To assay for antioxidant capacity of natural products considered important in producing human health benefits, a practical and economical method using pellet techniques was developed. A standard visualizing reagent, 1,1diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH), was mixed with a water-miscible polyvinyl alcohol (PVA), serving as a solid phase support for the DPPH reagent. A DPPH pellet was prepared by dropping a small volume of the DPPH solution onto PET film, and drying in an oven. The PVA-based DPPH pellet was dissolved into water, in which the water-miscible PVA plays as a non-ionic surfactant to help the DPPH reagent to be dissolved into the solvent. Using the DPPH assay, the antioxidant capacity of water-soluble extracts of black soybean, barley, green tea, and green gram was examined. Among the natural products tested, green tea showed the highest antioxidant capacity. This PVA-based DPPH antioxidant assay can be further applied in the natural food, raw plant material, and health product inspection field.
The 2,2-diphenyl picrylhydrazyl (DPPH) method, which can be used to predict the oxidative stability of edible oils, was previously reported by our research group. Not only free radical scavenging antioxidants but also radicals from oxidized oils are capable of reacting with DPPH radicals, thereby reducing the absorbance of DPPH. In this study, the optimum sample size of edible oils for the DPPH method was determined, and the oxidation of the edible oils was monitored via DPPH, coupled with other conventional methods. The optimum sample size was determined as 1.5 g using soybean oil. Soybean, corn, virgin olive, and refined olive oils were thermally oxidized for 3 hr at $180^{\circ}C$ and analyzed via DPPH, conjugated dienoic acid (CDA) value, and p-anisidine value (p-AV) protocols. Soybean and corn oils were found to be more sensitive to thermal oxidation than virgin and refined olive oils, on the basis of the CDA value and p-AV measurements. The DPPH method can indicate the inherent radical scavenging activity of unoxidized samples, the time required for the depletion of antioxidants, and the rate of degradation of the antioxidants. The soybean and corn oils evidenced higher levels of free radical scavenging compounds, required more time for the consumption of inherent antioxidants, and also manifested steeper antioxidant degradation rates than olive oils, based on the results of DPPH analysis. The DPPH method, accompanied by other conventional methods, may prove useful in predicting the degree of oxidation of vegetable oils.
NADPH-cytochrome P450 reductase (CPR) transfers electrons from NADPH to cytochrome P450, and catalyzes the one-electron reduction of many drugs and foreign compounds. Various forms of spectrophotometric titration have been performed to investigate the electron-accepting properties of CPR, particularly, to examine its ability to reduce cytochrome c and ferricyanide. In this study, the reduction of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) by CPR was assessed as a means of monitoring CPR activity. The principle advantage of DPPH is that its reduction can be assayed directly in the reaction medium by a continuous spectrophotometry. Thus, electrons released from NADPH by CPR were transferred to DPPH, and DPPH reduction was then followed spectrophotometrically by measuring $A_{520}$ reduction. Optimal assay concentrations of DPPH, CPR, potassium phosphate buffer, and NADPH were first established. DPPH reduction activity was found to depend upon the strength of the buffer used, which was optimal at 100 mM potassium phosphate and pH 7.6. The extinction coefficient of DPPH was $4.09\;mM^{-1}\;cm^{-1}$. DPPH reduction followed classical Michaelis-Menten kinetics ($K_m\;=\;28\;{\mu}M$, $K_{cat}\;=\;1690\;min^{-1}$). This method uses readily available materials, and has the additional advantages of being rapid and inexpensive.
This study was conducted to evaluate the increase of DPPH radical scavenging activity of meat substitute by heating. The meat substitute showed higher DPPH radical scavenging activity than those of other foods rich in protein such as beef, pork, chicken, and soybean curd. The DPPH radical scavenging activity of meat substitute was dependent upon concentration, heating temperature and heating time of meat substitute. The DPPH radical scavenging activity of meat substitute was enhanced with increasing heating temperature and time. The increase of DPPH radical scavenging activity was only applied to meat substitute without showing any activation in other foods rich in protein such as beef, pork, chicken, and soybean curd.
Kim, Kil-Nam;Heo, Soo-Jin;Cha, Seon-Heui;Jeon, You-Jin
Journal of Marine Bioscience and Biotechnology
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v.1
no.3
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pp.170-177
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2006
As a rapid and quick bioactive compound evaluation technique, in this study we utilized a automatic system of High Throughput Screening (HTS) to investigate DPPH radical scavenging efficacy of seaweeds, collected from Jeju Island in Korea. In this study, 6 species of green seaweeds, 18 species of brown seaweeds and 22 species of red seaweeds extracted with methanol at $20^{\circ}C$ and $70^{\circ}C$ were subjected to HTS. Of the green seaweeds tested, Enteromorpha compressa (20G6) of the green seaweeds showed DPPH radical scavenging activity of over 60%. On the other hand, the other green seaweeds showed poor DPPH radical scavenging activities (lees than 40%) at 1 mg/ml. Sargassum siliquastrum (20B17, 70B17), Dictyota dichotoma (70B1), Sargassum coreanum (70B16) and Ecklonia cava (70B26) among the brown seaweeds showed significantly high DPPH radical scavenging activity with 96%, 97%, 92%, 92%, 87%. Polysiphonia japonica (20R24), Schizymenia dubyi (20R17), Gelidium amansii (20R18) and Acrosorium flabellatum (20R23) among the red seaweeds showed remarkable DPPH radical scavenging activity of over 90%.
This study was conducted to measure the total polyphenol contents and DPPH radical scavenging activities of different potato plants parts, varieties, and grades, and by distribution and different cooking conditions. The results were as follows. For the plant parts, total phenolic content and DPPH radical scavenging activity were highest in the flowers followed by leaves and stems, respectively. Among 5 potato varieties, 'Jasim' had the highest DPPH radical scavenging activity and the activity of its pulp was lower than that of its cortex(peel). Regardless of potato grade, the cortexes(peel) of samples had two-fold higher DPPH radical scavenging activity than pulp, and the Grade SS potato had the highest phenolic content. It was also found that the bud ends and stem ends had comparably larger amounts of phenolic compounds in horizontally cut potatoes. Finally, the descending order for DPPH radical scavenging activity, according to different cooking conditions, was as follows: gas oven range-baking, frying, microwave-heating, sauteing, boiling in 1% saline solution, steaming, and boiling in 3% saline solution.
Kim, Ji-Eun;Hwang, Hyeon-Ik;Lee, In-Sun;Mun, Hye-Yeon
한국생물공학회:학술대회논문집
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2002.04a
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pp.317-320
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2002
To search for antioxidant compounds from plant resources, ethanol extracts of 10 plants species were investigated using DPPH method and SOD activity by NBT method. The highest activity was shown in the ethanol extracts of Schizandra Chinesis Baillon. And than, antioxidant effects and total polyphenol concentration were investigated in solvent fraction of ethanol extracts from Schizandra Chinesis Baillon. The DPPH inhibitory activity and SOD activity of ethyl acetate fraction (DPPH 51.6%, SOD 66.2%) and butanol fraction(DPPH 60.7%, SOD 67.4%) showed strong biological activities.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.26
no.4
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pp.620-624
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1997
The conditions for color intensity and electron donating ability to $\alpha$,$\alpha$-diphenyl-$\beta$- picryl-hydrazyl (DPPH) of Bacillus subtilis DC-2 were investigated. Temperature, pH and cultivation time were chosen as three factors, and the optimal conditions of color intensity and DPPH was determined with response surface methodology. Color intensity was affected by cultivation temperature(p<0.1). DPPH was influenced by cultivation temperature(p<0.05) and pH(p<0.1). But cultivation time was affected neither color in- tensity nor DPPH. Optimal conditions of color intensity with Bacillus subtilis DC-2 were appeared at cultivation temperature of 39.$25^{\circ}C$, pH 8.83 and cultivation time of 84.41hrs. Optimal conditions of DPPH with Bacillus subtilis DC-2 were revealed at cultivation temperature of 39.19$^{\circ}C$, pH 8.84 and cultivation time of 82.21hrs.
Objective : This study was designed fo find out whether Astragali Radix Herbal-Acupuncture Solution(ARHA) can scavenge NO, DPPH and IL-4 or not. Astragali Radix has been clinically used to reforce the depression of immune reponse etc. in Oriental Medicine. Methods : Free radical metabolism seems to occupy a remarkably common position in the mechanisms of ageing and ageing related disease. Oxidative damage to DNA, lipids, proteins and other molecules may contribute to the development of cancer, cardiovascular disease and possibly neurodegenerative disease. The effects of ARHA on NO, DPPH and IL-4 were measured. Results : The followings are the summary of the result; (1) There is a significant scavenging effect of ARHA on NO in 1, $10mg/m{\ell}$ group in after 24hrs. (2) There is no significant scavenging effect of ARHA on DPPH. (3) There is a significant scavenging effect of ARHA on IL-4 in 1, $10,100{\mu}g/m{\ell}$ group. Conclusions : These results suggest that ARHA has significant scavenging effect on NO, IL-4 and not on DPPH. This study shows that ARHA can be used for ageing related disease and further studies are required to investigate the antioxidative effects of it.
Shin, Hyeji;Chung, Hayeon;Park, Byoungduck;Lee, Ki Yong
Natural Product Sciences
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v.22
no.1
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pp.64-69
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2016
A method for simultaneously identifying antioxidative compounds was developed using time-based LC-MS coupled with DPPH assay regardless of the time consuming process. The methanolic extract of Polygonum aviculare (Polygonaceae) showed significant DPPH radical scavenging activity. Time-based DPPH assay for simultaneous identification of active compounds from the extracts of P. aviculare was used. Major peaks of ethyl acetate fraction of P. aviculare showed high DPPH radical scavenging activity. A simple phenolic compound (1) and six flavonoids (2-7) were isolated from the ethyl acetate fraction of P. aviculare by silica gel and sephadex LH-20 column chromatography. The structures of seven compounds were determined to be protocatechuic acid (1), catechin (2), myricitrin (3), epicatechin-3-O-gallate (4), avicularin (5), quercitrin (6), and juglanin (7) based on the analysis of the $^1H$-NMR, $^{13}C$-NMR and ESI-MS data. All compounds exhibited significant antioxidant activity on DPPH assay and active compounds were well correlated with predicted one.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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