• 제목/요약/키워드: $^1H-NMR$ Spectrum

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홍경천(Rhodiola sachlinensis)에서 항균성 물질의 분리 및 동정 (Isolation and Identification of Antimicrobial Active Substances from Rhodiola sachlinensis)

  • 심창주;이규희;정재홍;이상덕;김영호;오만진
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제11권1호
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    • pp.63-70
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    • 2004
  • 홍경천의 천연 보존료로서의 이용성을 검토하기 위하여 각종 용매로 홍경천 추출물을 제조하고 극성에 따라 순차 분획, silica-gel chromatography, thin-layer chromatography, high performance liquid chromatography의 분리과정을 거쳐 순수 분리된 각 물질을 GC/MS(EI) spectrum, $^1$H-NMR, $^{13}$C-NMR spectrum, 을 이용하여 항균물질을 동정하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 홍경천에 대해 acetone, ethyl acetate, ethanol, methanol, chloroform, water의 각 용매로 추출한 결과 항균성분의 추출 용매로는 methanol이 가장 우수하였다. 홍경천 methanol 추출물을 n-hexane, chloroform, ethyl ether, ethyl acetate, n-butyl alcohol로 분획한 결과 ethyl acetate와 n-butyl alcohol 분획에서 우수한 항균력을 나타내었다. 홍경천 methanol 추출물은 그람양성 4균주와 그람음성 4균주에 대해 고체 배지의 경우 대체로 500 $\mu\textrm{g}$mL에서 최소저해를 나타냈으며, 액체배지의 경우 100 $\mu\textrm{g}$mL 내외에서 최소저해를 나타내었다. Silica gel column chromatography에서 용매의 비율을 높여가며 용출한 결과 chloroform methanol(8:2, v/v)의 비율에서 항균력이 가장 높게 나타났다. 분리된 항균성분을 silica-gel TLC plate에 용매의 비율을 높여가며 전개시켜 chloroform methanol(9:1, v/v)에서 9개의 물질군을 얻을 수 있었으며, 그중 항균력이 확인된 3개의 물질군을 HPLC와 NMR spectrum을 분석한 결과 gallic acid, (-)-epicatechin 및 kaempferol로 동정되었다. gallic acid, (-)-epicatechit kaempferol의 항균물질 각각의 최소저해농도는 Staphylococcu aureus와 Listeria monocytogenes에 대해 gallic acid와 kaempferol이 500 $\mu\textrm{g}$mL(-)-epicatechin이 100 UgfmL에서 저해를 나타내었다.

대장균 베타-갈락토시데이즈를 이용하여 합성된 Phenylethanol Galactoside의 NMR Spectroscopy 및 Mass spectrometry (NMR Spectroscopy and Mass Spectrometry of Phenylethanol Galactoside synthesized using Escherichia coli 𝛽-Galactosidase)

  • 이향렬;정경환
    • 한국응용과학기술학회지
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    • 제37권5호
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    • pp.1323-1329
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    • 2020
  • 대장균 효소 𝛽-gal를 이용하여 합성된 phenylethanol galactoside (PhE-gal)의 분자구조를 NMR (1H-와 13C-)과 고성능 mass spectrometry를 이용하여 분석하였다. 그 결과 PhE-gal은 1H NMR에서 2-phenylethanol (PhE)에 갈락토실기가 도입되었음을 나타내는 피크가 나타났다. 방향족 고리에서 오는 𝛿H 7.30~7.21 ppm의 피크와 𝛿H 2.88 ppm에 나타난 벤질기 위치의 CH2에서 오는 피크는 PhE가 존재함을 나타낸다. 지방족 사슬 영역인 𝛿H 4.31 ppm, 4.07 ppm과 𝛿H 3.86~3.38 ppm에서 나타나는 7개의 proton 피크로부터 단당류가 도입되었음을 확인할 수 있었다. 13C NMR 스펙트럼에서 나타난 12개의 탄소 피크 중 4개의 피크는 방향족 고리인 페닐기로부터, 또한 단당류에서 기인한 6개의 탄소피크가 존재하므로 PhE에 단당이 도입되었음을 알 수 있다. PhE-gal의 분자량을 확인하기 위하여 질량분석기로 분석한 결과 m/z가 307.1181인 PhE-gal의 sodium adduct ion ([M+Na]+)이 나타나 생성물이 PhE-gal임을 알 수 있었다. 따라서 본 연구결과 E. coli 𝛽-galactosidase에 의한 촉매반응으로 PhE에 갈락토즈가 첨가된 생성물인 PhE-gal이 성공적으로 생합성 되었음을 확인하였다.

KB 암세포에 효과있는 Streptomyces plicotosporus가 생산하는 항암증강물질 Rubiginone $B_2$ 에 관한 연구 (Rubiginone $B_2$, Isotetracenone Antibiotics which Reverses Multidrug-Resistance in KB Tumor Cells)

  • 하상철;홍순덕
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제22권5호
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    • pp.491-494
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    • 1994
  • Antibiotic HS-2 was purified from the culture broth of Streptomyces plicatosporus which was isolated from soil, by solvent extraction, silica gel column chromatography and gel filtration. Through the analysis of UV, $^{1}$H-NMR, $^{13}$C-NMR spectrum, HS-2 was identified as rubiginone B$_{2}$. It was confirmed that HS-2 enhanced the cytotoxicity of colchicine against multidrug-resistant tumor cells.

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NMR Signal Assignments of Human Adenylate Kinase 1 (hAK1) and its R138A Mutant (hAK1R138A)

  • Kim, Gilhoon;Chang, Hwanbong;Won, Hoshik
    • 한국자기공명학회논문지
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    • 제20권2호
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    • pp.56-60
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    • 2016
  • Adenylate kinase (AK) enzyme which acts as the catalyst of reversible high energy phosphorylation reaction between ATP and AMP which associate with energetic metabolism and nucleic acid synthesis and signal transmission. This enzyme has three distinct domains: Core, AMP binding domain (AMPbd) and Lid domain (LID). The primary role of AMPbd and LID is associated with conformational changes due to flexibility of two domains. Three dimensional structure of human AK1 has not been confirmed and various mutation experiments have been done to determine the active sites. In this study, AK1R138A which is changed arginine[138] of LID domain with alanine[138] was made and conducted with NMR experiments, backbone dynamics analysis and mo-lecular docking dynamic simulation to find the cause of structural change and substrate binding site. Synthetic human muscle type adenylate kinase 1 (hAK1) and its mutant (AK1R138A) were re-combinded with E. coli and expressed in M9 cell. Expressed proteins were purified and finally gained at 0.520 mM hAK1 and 0.252 mM AK1R138A. Multinuclear multidimensional NMR experiments including HNCA, HN(CO)CA, were conducted for amino acid sequence analysis and signal assignments of $^1H-^{15}N$ HSQC spectrum. Our chemical shift perturbation data is shown LID domain residues and around alanine[138] and per-turbation value(0.22ppm) of valine[179] is consid-ered as inter-communication effect with LID domain and the structural change between hAK1 and AK1R138A.

Synthesis of 1,1-Bis(n-butyl, t-butyl)-2,3,4,5-Tetraphenyl-1-Silacyclopentadiene and NMR Study of Their 2,5-Carbodianions

  • Hong, Jang-Hwan
    • 통합자연과학논문집
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    • 제6권2호
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    • pp.65-70
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    • 2013
  • 1,1-Bis(n-butyl)-2,3,4,5-tetraphenyl-1-silacyclopentadiene (3) and 1,1-bis(t-butyl)-2,3,4,5-tetraphenyl-1-silacyclopentadiene (4) are synthesized from the reaction of the versatile silole dianion (2) with n-butyl bromide and t-butyl bromide. Reduction of (3) and (4) with an excess of lithium to give 1,1-bis(n-butyl)-2,5-dilithio-2,3,4,5-tetraphenyl-1-silacyclopenta-3-enide (6) and 1,1-bis(t-butyl)-2,5-dilithio-2,3,4,5-tetraphenyl-1-silacyclopenta-3-enide (7). $^{13}C$-NMR study of two 2,5-carbodianions (6 and 7) shows tert-carbanion at 73.18 and 78.12 ppm respectively. Two bulky tert-butyl groups in (7) increase the inversion barrier at the tert-carbanion, line broadenings of tert-butyl groups in $^1H$ and $^{13}C$-NMR spectrum are observed.

현사시나무 수피에서 분리한 Grandidentatin Isomer의 입체구조결정 (Determination of Stereochemical Structure of a Grandidentatin Isomer from Populus alba × glandulosa Bark)

  • 권동주;김현석;이필호;배영수
    • Journal of the Korean Wood Science and Technology
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    • 제37권1호
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    • pp.114-120
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    • 2009
  • 현사시나무 수피를 채취하여 기건 시킨 후 70% 아세톤 용액으로 추출하고 농축한 후 헥산, 디클로로메탄, 에틸아세테이트 및 수용성으로 순차 추출하여 동결건조하였다. 에틸아세테이트 분획에 대하여 Sephadex LH-20 컬럼크로마토그래피와 분취 TLC를 반복적으로 수행하여 화합물을 분리하였다. 화합물의 구조는 산 가수분해와 $^1H$-NMR, $^{13}C$-NMR, 2D-NMR 및 MALDI TOF-MS 스펙트럼을 분석하여, grandidentatin A(cis-2-hydroxycyclohexyl 6-O-p-coumaroyl-${\beta}$-D-glucopyranoside)로 동정하였다. Grandidentatin A는 현사시나무 수피에서 처음 분리되었으며, 문헌에 보고되지 않은 신규화합물이다.

Rous Sarcoma Virus에 의해 형질전환된 NRK 세포의 형태변화를 유도하는 활성물질 MT 1154의 분리와 생물학적 활성 (Purification and Biological Activities of MT 1155 Inducing Morphological Change of Rous Sarcoma Virus-Transformed Normal Rat Kidney Cell)

  • 안종석;박문수;박찬선;윤병대;민태익;안순철;오원근;이현선;윤병대
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제21권1호
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    • pp.59-65
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    • 1993
  • 방선균 분리주 GMT 1153로부터 ts/NRK 세포의 형태를 변형된 세포형태에서 정상세포의 형태로 전환하는 활성물질을 분리, 정제하였다. 활성물질 MT 1155는 UV, IR, 1H-NMR, 13C-NMR, mass,원소분석 등의 기기분석을 통하여 항진균성 항암물질인 toyocamycin으로 동정되었다. MT 1155는 ts/NRK 세포의 형태전환에 대한 활성외에도 PKA 효소활성 저해와 CTLL 세포에 대한 세포독성이 있으나 K562 소포형성 억제 및 PKC 효소활성에 대한 저해효과도 없었다.

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황벽나무 열매 추출물로부터 신규 화합물의 분리 및 구조분석 (A New Compound Isolation and Structure Analysis from Phellodendron Amurense Fruit Extract)

  • 김영희;최정은;홍진영;조창욱;이정민;김수지
    • Journal of the Korean Wood Science and Technology
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    • 제41권4호
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    • pp.269-275
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    • 2013
  • 본 연구는 유기질 문화재 보존을 위해 한국 전통 약용식물을 대상으로 항균 및 살충활성을 검증한 결과 황벽나무 열매 추출물이 우수한 활성을 나타냄을 확인하였다. 황벽나무 열매 추출물을 비극성 용매로 분획하여 그 중 가장 활성이 우수한 ethylacetate 분획물을 대상으로 실리카젤 및 Sephadex LH-20 컬럼 크로마토그래피를 실시하고 Prep-TLC를 이용하여 화합물을 순수 분리하였다. 화합물은 UV spectrum 분석 결과 260 nm 파장에서 최대흡수피크가 관찰되었고, $^1H$, $^{13}C$, HMQC, HMBC NMR과 ESI mass spectrum을 이용하여 화학구조를 분석한 결과 (4'-ethyl-2'-methylfuranyl)-6-methoxy-7-methylnona-2E,4E,6Z,8E-tetraenoic acid의 새로운 화합물임을 알 수 있었다.

순무(Brassica rapa) 뿌리로부터 이차대사산물의 분리 및 동정 (Isolation and identification of secondary metabolites from the roots of Brassica rapa)

  • 방면호;이대영;한민우;정해곤;정태숙;최명숙;이경태;백남인
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제36권1호
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    • pp.64-67
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    • 2009
  • 순무 뿌리로부터 활성 물질을 분리 동정하기 위하여 80% MeOH 수용액으로 추출하고 이를 여과, 감압 농축하여 MeOH 추출물을 얻었다. 이를 EtOAc 분획, n-BuOH 분획, $H_2O$ 분획으로 나누었으며, EtOAc분획과 n-BuOH 분획에 대해 silica gel 및 ODS column chromatography를 실시하여 4종의 이차대사산물을 분리 정제하였다. $^1H-NMR,\;^{13}C-NMR$, DEPT spectrum 및 mass spectrum등을 통하여 4- (methoxymethyl)phonol(1), ${\alpha}$- methoxy-2, 5- furandimethanel (2), phenyl-${\beta}$-glucopyranoside(3) 및 2-phenylethyl-${\beta}$-D -glucopyranoside (4)로 구조를 결정하였다. 이 화합물들은 순무에서는 처음 분리되었다.

Biomass를 위해 제조한 청목노상 callus로부터 Helicobacter pylori 억제물질의 분리 및 동정 (Purification and Identification of Inhibitory Compounds on Helicobacter pylori from Cheongmoknosang Callus for Biomass)

  • 윤동혁;차원섭;이선호;안봉전;김정환;천성숙;배종호;조영제
    • 생명과학회지
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    • 제20권3호
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    • pp.374-380
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    • 2010
  • 청목노상 잎 시료로부터 spot 배양 후 bioreactor에서 배양된 청목노상 뽕잎callus 추출물을 이용하여 H. pylori 균에 대한 항균활성을 측정한 결과, 높은 항균활성을 나타내는 것을 알 수 있었다. 배양된 청목노상 뽕잎 callus 추출물의 H. pylori 균에 대한 항균활성 물질을 정제하여 $^1H$-NMR, $^{13}C$-NMR, IR 및 FAB-MS spectrum 등을 활용하여 구조분석 한 결과 protocatechuic acid, chlorogenic acid, caffeic acid 및 rosemarinic acid로 동정하였으며, 단일물질 보다 혼합물질에 의한 synergy 효과에 의해 H. pylori 균에 대한 항균활성이 나타나는 것으로 판단되었다.