• 제목/요약/키워드: ${\alpha}$-amylase activity

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Saccharomycopsis속과 Saccharomyces속의 잡종형성 균주에서 생산하는 ${\alpha}$-amylase의 특성 (Characterization of ${\alpha}$-amylase Producing Hybrid Constructed between Saccharomycopsis and Saccharomyces)

  • 양영기;문명님;임채영;이영하;김정호
    • 미생물학회지
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    • 제35권4호
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    • pp.315-321
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    • 1999
  • 핵전이 방법을 이용하여 효모에서 전분분해능이 향상된 새로운 우수 균주를 개발하고자 하였다. Saccharomycopsis fiburigera KCTC 7393과 Saccharomyces cerevisiae KCTC 7049에서 핵을 분리한 후 영양요구 돌연변이주인 S. cerevisiae의 안으로 전달시켜 잡종(MN-16)을 형성하여 전분 분해능이 증가된 잡종을 선별하였다. 세포 배양액으로 조효소 용액을 만든 후 ammonium sulfate 침전, DEE-Sephacel column chromatography, Sephacryl S-200 column chromatography 등의 정제과정을 통해 9.7%의 회수율로 약 10.6배 정제 된 효소를 얻을 수 있었다. 정제된 효소는 SDS-PAGE 전기영동을 통해 단일 band를 보여 주었으며, SDS-PAGE 와 Sephacryl S-200 column chromatography를 통해서 53kDa으로 나타났다. 정제효소의 최적 활성 온도는 40${\circ}C$이고, 안정성은 40~45${\circ}C$로 나타났다. 최적 활성 pH는 5.5이었고, pH 5.0~7.0 정도에서 pH안정성이 80%정도 유지되었다. 가용성 전분에 대한 $K_{m}$ 값은 2.5㎎/㎖이었다. 또한, 정제 효소의 금속 이온의 효과로 $Ca^{2+}, Co^{2+}, EDTA, Mg^{2+}, Mn^{2+}, Zn^{2+}$ 첨가시 활성이 촉진되었고, $Ca^{2+}$의 경우 가장 높은 반면 $Cu^{2+}, Fe^{2+}, Ni^{2+}$의 경우는 오히려 활성이 감소되었다.

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아연처리 볍씨의 발아중 ${\alpha}-Amylase$ 활성과 유리 Proline 함량 변화에 미치는 Kinetin 침종의 영향 (Effects of Seed Soaking of Kinetin with Zinc Treatment on ${\alpha}-amylase$ Activity and Free Proline Content during Germination of Rice(Oryza sative L.))

  • 김상국;이상철
    • 한국환경농학회지
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    • 제16권3호
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    • pp.245-248
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    • 1997
  • 본 실험은 식물생장조절제인 kinetin으로 침종 처리된 벼종자에 아연 120ppm을 처리하여 발아중 아연 독성에 대한 초기생육, 엽록소 함량, ${\alpha}-amylase$ 및 유리 proline 함량 등의 변화를 일품벼와 남천벼를 실험 재료로하여 실험한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 일품벼에서 초장은 무처리보다 모든 kinetin처리구에서 양호한 생육을 보인 반면 아연 120ppm처리구에서는 가장 저조한 생육현상을 보였고 발아율은 두품종 모두 무처리보다 kinetin $10^{-3}M$에서 가장 높게 나타났으나 아연 120ppm처리구에서는 일품벼가 남천벼보다 다소 높았다. 2. 엽록소 함량은 일품벼의 경우 무처리가 1.37mg인 것보다 아연 120ppm에서 매우 낮았고 특히, kinetin $10^{-3}M$에서는 무처리보다 훨씬 높은 함량의 증가를 보였다. 3. ${\alpha}-amylase$함량은 아연 120ppm 처리 후 1일째는 kinetin처리구와 무처리구에서 모두 낮은 활성을 보였으나 아연 120ppm 처리 후 3일째 kinetin $10^{-3}M$에서는 가장 높은 활성을 나타내었다. 4. 유리 proline 함량은 일품벼의 경우 아연 120ppm 처리후 1일째는 무처리를 제외한 모든 처리구에서 함량증가가 완만히 나타났으나 처리 후 3일째에는 무처리보다 아연 120ppm 처리에서 가장 높은 함량 증가를 보였다.

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기수산 Cyclopoid 요각류 Paracyclopina nana를 섭취한 넙치 Paralichthys olivaceus 자어의 핵산 함량과 소화효소적 반응 (Digestive Enzymatic and Nucleic Acidic Responses of Olive Flounder Paralichthys oilivaceus Larvae Fed Cyclopoid Copepod Paracyclopina nana)

  • 권오남;이균우;김근업;박흠기
    • 한국양식학회지
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    • 제21권3호
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    • pp.190-195
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    • 2008
  • 본 연구는 Paracyclopina nana의 먹이생물로써의 우수성을 핵산과 소화효소 활성을 기준으로 넙치 Paralichthys olivaceus 자어를 대상으로 밝히기 위한 것이었다. 실험은 P. nana 단독구(C 실험구), Artemia nauplii 단독구(A 실험구) 그리고 혼합구(M 실험구)로 나누어서 실시하였다. 넙치 자어의 체장은 부화 28일째, P. nana 단독 공급구에서 높게 나타났다. 건조중량당 핵산 함량은 C, M 실험구에서 A 실험구보다 함량이 빠르게 증가하였으며, RNA/DNA ratio는 C 실험구가 M, A 실험구보다 감소 경향이 빨랐다. 이들 자어의 생존률은 실험구에 따른 차이는 없었지만, 비색소침착률은 C, M 실험구에서 낮게 나타났으며, 실험 종료 시 변태율은 C 실험구에서 가장 높게 나타났고, A 실험구에서 유의적으로 가장 낮게 나타났다. $\alpha$-amylase 활성은 모든 실험구에서 증가하는 활성의 경향을 보였다. TAP 활성은 A 실험구에서 26일째 이후 9 mU/larva의 활성으로 높게 나타났으나, 다른 실험구에서는 $5{\sim}6$ mU/larva로 증가하지 않았다. $TAP/{\alpha}-amylase$ 활성의 비에서 A 실험구는 실험기간 동안 유의적으로 변화가 없었으나, C, M 실험구는 유의적으로 낮아지는 경향을 보였다. 결과적으로 실험구들의 성장, 핵산 함량의 변태와 관련된 시기적 증감 현상, 그리고 C, M 실험구에서 지속적으로 낮아지는 $TAP/{\alpha}-amylase$ 활성비를 보았을 때, 넙치 자어의 가장 높은 성장률을 볼 수 있었던 요각류인 P. nana를 공급하는 것이 이 시기의 효과적인 사육 방법인 것으로 판단된다.

꽃송이버섯(Sparassis crispa)의 세포외 효소활성 (The Extracellular Enzyme Activities in Culture Broth of Sparassis crispa.)

  • 김지영;임창수;김재용;한영환
    • 미생물학회지
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    • 제40권3호
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    • pp.230-231
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    • 2004
  • 꽃송이버섯(Sparassis crispa DSMZ 5201)의 균사를 사용하여 균사외 효소활성을 측정하였다. Yeast-malt extract-glucose 배지를 사용하여 $24^{\circ}C$에서 15일간 배양 후 배양여액을 조효소원으로 사용하였을 때, $\alpha$-amylase효소의 활성은 44.27 unit/$mg{\cdot}protein$이었다. 배양여액 중의 Protease, CMCase, $\beta$-glucosidase, chitinase 및 exo-$\beta$-1,4-glucanase의 세포외 효소활성은 상대적으로 높았으나, xylanase 효소활성은 낮게 나타났다.

벼 수발아시 종실내 효소활성의 품종간 차이 (Varietal Difference in Enzyme Activities during Preharvest Germination of Rice)

  • 고종철;김보경;이규성;최원영;최혜란;조은애;윤성중
    • 한국작물학회지
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    • 제50권6호
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    • pp.378-383
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    • 2005
  • 수발아는 벼 재배에서 주요한 문제 중의 하나이다. 본 연구는 수발아시 배유 저장 양분의 이용능력과 항산화 효소의 수발아성과의 관련성을 조사하기 위하여 실시하였다. 배유 저장양분 이용능력과 항산화 효소를 포함하는 효소의 활성은 수발아 중인 종자와 완전 성숙 건조한 종자에서 측정하였다. 효소 활성을 조${\cdot}$중만생 품종으로부터 수발아성이 서로 다른 각각 4개의 품종을 비교하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 중만생종에서 출수후 40일된 종실의 수발아율은 남평벼, 퐁안벼, 호안벼, 동진벼 순으로 높았으며 동진벼의 수발아율은 약 $62\%$였다. 조생종에서 수발아율은 운봉벼, 오대벼, 대관벼, 대성벼 순으로 높았으며 대성벼의 수발아율은 약 $59\%$였다. 2. $\alpha$-amylase 활성은 수발아율과 상관관계가 있었으며 출 수 후 40일된 종파의 $\alpha$-amylase 활성은 중만생종에서는 동진벼자 가장 높았고 조생종에서는 대성벼가 가장 높았다. 또한, 완전 성숙한 건조 종자의 $\alpha$-amylase 활성은 수발아성이 높은 품종에서 더 높았다. $\beta$-amylase활성은 $\alpha$-amylase활성에 비하여 매우 낮았으며, 조${\cdot}$중만생 품종 모두에서 $\beta$-amylase 활성과 수발아성 사이에는 일정한 관련성이 없었다. 3. 수발아 종자와 완전 성숙한 건조 종자의 glucose 함량은 수발아성이 높은 품종에서 더 높았다. 4. peroxidase 활성은 조${\cdot}$중만생종 모두에서 수발아율과 밀접한 관련성을 보였으나 Catalase 활성은 수발아성과 관련성을 보이지 않았다.

곡물별 담자균 배양물의 효소활성 (Enzyme activity of Basidiomycetes products in each cereals)

  • 박효숙;김보현;최한석;김중만;김명곤
    • 한국버섯학회지
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    • 제8권3호
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    • pp.102-108
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    • 2010
  • 본 연구는 곡류별 버섯 균사체의 성장률과 효소활성을 측정하였다. 현맥 배양물이 다른 곡류와 비교했을때 균사체 성장 속도가 빨랐다. 효소 활성은 기간별로 측정하였으며 그 결과, ${\alpha}$-amylase 효소 활성은 느타리와 상황버섯균이 우수하였으며, ${\beta}$-amylase활성은 느타리와 장수버섯균이 우수하였다. Protease활성은 상황버섯균을 제외하고는 곡물에 관계없이 비교적 고른 생산을 보였다. 담자균 배양에 의해서 명도는 감소하고 적색도와 황색도가 증가하였다.

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Bacillus sp. Y-124로부터 $\alpha$-Amylase의 생산 및 그 보존성에 관한 연구 (Production and Preservation of $\alpha$-Amylase from Bacillus sp. Y-124)

  • Jun, Hong-Ki;Yeehn Yeeh;Lee, Jong-Kune
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제9권3호
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    • pp.145-152
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    • 1981
  • 산업폐수로부터 강력한 $\alpha$-amylase 생성능력을 가진 미생물을 분리하여 검토한 곁과 Bacillus속 (Bacillus Y-124)으로 판명되었으며, Bacillus Y-l24로부터 $\alpha$-amylase의 생산성을 최적화하기 위해 배양조건 및 생성된 효소의 안정성을 유지하기 위한 제반 영향들을 검토하였다. 기본 배지내의 casein 및 Ca-pantothenate의 첨가는 본 효소의 생산에 좋은 인자로 작용하였으며 calcium이온 역시 효소합성에 관여하는 것으로 나타났다. 또한 (NH$_4$)$_2$HPO$_4$는 본 미생물의 효소생성 에 중요한 유기 질소원으로 작용하였다. 생성된 본 효소의 보존에 대한 안정성의 유지에는 calcium 및 sodium염의 영향이 컸으며 특히 CaCO$_3$$Na_2$SO$_4$의 첨가는 이 효소의 변성요인을 제거하는데 효과적인 보존제의 하나로 인식되 었다.

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Lipomyces starkeyi JLC26에서 유래된 Carbohydrase의 특성 (Properties of Carbohydrase Prepared from Lipomyces starkeyi JLC26)

  • 전선미;김도만;김도원
    • KSBB Journal
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    • 제14권6호
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    • pp.713-717
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    • 1999
  • Lipomyces starkeyi ATCC 74054를 UV로 돌연변이하여 선발한 JLC26의 효소적인 특성을 알아보았다. 효소는 70% ammonium sulfate로 침전시키고, CM-Sepharose column chromatography로 부분 정제하였다. 이때 얻어진 각 효소 specific activity는 amylase 활성의 경우는 5367 unit/mg이었고 dextranase 활성의 경우는 3045 unit/mg이었다. 효소의 최적 pH와 온도는 5.5와 37$^{\circ}C$였으며, pH 2.5-5.5와 4-55$^{\circ}C$에서 안정성을 보였다. 부분 정제된 효소는 amylase와 dextranase 활성을 동시에 보이는 100 KDa의 크기를 가지는 하나의 단백질이었다. 이 효소는 maltotriose 기질과 반응할 때 disproportionation reaction 현상을 보여 가지구조를 지닌 panose와 ${\alpha}(1{\rightarrow}6)$glucosylmaltotriose을 생산하였다. 이 균은 starch 배지에서 키워 amylase와 dextranase 활성을 동시에 지니는 효소를 생산함으로써 dextran과 mutan은 구성된 치태를 분해하는 효소재료로의 이용성이 기대된다.

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Dietary Exogenous α-Amylase Modulates the Nutrient Digestibility, Digestive Enzyme Activity, Growth-Related Gene Expression, and Diet Degradation Rate of Olive Flounder (Paralichthys olivaceus)

  • Md. Tawheed Hasan;Hyeon Jong Kim;Sang-Woo Hur;Seong-Mok Jeong;Kang-Woong Kim;Seunghan Lee
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제33권10호
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    • pp.1390-1401
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    • 2023
  • In this study, a 12-week feeding experiment was conducted to characterize the effects of exogenous α-amylase on the growth, feed utilization, digestibility, plasma α-amylase activity, feed degradation rate, and fecal particle size of olive flounder (Paralichthys olivaceus). Diet was supplemented with 0 (AA0; control), 100 (AA100), 200 (AA200), or 400 (AA400) mg/kg of α-amylase, respectively. Fish (273.1 ± 2.3 g) were stocked into 12 tanks (25 fish/1,000-L tank) and 3 tanks were randomly selected for each diet group. As a result, α-amylase was found to have no significant effects (p ≥ 0.05) on the growth, feed utilization parameters, and whole-body proximate compositions. α-Amylase-treated fish exhibited only a significant increase in the apparent digestibility coefficient of carbohydrates compared to the controls. In addition, in vitro analyses revealed that α-amylase dose-dependently increased (p < 0.05) the feed degradation rate, while photographs of the intestinal content after 2, 4, and 8 h of feeding demonstrated an improved degradation rate in the α-amylase-treated groups. Plasma α-amylase content was higher in the AA200 and AA400 groups, whereas the control group produced significantly larger-sized fecal particles (90% size class) than these two groups. In the intestine, no changes were observed in the expression levels of the immune-related TNF-α, IL-1β, IL-2, immunoglobulin-M, HSP-70, lysozyme, and amylase alpha-2A. However, growth-related genes IGF-1, IGF-2, TGF-β3, and growth hormone genes were upregulated in muscle tissues. Collectively, exogenous α-amylase has positive roles in the modulation of the digestibility coefficient, blood α-amylase concentration, growth-related gene expression, and diet degradation for improved digestion in olive flounder.

Gynura procumbens Extract Alleviates Postprandial Hyperglycemia in Diabetic Mice

  • Choi, Sung-In;Park, Mi Hwa;Han, Ji-Sook
    • Preventive Nutrition and Food Science
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    • 제21권3호
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    • pp.181-186
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    • 2016
  • This study was designed to investigate the inhibitory effect of Gynura procumbens extract against carbohydrate digesting enzymes and its ability to ameliorate postprandial hyperglycemia in streptozotocin (STZ)-induced diabetic mice. G. procumbens extract showed prominent ${\alpha}$-glucosidase and ${\alpha}$-amylase inhibitory effects. The half-maximal inhibitory concentration ($IC_{50}$) of G. procumbens extract against ${\alpha}$-glucosidase and ${\alpha}$-amylase was $0.092{\pm}0.018$ and $0.084{\pm}0.027mg/mL$, respectively, suggesting that the ${\alpha}$-amylase inhibition activity of the G. procumbens extract was more effective than that of the positive control, acarbose ($IC_{50}=0.164mg/mL$). The increase in postprandial blood glucose levels was more significantly alleviated in the G. procumbens extract group than in the control group of STZ-induced diabetic mice. Moreover, the area under the curve significantly decreased with G. procumbens extract administration in STZ-induced diabetic mice. These results suggest that G. procumbens extract may help alleviate postprandial hyperglycemia by inhibiting carbohydrate digesting enzymes.