점봉산 참당귀는 해발 750-965 m의 교목층은 들메나무, 고로쇠나무, 신갈나무가 분포하고, 아교목층에는 당단풍, 까치박달나무가 분포하는 계곡지로 유기물이 집적되기 쉬운 다습한 지형에 자생하였다. 참당귀 군락의 토양 분석 결과 토양pH는 4.9-6.0으로 우리나라 산림토양의 평균과 매우 유사한 값을 보였으며, 토양 양분의 지표인 유기물함량, 전질소 양이온치환용량, 치환성 Ca, K, Mg, Na의 함량은 산림토양의 평균보다 비교적 높은 값을 보였다. 생장 특성으로는 9월 말에는 뿌리 생장이 평균47.9 g이나 10월 말에는 33.8 g으로 29% 감소하였으며, 유용 성분은 반대로 10월말에 decursin 3.8%, decursinol angelate 3.6%로 각각 26%, 67% 증가하였다. 참당귀 자생지 8개 집단의 생장 특성 및 유용성분 함량과 토양특성 간의 상관분석을 수행한 결과 뿌리 생장은 치환성 양이온인 K, Mg, Na과 높은 양의 상관관계를 보였고, 유용성분은 뿌리의 수분함량과 높은 음의 상관관계를 보였다.
본 연구는 Saccharomyces cerevisiae를 이용하여 발효한 참당귀 분말을 수용성 용매에 추출하여 이화학적 특성 및 생리활성을 비교 검토하였다. 당도 및 pH를 확인한 결과, NF군 $1^{\circ}Brix$에 비해 F/3군 $0.9^{\circ}Brix$로 발효가 됨에 따라 당도가 감소하는 경향을 보였다. 한편, F/3군의 pH는 NF군 및 F/0군에 비해서 높은 수치를 나타냈다. Thin-layer chromatography 실험결과, F/3군이 NF군에 비해 대부분 저분자의 당 형태로 분해된 것을 확인하였다. 총 폴리페놀 함량 및 플라보노이드 함량은 참당귀 분말 추출물에 비해 발효 참당귀 분말 추출물에서 전반적으로 함량이 증가하였다. 미네랄 중 K 및 Ca 함량은 F/3군, F/0군 및 NF군 순으로 증가하는 경향을 보였다. Decursin 및 decursinol angelate 함량은 NF군보다 F/3군에서 더 높은 함량을 나타냈다. 참당귀 및 발효 참당귀 수용성 추출물의 항산화 활성은 NF군 41.89%, F/0군 39.51%, F/3군에서 60.26%으로 활성이 증가하는 것을 확인하였다. 미백 및 항염증 효능 실험결과, 참당귀 분말 추출물에 비해 발효 참당귀 분말 추출물에서 효능이 증가하는 경향을 나타내었다. 따라서 한방 생약재 중 참당귀를 유용 미생물로 발효시켜 사용함으로써 항산화능, 생리활성물질, 미백효능 및 항염증 효과에서 긍정적인 결과를 나타내어 향후 화장품 개발을 위한 소재로써 기대할 수 있을 것으로 사료된다.
본 연구에서는 참당귀(Angelica gigas Nakai)의 핵심 유효 성분인 decursin과 decursinol angelate를 높은 수율로 추출한 초임계 이산화탄소 선택 추출물의 항염증 효능을 에탄올 추출물과 비교하여 측정하였다. 항염증 효능을 측정하기 위해 염증 매개 인자인 nitric oxide(NO), 염증성 사이토카인인 interleukin(IL)-6, IL-8 생성량을 측정하였다. NO 생성량은 lipopolysaccharide(LPS)로 염증 반응을 유도한 Raw 264.7 세포를 대상으로 Griess assay를 통해 측정하였고, IL-6 및 IL-8 생성량은 tumor necrosis factor(TNF)-α로 염증 반응을 유도한 human keratinocyte cell line(HaCaT) 세포를 대상으로 enzyme-linked immunoadsorbent assay(ELISA)를 통해 측정하였다. NO 생성량은 초임계 이산화탄소 추출물이 에탄올 추출물에 비해 뛰어나게 억제하였다. IL-6 및 IL-8 생성량 또한 에탄올 추출물은 오히려 증가시키는 반면, 초임계 이산화탄소 추출물은 6.25 ㎍/mL의 농도에서 통계적으로 유의하게 억제하였다(P<0.01). 우리는 이러한 결과를 통해 참당귀 초임계 이산화탄소 선택 추출물이 아토피 피부염을 완화시키는 항염증 코스메슈티컬 소재로써 활용 가능함을 확인하였다.
꽃 색에 따른 참당귀(Angelica gigas Nakai)의 지상부 및 지하부의 생육특성과 유용성분을 확인하여 참당귀의 신품종 육성에 대한 기초자료를 제공하고자 하였다. 재배지에서 기본종인 짙은 자주색(N79-A)을 포함한 밝은 청분홍색(62-C), 흰색(NN115-C)의 꽃 색을 발현하는 개체를 확인 및 채집하였으며, 채집한 개체의 종자를 활용해 육묘하여 실험재료로 사용하였다. 지상부의 정성적 생육특성은 기본종인 N79-A 그룹은 식물체 전체에 자주색 계열의 색을 띠는 반면 62-C 그룹과 NN115-C 그룹은 연두색 계열의 색을 띠는 것으로 확인하였다. 정량적 생육특성은 62-C 그룹이 다른 두 그룹보다 지상부와 지하부의 생육량이 낮은 결과를 나타냈으며 통계적 유의성을 확인하였다. 또한 유용성분인 nodakenin은 NN115-C 그룹이 0.88 ± 0.13%, decursinol angelate은 N79-A 그룹이 2.56 ± 0.12%로 다른 그룹보다 높게 분석되었으나 총합의 통계적 유의성은 확인되지 않았다. 이러한 결과는 주로 약재로 사용되어 저추대성와 다수 확성이 주를 이루고 있는 참당귀 품종에 관한 새로운 품종의 육성에 기초자료로 제공할 수 있을 것으로 판단된다.
본 연구에서는 데커신 및 데커시놀 안젤레이트를 이용한 최적의 로션 제조 공정을 확인하기 위하여 연구를 진행하였다. 초기 로션 제형은 3개월 동안 점도(5,208±112 cPs), 함량(99.71±1.01%) 및 pH(5.62)을 유지하는 것을 확인하였다. 제조 공정D 혼합 4의 최적 제조 공정 확인은 22+3 완전 배치 요인법을 이용하였으며, 독립변수로 혼합 온도(40-80℃)와 혼합 시간(10-30 min)으로 종속변수로써 중요품질특성인 함량, pH, 질량편차를 확인하였다. 함량 및 질량편차는 도출된 회귀방적식의 결정계수는 약 0.9였고 p-value값은 0.05보다 작아 모델적합성을 확인하였다. 로션 제조를 위한 최적의 온도조건과 혼합 시간은 61.93℃와 15.85분으로 확인되었다. 혼합4 공정에 있어 혼합 온도(60℃)와 혼합 시간(15 min)에서의 함량은 100.69%, pH는 5.57, 질량편차는 98.07%으로 예측되었고, 실제 검증에서는 각각 100.29±0.98%, 5.57±0.02, 98.27±0.89%으로 예측된 값에 대하여 유사한 결과까지 확인 할 수 있었다.
식물세포의 장기보존방법 연구를 위하여 참당귀(Angelica gigas Nakai) 현탁세포를 이용하여 동결보존을 수행하였다. 최적의 예비성장배지로는 0.7 M sucrose를 첨가하여 6일간 배양한 것이 가장 좋았으며, 동결보호제로는 1 M sucrose, 1 M glycerol, 1 M DMSO를 혼합하여 사용하였을 때 가장 좋은 결과를 나타내었다. 동결 시에는 처음 8시간 동안 deep freezer에서 천천히 냉동을 한 후 액체질소에 넣는 것이 가장 좋은 것으로 나타났다. 또한 여러 가지 삼투압 증진제를 사용한 실험을 수행한 결과 sucrose가 가장 좋은 결과를 나타내었는데 이것은 sucrose가 삼투압 증진제 역할뿐만 아니라 cell membrane을 보호하기 때문으로 사료된다.
During the screening for inhibitors of nitric oxide production in LPS-activated macrophage, RAW 264.7 cells, two coumarins were isolated from chloroform extract of the root of Polygonum cuspidatum. They were identified as decursin (1) and decursinol angelate (2) on the basis of spectroscopic methods. The $IC_{50}$ values of these compounds on NO production were $0.76\;{\mu}M$ (1) and $2.6\;{\mu}M$ (2), respectively. However, the iNOS activity was not inhibited by treatment with these compounds. Their inhibitory effect on NO production seems to result from the suppression of iNOS induction through the suppression of NF-kB activity.
The effect of cyclic-AMP on the induction of acid phosphatase activity in barley aleurone layers was examined. Tannic acid was used as a inhibitor. Decursinol and coumarin were also used as a comparison. Maxiumu promotion of the enzyme activity was obtained with 10-5M cyclic-AMP, but this promotion was lower than that of 10-5M GAS induced enzyme activity in incubation medium. The inhibition rate in the addition of tannic acid was shown 17% and 63% at a ratio to GAs (by weight) of 10 : 1, and 58% and 94% at a ratio of 100 : 1 treated with GAs, and cyclic-AMP, respectively. The most potentiation of 10-6M GAS effect was induced by the additiion of suboptimal concentration (10-6M) of cyclic-AMP. Additional GAs and cyclic-AMP were shown the recovery of the enzyme activity inhibited by tannic acid. The combination with cyclic-AMP and theophylline enhanced the enzyme activity, too. Any other nucleotides tested except cyclic-AMP didn't show the action. There were no differences in acid phosphatase isozyme patterns by polyacrylamide disc electrophoresis, in conjunction with the different additions but the size of bands showed great differences. Especially, the 3rd band and the 5th band group were remarkable.
Objectives: We took breast milk samples and analyzed them using HPLC and LC/MS/MS, to evaluate the effects of taking Saenghwa-tang during breastfeeding on breast milk. Methods: The study participants were 20 lactating women who admitted in Korean medical postpartum care center. Breast milks were collected from paticipants who have been administrated Saenghwa-tang for more than 3 days. We used HPLC and LC/MS/MS for the determinations of amygdalin, liquiritins, 6-gingerol, decursin and decursinol angelate in Saenghwa-tang. Results: 1. Participants' $Mean{\pm}S.D$ (standard deviation) of age is $31.05{\pm}1.96$, and 15 participants had normal delivery and 5 participants had cesarean delivery. 12 participants were primipara and 8 participants were multipara. $Mean{\pm}S.D$ of lactating date is $9.4{\pm}0.94$. 2. Using HPLC, we learned LOQ level peak that matches the peak retention time of standard components of Saenghwa-tang was not detected from 20 breast milk samples. 3. Using LC/MS/MS, decursin of Angelicae Gigantis Radix was detected from HMSP 02, HMSP 04, HMSP 06, HMSP 11, and the each concentrations are 16, 2, 64, 11 ppb. Liquiritin of Glycyrrhizae Radix was not detected from HMSP 13~HMSP 18. Conclusions: Data obtained by this approach shows that this method is reliable and suitable for determining the safety of taking Saenghwa-tang during breastfeeding.
Guibi-tang, a traditional herbal medicine, is used for anti-oxidant, anti-osteoporosis, hemostasis and gastroprotection. To develop an analysis method of simultaneous determination of six compounds, swertisin, decursinol, glycyrrhizin, 6-gingerol, costunolide and decursin in Guibi-tang, a high performance liquid chromatography was used with diode array detector. Six bioactive components were separated on a SHISEIDO $C_{18}$ column ($5\;{\mu}m$, 4.6 mm I.D.${\times}$250 mm) with column temperature $30^{\circ}C$. The gradient elution was composed of water with 0.1% trifluoroacetic acid (TFA) and acetonitrile. UV wavelength was set at 230 nm, 254 nm and 330 nm, respectively. Calibration curve showed good linear regression ($R^2$ > 0.9999). The limits of detection (LOD) and the limits of quantification (LOQ) ranged in 0.03 - 0.23 ${\mu}g/ml$ and 0.08 - $0.70\;{\mu}g/ml$, respectively. The RSD values of intra- and inter-day test were in the range of 0.03 ~ 0.96% and 0.01 ~ 1.46%, respectively. The evaluated results of accuracy test were varied from 92.28% ~ 105.14% with RSD < 1.60%. In conclusion, this developed simultaneous determination method was accuracy and sensitive to the quality evaluation of Guibi-tang.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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