Microbial transglutaminase(MTGase)를 이용하여 쌀 가수분해물과 초미세 생대두 분말을 혼합하여 전두부를 제조한 후 조직감, 동적점탄성, 단백질 결합패턴 및 미세구조를 평가하였다. 40%(w/v) 쌀 용액을 Termamyl 효소처리($85^{\circ}C$, 20분) 하였을 때 점조도 값 및 환원당 함량이 각각 $1.27\;Pa{\cdot}s^n$, 9.0%로 나타났다. MWSP 18~22% 농도에서 MTGase 효소로 응고시킨 전두부의 물성을 측정한 결과 MWSP 22% 첨가구에서 전형적인 두부의 조직감을 얻었으며, 쌀 가수분해물 7.5% 첨가구의 경우 경도 639.6 dyne/$cm^2$, 탄성 0.96으로 나타났다. MTGase 5%의 첨가 조건에서 MWSP 18~22% 농도에 따라 동적점탄성을 측정한 결과 MWSP 22% 첨가 경우 반응 6분 이내 G'(5.1 Pa) 및 G''(9.0 Pa)값으로 높게 나타났다. MWSP 22% 첨가구에서 시간에 따른 SDS-PAGE 상에서 대부분의 콩 단백질은 30분 이내에 중합되어 고분자중합체를 형성하였으며, 쌀 가수분해물이 첨가된 경우에도 대부분의 콩 단백질들이 중합되는 유사한 경향을 보였다. 쌀이 첨가된 전두부의 미세구조는 균일한 입자로 채워진 네트워크 구조를 보였으나 냉장저장 2일 후에는 쌀을 첨가하지 않은 대조구에 비해 더욱 거칠어진 표면을 확인할 수 있었다.
Objective: We aimed to observe hair follicle (HF) development in the dorsal skin and elucidate the expression patterns of genes and proteins related to skin and HF development in Rex rabbits from birth to 8 weeks of age. Methods: Whole-skin samples were obtained from the backs of Rex rabbits at 0, 2, 4, 6, and 8 weeks of age, the morphological development of primary and secondary HFs was observed, and the gene transcript levels of insulin-like growth factor-I (IGF-I), epidermal growth factor (EGF), bone morphogenetic protein 2 (BMP2), transforming growth factor ${\beta}-1$, 2, and 3 ($TGF{\beta}-1$, $TGF{\beta}-2$, and $TGF{\beta}-3$) were examined using quantitative real-time polymerase chain reaction (PCR). Additionally, Wnt family member 10b (Wnt10b) and ${\beta}$-Catenin gene and protein expression were examined by quantitative real-time PCR and western blot, respectively. Results: The results showed significant changes in the differentiation of primary and secondary HFs in Rex rabbits during their first 8 weeks of life. The IGF-I, EGF, $TGF{\beta}-2$, and $TGF{\beta}-3$ transcript levels in the rabbits were significantly lower at 2 weeks of age than at birth and gradually increased thereafter, while the BMP2 and $TGF{\beta}-1$ transcript levels at 2 weeks of age were significantly higher than those at birth and gradually decreased thereafter. ${\beta}$-Catenin gene expression was also significantly affected by age, while the Wnt10b transcript level was not. However, the Wnt10b and ${\beta}$-catenin protein expression levels were the lowest at 2 and 4 weeks of age. Conclusion: Our data showed that a series of changes in HFs in dorsal skin occurred during the first 8 weeks. Many genes, such as IGF-I, EGF, BMP2, $TGF{\beta}-1$, $TGF{\beta}-2$, $TGF{\beta}-3$, and ${\beta}$-Catenin, participated in this process, and the related proteins Wnt10b and ${\beta}$-Catenin in skin were also affected by age.
이 연구는 조제방법에 따른 수확시기별 청보리의 사료가치 및 발효품질을 평가하기 위하여 실시하였다. 그 결과, 청보리 원재료의 사료가치는 수확시기가 늦어짐에 따라 조단백질, NDF와 ADF 함량은 감소하고, TDN 함량은 증가하였다(P<0.05). 이러한 수확시기별 사료가치의 변화는 사일리지에서도 제조 전과 같은 경향이었으며, 사일리지 제조 전후를 비교하여 볼 때, 조단백질과 섬유소 함량이 다소 증가되는 경향을 보였다. 조제방법별로 볼 때 베일과 초퍼에 따른 사료가치의 차이는 보이지 않았다. 사일리지의 pH는 모든 처리구에서 수확시기가 늦어질수록 높아지는 경향을 보였고, 유기산 함량은 사일리지 조제방법에 관계없이 수확시기가 늦어질수록 줄어드는 경향이었으며(P<0.05), 조제방법별로 볼 때 품종에 관계없이 일반수확보다 초퍼에서 젖산함량이 약 23%정도 증가하는 경향이었다(P<0.05). 이상의 결과를 종합하여 볼 때, 청보리는 황숙기에 수확하는 것이 유리하며, 베일보다는 초퍼로 사일리지를 제조하는 것이 발효품질을 향상시킬 수 있는 방법이라고 사료된다.
This study compared the effects of feeding diets consisting of an experimental extruded pellet with tapioca starch (EEP), commercial extruded pellet (CEP), and raw-fish-based pellet (MP) on the growth, flesh quality, and apparent digestibility coefficient of the olive flounder Paralichthys olivaceus. Two replicated groups of 4,000 fish each (initial mean weight: $81.8{\pm}3.5g$) were fed one of the experimental diets for 5 months. After the feeding trial, the final mean weight, weight gain, specific growth rate, and feed efficiency of fish fed the EEP was significantly higher than those of fish fed the CEP and MP. Moisture content in the whole-body of fish fed MP was significantly higher than those of fish fed other diets. However, the highest crude protein in the whole-body was found in fish groups fed the EEP. Significantly higher contents of 24:1n-9, 20:5n-3, 22:6n-3 and lower 18:1n-7 was observed in fish fed the EEP compared with fish fed the MP. The amino acid contents in the whole-body showed significant differences in the composition depending on the feed, but the distribution of free amino acids showed similar patterns. Among amino acids, glutamic acid showed the highest content in all the experimental groups, and the threonine, cysteine, and lysine contents were significantly higher in the groups fed with EEP and CEP than in the group fed with MP. Digestibility of nutrients of the EEP was significantly higher than that of fish fed the CEP. This suggests that extruded pellets can be used to feed olive flounder without compromising growth and flesh quality in comparison to raw-fish-based moist pellets. Formulation of the EEP could be used as a practical feed for olive flounder.
Adenosine 5'-triphosphate (ATP) is an important extracellular signaling molecule which is involved in a variety of physiological responses in many different tissues and cell types, by acting at P2 receptors, either ionotropic (P2X) or G protein-coupled metabotropic receptors (P2Y). P2X receptors have seven isoforms designated as $P2X_{1^-}P2X_7$. In this study, we investigated the electrophysiological and pharmacological properties of rat $P2X_{1^-}P2X_4$ currents by using whole-cell patch clamp technique in a heterologous expression system. When ATP-induced currents were analyzed in human embryonic kidney (HEK293) cells following transient transfection of rat $P2X_{1^-}P2X_4$, the currents showed different pharmacological and electrophysiological properties. ATP evoked inward currents with fast activation and fast desensitization in $P2X_{^1-}$ or $P2X_{3^-}$ expressing HEK293 cells, but in $P2X_{2^-}$ or $P2X_{4^-}$ expressing HEK293 cells, ATP evoked inward currents with slow activation and slow desensitization. While PPADS and suramin inhibited $P2X_2$ or $P2X_3$ receptor-mediated currents, they had little effects on $P2X_4$ receptor-mediated currents. Ivermectin potentiated and prolonged $P2X_4$ receptor-mediated currents, but did not affect $P2X_2$ or $P2X_3$ receptor-mediated currents. We suggest that distinct pharmacological and electrophysiological properties among P2X receptor subtypes would be a useful tool to determine expression patterns of P2X receptors in the nervous system including trigeminal sensory neurons and microglia.
Egg cholesterol has been a hot issue in respect of it's effect on health and diseases in human. There is a general recognition that the cholesterol from eggs is similar to that from the other dietary sources in its biochemical functions. Many evidences show that egg yolk increased plasma cholesterol levels at an average rate of 2.3 mg /100 rnL plasma for every 100 mg cholesterol consumed. The elevation of plasma cholesterol could, however, be altered by various dietary factors such as ratios of polyunsaturated fatty acids and saturated fatty acids. Blood cholesterol levels of Korean adults have been raised up to, on the average, 193 and 187 mg /100 mL plasma for men and women, respectively, from 167/5 mg /100 mL in 1980. Furthermore, proportion of hypercholesterolemics(> 210 mg /dL) has been increased up to 23% of the population. These changes in blood cholesterol levels are attributed to the changes of dietary patterns, suggesting the arguement that Koreans are insensitive to changes of blood cholesterol is not right. Egg cholesterol levels have never been successfully reduced to any significant levels even with tremendous amounts of efforts made during last decades. The alternative and the best way to control blood cholesterol level originating from egg consumption appeares to enrich egg fat with omega-3 series fatty acids. Ingestion of the fatty acid group has specific functions to reduce hypertension and prevent various types of cancer as well as to reduce blood cholesterol. Another way to reduce egg cholesterol directly is to produce smaller egg yolk without reducing whole egg size since cholesterol is located only in the yolk. It is important to keep faith with consumers by providing correct informations on eggs, meanwhile efforts need to focus on to improve the quality of eggs as one of the best protein food items.
Calcium has versatile roles in diverse physiological functions. Among these functions, intracellular $Ca^{2+}$ plays a key role during the secretion of salivary glands. In this review, we introduce the diverse cellular components involved in the saliva secretion and related dynamic intracellular $Ca^{2+}$ signals. Calcium acts as a critical second messenger for channel activation, protein translocation, and volume regulation, which are essential events for achieving the salivary secretion. In the secretory process, $Ca^{2+}$ activates $K^+$ and $Cl^-$ channels to transport water and electrolyte constituting whole saliva. We also focus on the $Ca^{2+}$ signals from intracellular stores with discussion about detailed molecular mechanism underlying the generation of characteristic $Ca^{2+}$ patterns. In particular, inositol triphosphate signal is a main trigger for inducing $Ca^{2+}$ signals required for the salivary gland functions. The biphasic response of inositol triphosphate receptor and $Ca^{2+}$ pumps generate a self-limiting pattern of $Ca^{2+}$ efflux, resulting in $Ca^{2+}$ oscillations. The regenerative $Ca^{2+}$ oscillations have been detected in salivary gland cells, but the exact mechanism and function of the signals need to be elucidated. In future, we expect that further investigations will be performed toward better understanding of the spatiotemporal role of $Ca^{2+}$ signals in regulating salivary secretion.
Since astrocytes were shown to play a central role in maintaining neuronal viability both under normal conditions and during stress such as ischemia, studies of the astrocytic response to stress are essential to understand many types of brain pathology. The micro array system permitted screening of large numbers of genes in biological or pathological processes. Therefore, the gene expression patterns in the in vitro model of astrocytes following exposure to oxygen-glucose deprivation (OGD) were evaluated by using the micro array analysis. Primary astrocytic cultures were prepared from postnatal Swiss Webster mice. The cells were exposed to OGD for 4 hrs at $37^{\circ}C$ prior to cell harvesting. From the cultured cells, we isolated mRNA, synthesized cDNA, converted to biotinylated cRNA and then reacted with GeneChips. The data were normalized and analyzed using dChip and GenMAPP tools. After 4 hrs exposure to OGD, 4 genes were increased more than 2 folds and 51 genes were decreased more than 2 folds compared with the control condition. The data suggest that the OGD has general suppressive effect on the gene expression with the exception of some genes which are related with ischemic cell death directly or indirectly. These genes are mainly involved in apoptotic and protein translation pathways and gap junction component. These results suggest that microarray analysis of gene expression may be useful for screening novel molecular mediators of astrocyte response to ischemic injury and making profound understanding of the cellular mechanisms as a whole. Such a screening technique should provide insights into the molecular basis of brain disorders and help to identify potential targets for therapy.
Under physiological conditions, calcium (Ca2+) regulates essential functions of polarized secretory cells by the stimulation of specific Ca2+ signaling mechanisms, such as increases in intracellular Ca2+ concentration ([Ca2+]i) via the store-operated Ca2+ entry (SOCE) and the receptor-operated Ca2+ entry (ROCE). Homer proteins are scaffold proteins that interact with G protein-coupled receptors, inositol 1,4,5-triphosphate (IP3) receptors, Orai1-stromal interaction molecule 1, and transient receptor potential canonical (TRPC) channels. However, their role in the Ca2+ signaling in exocrine cells remains unknown. In this study, we investigated the role of Homer2 in the Ca2+ signaling and regulatory channels to mediate SOCE and ROCE in pancreatic acinar cells. Deletion of Homer2 (Homer2-/-) markedly increased the expression of TRPC3, TRPC6, and Orai1 in pancreatic acinar cells, whereas these expressions showed no difference in whole brains of wild-type and Homer2-/- mice. Furthermore, the response of Ca2+ entry by carbachol also showed significant changes to the patterns regulated by specific blockers of SOCE and ROCE in pancreatic acinar cells of Homer2-/- mice. Thus, these results suggest that Homer2 plays a critical role in the regulatory action of the [Ca2+]i via SOCE and ROCE in mouse pancreatic acinar cells.
카드뮴과 아연에 각각 그리고 동시에 노출한 총알고둥(Littorina brevicula)에서 중금속의 생체내 축적, 제거 및 세포내 분포 양상을 조사하였다. 총알고둥을 카드뮴 400 $\mu\textrm{g}$/L 또는 아연 3000 $\mu\textrm{g}$/L에 각각 90일간 노출하였을 경우, 각 중금속의 축적량은 노출기간에 따라 증가하였으며, 70일 이후에는 더 이상 축적량이 증가하지 않았다. 카드뮴과 아연을 동시에 노출하였을 경우에는 각각의 중금속에 노출하였을 경우에 비해 아연의 축적량은 증가하였으나, 카드뮴의 축적량은 감소하였다. 노출실험에 이어 수행한 42일간의 청장실험 결과, 카드뮴은 체외로 제거되지 않았으나, 아연은 제거되었다. 특히 카드뮴과 아연에 동시 노출한 총알고둥의 경우에 아연은 더 신속히 제거되었다. 총알고둥을 카드뮴과 아연에 각각 70일 동안 노출한 후, 체내로 흡수된 카드뮴의 약 60%가 soluble fraction에 분포하고 있었으며, 아연의 75%는 insoluble fraction에 분포하고 있었다. 이러한 경향은 카드뮴과 아연의 동시 노출시에도 유사하게 나타났다. 카드뮴과 아연은 soluble part내의 리간드(ligand) 와의 결합 양상에서도 차이를 나타냈는데, 카드뮴은 90% 이상이 약 6.5 kDa크기의 MBP-1(Metal-Binding Protein-1)과 결합하고 있었으나, 아연은 HMW(High molecular weight fraction, >60 kDa), MBP-1, MBP-2, LMW(Low molecular weight fraction <1 kDa)에 고루 분포하는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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