In plants, there are many CCCH zinc finger proteins consisting of three cysteine residues and one histidine residue, which bind to zinc ions with finger configuration. CCCH-type zinc finger proteins are divided into tandem CCCH-type zinc finger (TZF) and non-TZF proteins: TZF proteins contain exactly two tandem CCCH-type zinc finger motifs whereas non-TZF proteins have fewer or greater than two CCCH-type zinc finger motifs. The functions of TZF genes, especially plant-specific RR-TZF genes, have been well studied in several plants, whereas the functional roles of non-TZF genes have not been adequately researched compared to TZF genes. Many non-TZF genes have been identified as being involved in the responses to biotic and abiotic stresses, such as pathogen, high salt, drought, cold, heat, and oxidative stresses. Some non-TZF proteins bind to RNA and are involved in the post-transcriptional regulation of stress-responsive genes in the cytoplasm. In addition, other non-TZF proteins act as transcriptional activators or repressors that regulate the expression of stress-responsive genes in the nucleus. Despite these studies, stress signal transduction and upstream and downstream genes of non-TZF genes have not been sufficiently researched, suggesting that additional studies of the functions of non-TZF genes' functions in plants' stress responses are needed. In this review, we describe non-TZF genes involved in biotic abiotic stress responses in plants and their molecular functions.
Park, Soo-Jin;Park, Sun-Hee;Oh, Joo-Yeon;Han, Sang-Yun;Jo, Kyu-Bong;Oh, Han-Bin
Mass Spectrometry Letters
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v.3
no.3
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pp.82-85
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2012
The formation of zinc finger peptide-$Zn^{2+}$ complexes in electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS) was examined using three different metal ion sources: $ZnCl_2$, $Zn(CH_3COO)_2$, and $Zn(OOC(CHOH)_2COO)$. For the four zinc finger peptides (Sp1-1, Sp1-3, CF2II-4, and CF2II-6) that bind only a single $Zn^{2+}$ in the native condition, electrospray of apo-zinc finger in solution containing $ZnCl_2$ or $Zn(CH_3COO)_2$ resulted in the formation of zinc finger-$Zn^{2+}$ complexes with multiple zinc ions. This result suggests the formation of nonspecific zinc finger-$Zn^{2+}$ complexes. Zn(tartrate), $Zn(OOC(CHOH)_2COO)$, mainly produced specific zinc finger-$Zn^{2+}$ complexes with a single zinc ion. This study clearly indicates that tartrate is an excellent counter ion in ESI-MS studies of zinc finger-$Zn^{2+}$ complexes, which prevents the formation of nonspecific zinc finger-$Zn^{2+}$ complexes.
Proceedings of the Korean Biophysical Society Conference
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1998.06a
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pp.11-11
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1998
Zinc fingers of Cys$_2$His$_2$ class constitute one of the most common DNA binding motifs in eukaryotes. Unlike other DNA binding motifs, zinc finger proteins recognize very diverse DNA sites, and their sequence specificities can be systematically changed by phage display.(omitted)
Gene expression is regulated in large part at the level of transcription under the control of sequence-specific transcriptional regulatory proteins. Therefore, the ability to affect gene expression at will using sequencespecific artificial transcription factors would provide researchers with a powerful tool for biotechnology research and drug discovery. Previously, we isolated 56 novel sequence-specific DNA-binding domains from the human genome by in vivo selection. We hypothesized that these domains might be more useful for regulating gene expression in higher eukaryotic cells than those selected in vitro using phage display. However, an unpredictable factor, termed the "context effect", is associated with the construction of novel zinc finger transcription factors--- DNA-binding proteins that bind specifically to 9-base pair target sequences. In this study, we directly selected active artificial zinc finger proteins from a zinc finger protein library. Direct in vivo selection of constituents of a zinc finger protein library may be an efficient method for isolating multi-finger DNA binding proteins while avoiding the context effect.
Zinc finger proteins are among the most extensively applied metalloproteins in the field of biotechnology owing to their unique structural and functional aspects as transcriptional and translational regulators. The classical zinc fingers are the largest family of zinc proteins and they provide critical roles in physiological systems from prokaryotes to eukaryotes. Two cysteine and two histidine residues ($Cys_2His_2$) coordinate to the zinc ion for the structural functions to generate a ${\beta}{\beta}{\alpha}$ fold, and this secondary structure supports specific interactions with their binding partners, including DNA, RNA, lipids, proteins, and small molecules. In this account, the structural similarity and differences of well-known $Cys_2His_2$-type zinc fingers such as zinc interaction factor 268 (ZIF268), transcription factor IIIA (TFIIIA), GAGA, and Ros will be explained. These proteins perform their specific roles in species from archaea to eukaryotes and they show significant structural similarity; however, their aligned amino acids present low sequence homology. These zinc finger proteins have different numbers of domains for their structural roles to maintain biological progress through transcriptional regulations from exogenous stresses. The superimposed structures of these finger domains provide interesting details when these fingers are applied to specific gene binding and editing. The structural information in this study will aid in the selection of unique types of zinc finger applications in vivo and in vitro approaches, because biophysical backgrounds including complex structures and binding affinities aid in the protein design area.
Seong, So Yoon;Jung, Harin;Choi, Yang Do;Kim, Ju-Kon
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2017.06a
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pp.115-115
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2017
Zinc finger proteins constitute a large family which has been studied to have various functions in different organisms. Tandem CCCH zinc finger proteins (TZFs), members of the zinc finger protein family, are known to participate as post-transcriptional regulators of gene expression in eukaryotes. Here, we showed that the OsZn15, a gene for tandem CCCH zinc finger protein, is induced by abiotic stress and its overexpression in transgenic rice plants (PGD1:OsZn15) gains higher drought tolerance. Gene expression analysis of promoter:GFP plants revealed that OsZn15 is specifically expressed in anther and embryo, but not in vegetative organs. In-field evaluation, grain yield was higher in the PGD1:OsZn15 than nontransgenic plants under drought conditions. Interestingly, OsZn15 is shown to not only localize at nucleus but also co-localize with both processing bodies (PB) and stress granules (SG), two messenger ribo-nucleoprotein complexes which are known to activate by forming cytoplasmic foci under stress conditions. In sum, these results suggest that OsZn15 increases drought stress tolerance of rice probably by participating in RNA turnover in PB and SG.
We have previously isolated a CCCH type zinc-finger protein gene, OsZF2 (Oryza sativa Zinc Finger 2), from the cold-treated rice cDNA library. To investigate the potential role of OsZF2, transgenic rice lines over-expressing OsZF2 under the control of CaMV 35S promoter have been developed through Agrobacterium-mediated transformation. Elevated level of OsZF2 transcripts was confirmed by RNA gel blot analysis in transgenic rice. Under the 100 mM NaCl condition, the transgenic rice showed significantly enhanced growth rate in terms of shoot length and fresh weight, implicating that OsZF2 is likely to be involved in salt response of rice. In the field condition, however, the transgenic rice showed a dwarf phenotype and flowering time was delayed. Genome expression profiling analysis of transgenic plants using the 20K NSF rice oligonucleotide array revealed many up-regulated genes related to stress responses and signaling pathways such as chaperone protein dnaJ 72, salt stress-induced protein, PR protein, disease resistance proteins RPM1 and Cf2/Cf5 disease resistance protein, carbohydrate/ sugar transporter, OsWAK kinase, brassinosteroid LRR receptor kinase, and jasmonate O-methyltransferase. These data suggest that the CCCH type zinc-finger protein OsZF2 is a upstream transcriptional factor regulating growth and stress responsiveness of rice.
C3HC4-type RING zinc finger proteins essential in the regulation of plant processes, including responses to abiotic stresses. We previously isolated and examined the C3HC4-type RING zinc finger protein (BrRZFP1) from Brassica rapa under abiotic stresses. To elucidate the role of the BrRZFP1 transcription factor in gene regulation, we transformed tobacco plants with the BrRZFP1 gene. Plants were regenerated from 82 independently transformed callus lines of tobacco and analysed for transgene expression. Transgene integration and expression was confirmed by Southern and RT-PCR analyses, respectively. T2 plants displayed more tolerance to the bacterial pathogens Pectobacterium carotovorum and Ralstonia solanacearum, and the tolerance levels were correlated with BrRZFP1 expression levels. These results suggest that the transcription factor BrRZFP1 is an important determinant of stress response in plants and its overexpression in plants could increase biotic stress resistance.
The novel BrRZFPs genes encoding C3HC4-type RING zinc finger protein were identified from FOX (full length cDNA over-expressing) library of Brassica rapa. Ten full-length cDNAs obtained from the library encode zinc-finger protein containing 346 amino acids, designated BrRZFPs. These genes were classified into four groups by phylogenic analysis showing conserved protein sequences at both termini. The tissue distribution of BrRZFPs transcription was examined by qRT-PCR revealing ubiquitous expression pattern. However, each gene was strongly expressed in the specific tissue. Transcriptional analysis showed that those acquired 10 genes were inducible under abiotic stresses. Likewise, the transcript of BrRZFP3 was strongly induced (~12-folds) by exogenous abscisic acid, whereas the transcripts of BrRZFP1, BrRZFP2 and BrRZFP3 were (> 9-folds) induced by cold. We suggest that these BrRZFPs that function as signal or response to abiotic stress are useful for crop improvement.
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