the limitation, Agrobacterium-mediated transformation system via somatic embryogenesis from hypocotyl explants of cucumber (c.v., Eunsung) on the selection medium with paromomycin as antibiotics was developed. The hypocotyl explants were inoculated with Agrobacterium tumefaciens strain EHA101 carrying binary vector pPTN290; then were subsequently cultured on the following media: co-cultivation medium for 2 days, selection medium for $5{\times}14$ days, and regeneration medium. The T-DNA of the vector (pPTN290) carried two cassettes, Ubi promoter-gus gene as reporter and 35S promoter-nptll gene conferring resistance to paromomycin as selectable agent. The confirmation of stable transformation and the efficiency of transformation was based on the resistance to paromomycin indicated by the growth of putative transgenic calli on selection medium amended with 100mg/L paromomycin, and GUS gene expression. Forty eight clones (5.2%) with GUS gene expressed of 56 callus clones with resistance to paromomycin were independently obtained from 928 explants inoculated. Of 48 clones, transgenic plants were only regenerated from 5 clones (0.5%) at low frequency. The histochemical GUS assay in the transgenic seeds ($T_1$) also revealed that the gus gene was successfully integrated and segregated into each genome of transgenic cucumber.
Background : Chlamydia pneumoniae is one of common causes in upper and lower respiratory infections. Isolating C. pneumoniae from clinical specimens is very difficult due to the characteristics of the organism. Recently, we succeeded in isolating C. pneumoniae from a Korean patient, who suffered from acute pharyngitis. This is the first isolate from a clinical specimen in Korea. Methods : We attained a nasopharyngeal swab from a 22-year-old female patient, and inoculated it on a monolayer of the Hep-2 cell line. After 8 passages, we found the inclusion bodies of C. pneumoniae by an immunofluorescence(IF) test. The species-specific monoclonal antibody IF staining and species-specific PCR were done to confirm the species of the isolate, and electron microscopy was used to characterize the morphology. Results : The isolated was confirmed to be C. pneumoniae by species-specific IF and PCR, and the strain was named LKK-1. The shape of the elementary body was round and with a narrow periplasmic space, as shown by electron microscopy, which is similar to the Japanese strain, but not the Western strain. Conclusion : We succeeded in isolating C. pneumoniae from a 22-year-old patient with acute pharyngitis, which is the first isolate in Korea. In the future, this Korean strain will be useful to the study of C. pneumoniae.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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