• Applied Biological Chemistry
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• 제49권3호
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• pp.196-201
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• 2006

Vitellogenin은 어류의 난황 단백질의 전구체 물질로서 암컷 혈청에서 발견되는 단백질이며, 외부에서 에스트로겐이나 내분비계장애물질에 노출된 경우에는 수컷이나 미성숙한 암컷에서도 이의 합성이 촉진되는 것으로 보고되었다. 따라서 수컷에서 유도되는 vitellogenin은 외인성 에스트로겐 물질에 노출되었음을 암시하는 중요한 지표로 인정되고 있다. Vitellogenin에 대한 항체를 생산하기 위하여 잉어의 vitellogenin 서열 중의 일부분에 대한 peptide를 합성한 후 그 합성 peptide에 대한 항체를 제작하였다. 그리고 $17{\beta}$-estradiol을 주입한 잉어의 혈청에서 DE-52 이온 교환 크로마토그래피를 사용하여 vitellogenin을 정제한 후 이에 대한 항체를 제작하였다. 본 연구에서는 상기의 합성 vitellogenin peptide에 대하여 제작한 다클론 항체와 vitellogenin 단백질에 대한 다클론 항체가 추후 에스트로겐의 지표로 사용될 수 있는 지를 조사하고자 항체의 반응성을 조사하였다. 정제하여 얻은 vitellogenin에 대한 다클론 항체는 Western blotting 시 $17{\beta}$-estradiol을 주입한 잉어의 혈청과 암컷 잉어의 혈청에 있는 vitellogenin과 반응한 반면에 vitellogenin peptide에 대한 다클론 항체는 이들과 반응하지 않았다. 이는 공유결합적으로 많은 변형이 일어난 vitellogenin 단백질은 vitellogenin 합성 펩타이드에 대한 항체로는 검출되지 않음을 나타낸다.

• Environmental Analysis Health and Toxicology
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• 제16권1호
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• pp.21-28
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• 2001

A common used endpoint in bioassays testing the estrogenicity of chemicals including endocrine disruptors is the induction of egg yolk Precursor vitellogenin in male fish. Two marine fishes (Sebastes schlegeli and Paralichthys olivaceus) were exposed to the 17$\beta$-estradiol(E2) to determine the vitellogenin production. Vitellogenin was measured in fish blood using SDS-PAGE and Densimetry. Results showed that exposure to E2 caused vitellogenin in male fish. Especially, vitellogenin levels in young fish were about 4 times higher than in adult fish, which means young fish are more sensitive to E2 exposure. And plasma vitellogenin in fish increased related to E2 concentration and exposure duration.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제17권9호
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• pp.1445-1451
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• 2007

A sensitive optical waveguide lightmode spectroscopy-based immunosensor was developed to detect vitellogenin in seawater flatfish (Paralichthys olivaceus). For this purpose, anion-exchange column chromatography with DE-52 resin was used to purify flatfish vitellogenin from flatfish serum containing vitellogenin that had been induced using an intraperitoneal $17{\beta}$-estradiol injection. The anti-flatfish vitellogenin antibody used as the biological component of the above immunosensor was prepared using the purified flatfish vitellogenin. The change in the incoupling angle according to the complexation between the flatfish vitellogenin and its antibody, immobilized over an optical grating coupler sensor chip, was measured to calculate the sensor response. The immunosensor was quite specific to flatfish vitellogenin binding, based on no sensor response in the case of bovine serum albumin immobilization. When plotted using double-logarithmic scales, the sensor responses increased linearly in flatfish vitellogenin concentrations of 0.00675-67.5 nM, with a detection limit of 0.0675 nM. The reusability during seven repetitive measurements was reasonably fair for the preliminary screening of flatfish vitellogenin.

• 한국동물학회지
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• 제26권2호
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• pp.83-93
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• 1983

누에의 卵形成時期동안 자성 혈림프에서 DEAE-cellullose column을 使用하여 vitellogenin을 순수하게 分離해 낸 후, 電氣泳動法과 免疫學的 方法을 使用하여 각 器官에 따른 vitellogenin의 分布와 이의 量的 變化를 調査하였다. 누에의 vitellogenin은 난성숙시기에 걸쳐 혈림프, 脂肪體 및 卵巢에 모두 分布하고 있으며, 특히 포화후 7일까지만 확인되었으며 그 이후 급격한 量的 減少를 나타내었으며, 또한 血蛋白質은 卵巢蛋白質과 最小한 3개의 同質인 蛋白質을 갖고 있는 것으로 보아 卵形成에 vitellogenin 이외의 다른 血蛋白質도 관여 되는 것 같다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제49권3호
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• pp.254-258
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• 2006

내분비계장애물질에 노출된 어류의 에스트로겐 활성에 대한 생물지표단백질인 vitellogenin을 검출하는 압전류적 면역센서를 잉어 vitellogenin에 대한 항체와 AT-cut 수정진동자를 생물요소와 변환기로 사용하여 구성하고 이를 이용한 잉어 vitellogenin 검출을 행하였다. 이형이기능성의 티올화 가교화제인 sulfosuccinimidyl 6-[3-(2-pyridyldithio)propionamido]hexanoate 처리에 의하여 티올화된 항체를 수정진동자상의 금전극에 화학흡착법에 의하여 고정화하여 센서 chip을 제조하였다. 센서반응을 위한 반응완충용액을 0.1M sodium phosphate(pH 7.4)로 선정한 후 $0.4864{\sim}486.4000\;nM$의 vitellogenin 용액을 가하였을 때 농도의존적인 센서반응의 증가가 나타났으며 이 때 잉어 vitellogenin에 대한 검출한계는 0.4864 nM로 추정되었다.

• 한국환경과학회:학술대회논문집
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• 한국환경과학회 2001년도 정기총회 및 봄 학술발표회 초록집
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• pp.238-239
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• 2001

The egg-yolk precursor vitellogenin(VTG) is secreted by the liver of female and male fish, in response to estrogenic compound. Carp(Cryprinus carpio) vitellogenin of one major protein is 160kDa, two minor proteins is 110kDa and 170kDa. We were induced vitellogenin by inject of 17-estradiol and purified in a two step procedure by separating it from plasma protein precipitated by 35% saturated ${(NH_4)}_2SO_4$ and then from the remainder by Mono-Q chromatography. We found major carp(Cyprinus carpio) vitellogenin band at 160kDa. Effect of different concentration of oestrogen on vitellogenin synthesis in carp(Cyprinus carpio) exposed for 4 weeks. Show differential effects on vitellogenin synthesis 7 days after treatment. Plasma vitellogenin was measured 3 times for each by an enzyme linked immunosorbent assay(ELISA). ELISA was developed for the detection of the egg yolk precursor vitellogenin in plasma of carp(Cyprinus carpio). The ELISAS performance was optimized and characterized.

• 한국동물학회지
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• 제33권4호
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• pp.428-434
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• 1990

꿀벌부채명나방의 난소가 지방체에서 합성한 난황전구물질(vitellogenin)을 흡수,저장하는 과정을 추적하기 위하여$^3$H-leucine을 이용하여 방사능으로 표지된 난황전구물질을 지방체세포에서 합성,분리한후 성숙중인 난소와 함께 배양함으로써 난황전구물질의 이동경로를 조사하였다. 표지된 난황전구물질은 여포세포를 통과하거나 여포세포간극을 통하여 난모세포에 접근하였고 원형질막을 투과하여 난황과립에 도달하였다. 배양시간이 오래 경과된 난모세포일수록 표지 된 난황과립을 많이 포함하였다.

• Environmental Analysis Health and Toxicology
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• 제16권1호
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• pp.29-34
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• 2001

The estrogenic potency of di -2-ethylhexyl phthalate (DEHP) using reverse transcriptase-PCR respouse of liver vitellogenin mRNA in male African clawed frog (Xenopus laevis) was studied. Male frogs were injected with DEHP at dose of 300$\mu\textrm{g}$/kg and 300 mg/kg body weight through the dorsal lymph sac. After 4 days, using suitable pair of RT-PCR primers, vitellogenin mRNA induction in the liver was measured and DEHP showed vitellogenin mRNA induction in only the group treated with 300 mg/kg. Any significant histological abnormalities by the exposure of DEHP was not shown in both testis and liver.

• 한국양식학회지
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• 제9권1호
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• pp.83-92
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• 1996

농어목 어류, C. diagramma 암컷의 vitellogenin과 난황단백의 면역화학적 특성을 서로 비교하였다. 면역화학적 방법에 의해 C. diagramma 암컷의 혈청에서 vitellogenin 1 (VTG1)과 vitellogenin 2 (VTG2)를 동정하였으며, sephacryl S-300 gel 여과법에 의하여 측정된 분자량은 각각 560,000과 410,000이었다. 암컷의 난소 추출액에서는 두 가지 형태의 난황단백인 E2와 E3가 분리되었으며, 이들의 분자량은 각각 410,000과 170,000이었다. $17\beta$-estradiol ($E_2$)을 주사한 수컷의 혈청과 간조직을 abidine-biotin complex (ABC) 방법으로 분석한 결과, vitellogenin과 유사한 물질이 검출되었다. 이상의 결과로 부터, 외인성 $E_2$ 에 의해 간에서 합성된 vitellogenin은 혈액 속으로 방출된 후 난소로 이동되는 것으로 추정되었다. 암컷의 $E_2$, 혈중농도는 산란기인 6월에 최고치를 나타내었고, vitellogenin 상대농도도 $5\~6$월에 최고치를 나타내었다. $E_2$와 vitellogenin의 변화는 본 종의 난소성숙과 밀접한 관계가 있으며, 난황형성에 있어서도 중요한 역할을 하고 있음을 알 수 있었다. 암컷 혈청 VTG2와 난소추출액 E2의 분자량이 서로 같고, vitellogenin이 간에서 합성되어 난소내로 이동하는 점으로 보아, 난소내 난황단백 성분의 전구물질은 혈청내의 vitellogenin인 것으로 추정되었다.

• 한국환경독성학회:학술대회논문집
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• 한국환경독성학회 2001년도 춘계심포지움 및 학술발표회
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• pp.132-132
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• 2001

Vitellogenin은 난황단백질의 전구체로서 생체내 발현은 에스트로젠과 에스트로젠 수용체가 반응함으로써 활성화되는 것으로 알려져 있다. 어류의 경우 간에서의 vitellogenin의 합성 및 분비는 성숙된 암컷에서만 일어날 수 있는 현상이나, 과거 여러 실험 결과를 바탕으로 수컷이나 미성숙한 암컷에서도 에스트로젠성 물질에 의해 합성이 유도되는 것으로 밝혀졌다. 따라서 수컷 또는 치어 plasma에서 vitellogenin의 측정은 외인성에스트로젠에 대한 노출을 평가할 수 있는 좋은 수단이 될 수 있다. (중략)