BACKGROUND/OBJECTIVES: Sargassum horneri is an edible brown alga that grows in the subtidal zone as an annual species along the coasts of South Korea, China, and Japan. Recently, an extreme amount of S. horneri moved into the coasts of Jeju Island from the east coast of China, which made huge economic and environmental loss to the Jeju Island. Thus, utilization of this biomass becomes a big issue with the local authorities. Therefore, the present study was performed to evaluate the anti-inflammatory potential of crude polysaccharides (CPs) extracted from S. horneri China strain in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 cells. MATERIALS/METHODS: CPs were precipitated from S. horneri digests prepared by enzyme assistant extraction using four food-grade enzymes (AMG, Celluclast, Viscozyme, and Alcalase). The production levels of nitric oxide (NO) and pro-inflammatory cytokines, including tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ and interleukin (IL)-$1{\beta}$ were measured by Griess assay and enzyme-linked immunosorbent assay, respectively. The levels of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2), nuclear factor (NF)-${\kappa}B$, and mitogen-activated protein kinases (MAPKs) were measured by using western blot. The IR spectrums of the CPs were recorded using a fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR) spectrometer. RESULTS: The polysaccharides from the Celluclast enzyme digest (CCP) showed the highest inhibition of NO production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells ($IC_{50}$ value: $95.7{\mu}g/mL$). Also, CCP dose-dependently down-regulated the protein expression levels of iNOS and COX-2 as well as the production of inflammatory cytokines, including TNF-${\alpha}$ and IL-$1{\beta}$, compared to the only LPS-treated cells. In addition, CCP inhibited the activation of NF-${\kappa}B$ p50 and p65 and the phosphorylation of MAPKs, including p38 and extracellular signal-regulated kinase, in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Furthermore, FT-IR analysis showed that the FT-IR spectrum of CCP is similar to that of commercial fucoidan. CONCLUSIONS: Our results suggest that CCP has anti-inflammatory activities and is a potential candidate for the formulation of a functional food ingredient or/and drug to treat inflammatory diseases.
Objectives : Daucus carota sativa has been frequently used as food supplements in many of the Asian countries, and a nutritional medical drug in traditional medicine. This research investigated the effects of Daucus carota sativa extract (DCE) on acute phases of inflammation in Raw 264.7 cells treated with lipopolysaccharide (LPS) in terms of the inhibition of nitric oxide (NO), prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) and pro-inflammatory cytokines production. Methods : NO, $PGE_2$, tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, interleukin-$1{\beta}$ and interleukin-6 contents were assayed by ELISA, and expressions of inflammation-related proteins such as inducible NO synthase (iNOS) were determined by immunoblot analyses. Results : DCE treatment attenuated the LPS ability to increase the productions of NO and $PGE_2$ as well as the protein level of iNOS in a concentration-dependent manner. Consistently, treatment of the cells with DCE suppressed the production of TNF-${\alpha}$, interleukin-$1{\beta}$ and interleukin-6. DCE also caused decreases of inhibitor of ${\kappa}B{\alpha}$ phosphorylation induced by LPS in the cells, which means DCE inhibition of NF-${\kappa}B$ activity. Furthermore, DCE blocked LPS-induced phosphorylation of p38 and SAPK/JNK. Conclusion : This study showing here may be of help to understand the action mechanism of DCE, and provide the information for the medical use of Daucus carota sativa for the inflammatory disease.
Ra, Ho Jong;Oh, Mi Young;Kim, Hee Ju;Lee, Seung Yong;Eom, Dae Woon;Lee, Suk Kyu;Kim, Su-Nam;Chung, Kyu Sung;Jang, Hyuk Jai
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제22권2호
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pp.163-172
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2018
PRF001 is a fragmented DNA polymer extracted from the testes of salmon. The purpose of this study was to assess the anti-inflammatory effect of PRF001 in vitro as well as the protective effect of PRF001 intake against arthritis in a rat model. In vitro, cell survival and inflammatory markers after $H_2O_2$ treatment to induce cell damage were investigated in CHON-001 cells treated with different concentrations of PRF001. In vivo, osteoarthritis was induced by intra-articular injection of monosodium iodoacetate (MIA) into the knee joints of rats. After consumption of PRF001 (10, 50, or 100 mg/kg) for 4 weeks, inflammatory mediators and cytokines in articular cartilage were investigated. In vitro, the levels of inflammatory markers, $IL-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$, COX-2, iNOS, and PGE2, were significantly suppressed by PRF001 treatment. In vivo, the inflammatory mediators and cytokines, $IL-1{\beta}$, p-Erk1/2, $NF-{\kappa}B$, $TNF-{\alpha}$, COX-2, and PGE2, as well as MMP3 and MMP7, which have catabolic activity in chondrocytes, were decreased in the MIA-induced osteoarthritic rats following intake of PRF001. Histological analysis revealed that PRF001 had a protective effect on the articular cartilage. Altogether, these results demonstrated that the anti-inflammatory property of PRF001 contributes to its protective effects in osteoarthritis through deregulating $IL-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$, and subsequent signals, such as p-Erk1/2, $NF-{\kappa}B$, COX-2, PGE2, and MMPs.
We examined the anti-inflammatory effect of the peel extract of the newly bred Korean apple (Malus domestica Borkh.) cultivar Green ball. To test its possible use as anti-inflammatory functional material, Raw 264.7 macrophages were treated with pro-inflammatory lipopolysaccharide (LPS) in the presence or absence of Green ball apple peel ethanol extract (GBE). Notably, up to 500 ㎍/mL of GBE did not result in any signs of inhibition on cellular metabolic activity or cytotoxicity in Raw 264.7 macrophages. Supplementation with GBE to LPS-treated Raw 264.7 macrophage significantly suppressed various pro-inflammatory responses in a dose-dependent manner, including i) nitric oxide (NO) production, ii) accumulation of inducible NO synthase and cyclooxygenase-2, iii) phosphorylation of nuclear factor-kappa B (NF-κB) subunit p65, and iv) expression of pro-inflammatory biomarker genes, including tumor necrosis factor alpha, interleukin 1 beta, interleukin 6, monocyte chemoattractant protein-1, and prostaglandin E synthase 2.
Background: The therapeutic potential of Bee Venom Pharmacopuncture (BVP) on acute ischemic cerebral infraction was determined in mice in vivo and in vitro. Methods: Analysis of acute ischemic cerebral infraction was performed using 7 week old male ICR mice (n = 20) and microglial BV-2 cells. Bee venom ($5{\mu}g/kg$) was injected into the caudal vein of middle cerebral artery occlusion (MCAo) mice (1 hour after reperfusion, 3 hours after MCAo probe insertion), and also used to treat LPS-stimulated microglial BV-2 cells (1, 2, $5{\mu}g/mL$). Markers of inflammation were monitored. Results: NO declined statistically significantly in BVP treated MCAo mice compared to the untreated MCAo group (p < 0.05). Compared to the MCAo group, the BVP-treated MCAo group showed a decreased production volume of malondialdehyde, but an increased glutathione/oxidized glutathione ratio. Compared to the untreated MCAo group, the BVP treated MCAo group showed a statistically significant decline in TNF and $IL-1{\beta}$ levels (p < 0.05). BVP inhibited the levels of p65, p50, $p-I{\kappa}B-{\alpha}$, and levels of p-ERK1/2, p-JNK2, p-P38 declined. Conclusion: BVP is effective at dampening the inflammatory response in vivo and in vitro and may supplement rt-PA treatment.
The actin cytoskeleton plays an important role in macrophage-mediated inflammatory responses by modulating the activation of Src and subsequently inducing nuclear factor (NF)-${\kappa}B$ translocation. In spite of its critical functions, few papers have examined how the actin cytoskeleton can be regulated by the activation of toll-like receptor (TLR). Therefore, in this study, we further characterized the biological value of the actin cytoskeleton in the functional activation of macrophages using an actin cytoskeleton disruptor, cytochalasin B (Cyto B), and explored the actin cytoskeleton's involvement in morphological changes, cellular attachment, and signaling events. Cyto B strongly suppressed the TLR4-mediated mRNA expression of inflammatory genes such as cyclooxygenase (COX)-2, tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, and inducible nitric oxide (iNOS), without altering cell viability. This compound also strongly suppressed the morphological changes induced by lipopolysaccharide (LPS), a TLR4 ligand. Cyto B also remarkably suppressed NO production under non-adherent conditions but not in an adherent environment. Cyto B did not block the co-localization between surface glycoprotein myeloid differentiation protein-2 (MD2), a LPS signaling glycoprotein, and the actin cytoskeleton under LPS conditions. Interestingly, Cyto B and PP2, a Src inhibitor, enhanced the phagocytic uptake of fluorescein isothiocyanate (FITC)-dextran. Finally, it was found that Cyto B blocked the phosphorylation of vasodilator-stimulated phosphoprotein (VASP) at 1 min and the phosphorylation of heat shock protein 27 (HSP27) at 5 min. Therefore, our data suggest that the actin cytoskeleton may be one of the key components involved in the control of TLR4-mediated inflammatory responses in macrophages.
Kim, Eun Jeong;Kim, Jeeho;Lee, Min Young;Sudhanva, Muddenahalli Srinivasa;Devakumar, Sundaravinayagam;Jeon, Young Jin
Biomolecules & Therapeutics
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제22권4호
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pp.282-287
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2014
We show that silymarin, a polyphenolic flavonoid isolated from milk thistle (Silybum marianum), inhibits cytokine mixture (CM: TNF-${\alpha}$, IFN-${\gamma}$, and IL-$1{\beta}$)-induced production of nitric oxide (NO) in the pancreatic beta cell line MIN6N8a. Immunostaining and Western blot analysis showed that silymarin inhibits iNOS gene expression. RT-PCR showed that silymarin inhibits iNOS gene expression in a dose-dependent manner. We also showed that silymarin inhibits extracellular signal-regulated protein kinase-1 and 2 (ERK1/2) phosphorylation. A MEK1 inhibitor abrogated CM-induced nitrite production, similar to silymarin. Treatment of MIN6N8a cells with silymarin also inhibited CM-stimulated activation of NF-${\kappa}B$, which is important for iNOS transcription. Collectively, we demonstrate that silymarin inhibits NO production in pancreatic beta cells, and silymarin may represent a useful anti-diabetic agent.
Neuroinflammation is defined as a neurological inflammation within the brain and the spinal cord. In neuroinflammation, microglia are the tissue-resident macrophages of the central nervous system, which act as the first line of defense against harmful pathogens. Dexmedetomidine (Dex) has an anti-inflammatory effect in many neurological conditions. Additionally, the microRNA-30a-5p (miR-30a-5p) mimic has been proven to be effective in macrophages in inflammatory conditions. This study aimed to investigate the synergistic anti-inflammatory effects of both miR-30a-5p and Dex in lipopolysaccharide (LPS)-induced BV2 cells. This study showed that miR-30a-5p and Dex decreased nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells (NF-κB) translocation in LPS-induced BV2 cells. MiR-30a-5p and Dex alleviated tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) and interleukin-6 (IL-6), LPS-induced phosphorylation c-Jun N-terminal kinases (JNK), extracellular signal-regulated kinase (ERK) and p38. Also, the expression of the NOD-like receptor pyrin domain containing 3 inflammasome (NLRP3), cleaved caspase-1, and ASC was inhibited. Furthermore, LPS-stimulated nitric oxide (NO) production, inducible nitric oxide synthase (iNOS), and cyclooxygenase-2 (COX-2) expression were attenuated by Dex and miR-30a-5p. Our results indicate that a combination of Dex and miR-30a-5p, attenuates NF-κB activation, the mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling pathway, and inflammatory mediators involved in LPS-induced inflammation and inhibits the activation of the NLRP3 inflammasome in LPS-activated BV2 cells.
Objectives : The aerial parts of Rumex japonicus Houtt. (RF) is used by traditional clinics to treat parasite infection in East asia. This study aims a verification of anti-oxidative and anti-inflammatory effects of RF methanol extract. Methods : Anti-oxidative effects of RF were measured by scavenging activities of DPPH, superoxide, nitric oxide (NO) and peroxynitrite radicals. And also scavenging activities of anti-oxidation in lipopolysaccharide (LPS)-treated RAW 264.7 cells were measured. The inhibitory effects against the production of inflammatory mediators including NO, prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$), tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$), IL-6, inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2), and the translocation of nuclear factor (NF)-${\kappa}B$ in LPS-stimulated RAW 264.7 cells by RF were tested. Results : RF scavenged DPPH, superoxide, NO and peroxynitrite radicals, and RF (at $200{\mu}g/m{\ell}$) reduced the inflammatory mediators definitely. Conclusions : These results indicate that RF may be a potential drug source for oxidative stress related inflammatory diseases.
여드름은 사춘기와 젊은 연령층에서 나타나는 염증성 피부질환이다. Propionibacterium acnes (P. acnes)는 여드름에서 염증을 유발하는 주요한 균으로 알려져 있다. P. acnes 는 피부에서 과잉생산된 피지에 의해 막힌 모낭 내에서 증식하며, 피부 내의 단핵구를 활성화시키고 염증성 사이토카인(pro-inflammatory cytokine)의 분비를 촉진하여 염증반응을 증가시키는 것으로 알려져 있다. 본 논문에서는 Cnestis palala (Lour.) Merr. 추출물이 P. acnes 에 의한 염증반응을 감소시킬 수 있는지 확인하고자 하였다. 마우스 대식세포주인 RAW264.7 에서 C. palala 추출물은 P. acnes 에 의해 증가하는 염증성 사이토카인인 $IL-1{\beta}$의 단백질 발현량과 IL-6, $TNF-{\alpha}$, COX-2 의 mRNA 발현량을 감소시켰다. 또한 염증성 사이토카인 발현의 주요 전사인자(transcription factor)인 $NF-{\kappa}B$ 의 전사 활성 역시 C. palala 추출물에 의해 감소하는 것을 확인하였다. 따라서 C. palala 추출물이 P. acnes 에 의해 발생하는 여드름의 치료제나 그 보조제로 사용될 가능성이 있음을 제안 할 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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