Mixed infection of watermelon mosaic potyvirus II isolated from pumpkin (WMV-P) and cucumber green mottle mosaic tobamovirus from watermelon (CGMMV-W) caused extremely severe symptoms such as progressive silting and death of watermelon plants. Single infections of either WMV-P or CGMMV-W on the same hosts produced only vein clearing and/or mosaic on the upper leaves. In cells infected with WMV-P, potyvirus-characteristic inclusions of pinwheels, scrolls and cylindrical inclusions were present in the cytosol. Parallel arrays of virus particles in the tonoplast were also common. In cells infected with CGMMV-W, virus particles occurred as stacked-bands of scattered randomly in the cytosol and vacuoles in all type cells. Many cells also contained vesiculated mitochondria with fibril-containing vesicles. Cells infected mixedly with WMV-P and CGMMV-W contained structural features that were not observed in cells infected singly with the two viruses. A particle of WMV-P potyvirus was surrounded by evenly spaced nine particles of CGMMV-W tobamovirus, which made a unique nonagon ring. The angled layers having $60^{\circ}$-$135^{\circ}$ were alternating layer, herringbone, crosshatching and ladder figures.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제7권2호
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pp.139-144
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2003
Over 350 million people worldwide are chronic carriers of hepatitis B virus (HBV). Chronic viral infections of the liver can progress to cirrhosis, which may ultimately lead to hepatic failure or the development of hepatocellular carcinoma. There are two antiviral drugs on the market approved for clinical management of chronic HBV infections; interferon-alpha and the nucleoside analog lamivudine. However, they showed adverse side-effects. In the rational drug design for such therapies we would like to utilize antiviral drugs that inhibit the HBV replication in the liver. Investigation of natural extracts of silkworm exhibiting antiviral potential was held in the functional HBV polymerase activity and the release of virion particle in the HepG2.2.15 cell lines. HBV-producing transgenic mouse fed with silkworm DNJ molecule was shown as an inhibitor of serum HBV particles. We could represent this DNJ molecule as an antiviral potential complementing conventional therapies after preclinical tests against WHBV-infected animal model, woodchuck.
Toxoplasma gondii infections occur throughout the world, and efforts are needed to develop various vaccine candidates expressing recombinant protein antigens. In this study, influenza matrix protein (M1) virus-like particles (VLPs) consisting of T. gondii rhoptry antigen 4 (ROP4 protein) were generated using baculovirus (rBV) expression system. Recombinant ROP4 protein with influenza M1 were cloned and expressed in rBV. SF9 insect cells were coinfected with recombinant rBVs expressing T. gondii ROP4 and influenza M1. As the results, influenza M1 VLPs showed spherical shapes, and T. gondii ROP4 protein exhibited as spikes on VLP surface under transmission electron microscopy (TEM). The M1 VLPs resemble virions in morphology and size. We found that M1 VLPs reacted with antibody from T. gondii-infected mice by western blot and ELISA. This study demonstrated that T. gondii ROP4 protein can be expressed on the surface of influenza M1 VLPs and the M1 VLPs containing T. gondii ROP4 reacted with T. gondii-infected sera, indicating the possibility that M1 VLPs could be used as a coating antigen for diagnostic and/or vaccine candidate against T. gondii infection.
Human papillomavirus (HPV) type 52 is a high-risk HPV responsible for cervical cancer. HPV type 52 is common around the world and is the most common in some Asian regions. The available prophylactic HPV vaccines protect only from HPV types 16 and 18. Supplementing economical vaccines that target HPV type 52 may satisfactorily complement available prophylactic vaccines. A codon-adapted HPV 52 L1 gene was expressed in the methylotrophic yeast Hansenula polymorpha, which is used as an industrial platform for economical hepatitis B surface antigen particle production in China. We found that the recombinant proteins produced in this expression system could form virus-like particles (VLPs) with diameters of approximately 50 nm. This study suggests that the HPV 52 VLPs produced in this platform may satisfactorily complement available prophylactic vaccines in fighting against HPVs prevalent in Asia.
Mohl, Britta S.;Chen, Jia;Sathiyamoorthy, Karthik;Jardetzky, Theodore S.;Longnecker, Richard
Molecules and Cells
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제39권4호
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pp.286-291
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2016
Epstein-Barr virus (EBV) is the prototypical ${\gamma}$-herpesvirus and an obligate human pathogen that infects mainly epithelial cells and B cells, which can result in malignancies. EBV infects these target cells by fusing with the viral and cellular lipid bilayer membranes using multiple viral factors and host receptor(s) thus exhibiting a unique complexity in its entry machinery. To enter epithelial cells, EBV requires minimally the conserved core fusion machinery comprised of the glycoproteins gH/gL acting as the receptor-binding complex and gB as the fusogen. EBV can enter B cells using gp42, which binds tightly to gH/gL and interacts with host HLA class II, activating fusion. Previously, we published the individual crystal structures of EBV entry factors, such as gH/gL and gp42, the EBV/host receptor complex, gp42/HLA-DR1, and the fusion protein EBV gB in a postfusion conformation, which allowed us to identify structural determinants and regions critical for receptor-binding and membrane fusion. Recently, we reported different low resolution models of the EBV B cell entry triggering complex (gHgL/gp42/HLA class II) in "open" and "closed" states based on negative-stain single particle electron microscopy, which provide further mechanistic insights. This review summarizes the current knowledge of these key players in EBV entry and how their structures impact receptor-binding and the triggering of gB-mediated fusion.
Autographa californica 핵다각체병 바이러스(AcNPV)의 다각체 단백질과 초록색 형광 단백질의 융합단백질의 특성을 분석하였다. 초록색 형광 단백질 유전자는 AcNPV의 완전한 다각체 단백질 유전자의 앞쪽과 뒤쪽에 융합하여 다각체 단백질 유전자의 프로모터 조절하에 도입하였다. 이렇게 작성된 재조합 바이러스를 각각 Ac-GFPPOL 또는 Ac-POLGFP이라고 명명하였다. 이들 재조합 바이러스에 의해 감염된 곤충세포주에서는 56kDa의 융합단백질이 발현되었다. 한편, 흥미롭게도 재조합 바이러스 Ac-POLGFP에 의해 감염된 세포주에서는 초록색 형광이 핵내에서만 다각체 유사 granular particle 형태로 관찰되었다. 반면에 Ac-GFPPOP에 의해 감염된 세포도주에서는 대부분 핵내에 존재하였지만, 세포질과 핵 모두에서 초록색 형광을 관찰할 수 있었다. 그러나 발현된 융합단백질은 분명히 다각체단백질을 포함하고 있음에도 다각체는 형성하지 않았다. 이러한 결과들은 융합단백질에서 다각체단백질의 위치와 관련이 있는 것으로 보여진다.
국내 젖소의 54.2%가 BLV에 감염되어 있지만 현재까지 국내에서는 소백혈병 바이러스 (BLV) 입자를 확인한 연구 보고가 없기 때문에 BLV 항체 양성 소의 말초혈액 림프구를 배양, BLV를 발현시켜 전자현미경으로 바이러스 입자를 검출하였고 배양조건에 따른 바이러스 발현율 및 발현 시간을 비교하였다. 검사 결과 전형적인 C-형 바이러스를 확인할 수 있었으며 BLV 단크론 항체를 이용한 면역염색결과 BLV 항원 양성으로 확인되었다. BLV는 대부분 세포 외부에 분포하고 있었으며 세포질 막에서 생성, 발아되어 나오는 것도 관찰되었다. 전체 바이러스의 크기는 $90{\sim}100$ nm였으며 nucleocapsid는 $40{\sim}60$nm였다. 소태아혈청 (FBS)과 T- 및 B-림프구 분열촉진물질(mitogen)을 각각 첨가하여 배양한 결과 두 군 모두에서 BLV 발현이 확인되었다. Lipopolysaccharide 첨가군은 배양 12시간, Conconavalin A 첨가군은 배양 24시간에 각각 림프구의 10%에서 바이러스가 관찰되었다. 또한 FBS만 첨가한 군과 FBS와 mitogen을 모두 첨가하지 않은 군에서도 관찰되었으나 바이러스의 수는 적었다. 본 연구에서 확립된 BLV 배양 기법을 활용하면 BLV에 감염된 소 중 바이러스를 발현하는 소, 즉 전파능이 있는 개체를 찾아내어 우선적으로 도태할 수 있기 때문에 BLV 감염으로 인한 피해를 막는데 효과적으로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
신경괴사증바이러스(NNV)는 25 nm의 작은 입자 크기에 RNA1 (3.4 kb, RdRp), RNA2 (1.4 kb, capsid protein) 두 가닥의 RNA를 유전정보를 가진다. NNV는 1980년대 말 처음 보고된 이후 전 세계적으로 120여종의 어류에 감염을 일으키며 심각한 피해를 일으키고 있는 바이러스이다. NNV 감염에 의한 피해를 최소화하고 효율적인 백신들을 개발하기 위해서는 무엇보다 NNV 감염에 따른 세포내 신호전달체계를 이해할 필요가 있다. NNV는 세포내 감염 이후 숙주가 가진 바이러스 복제에 필요한 요소들을 이용할 수 있도록 숙주세포의 cell cycle arrest 등의 기작을 이용하는 것으로 알려졌다. 반면에 숙주 세포는 NNV와 감염된 세포를 제어하기 위해 RIG-1-like receptor signaling pathway 등을 통해 NNV 감염을 인지한 다음 IFN signaling pathway를 통해 항바이러스 작용에 필요한 ISG들을 발현시킨다. 또한 감염된 세포들을 사멸시키기 위해 ER stress를 통한 unfolded protein response (UPR), mitochondria-mediated cell death 작용을 통해 감염된 세포의 apoptosis를 유발한다. NNV 감염 기작에 대한 세포신호전달연구는 아직 초기단계이며 검증해야 할 pathway들이 아직도 많이 남아있는 상황이다. 따라서 NNV 감염과 연관된 다양한 세포신호전달체계를 탐색하고 질병 특이적인 세포신호전달체계를 이해함으로써 신속하고 정확한 진단법 및 백신 개발에 많은 도움이 될 것으로 생각된다.
1998년 8~10월에 남해안 일원 해상 가두리 양식장에서 사육중인 돌돔, Oplegnathus fasciatus이 60%이상 폐사하였다. 병어의 체색은 검어지거나 퇴색되며 아가미는 빈혈증상이 심하고 비장은 특이적으로 비대되어 있었고, 비장, 신장, 심장 및 간장 조직에서 퓰겐양성과 호염기성의 비대세포가 관찰되었다. 병어의 비장조직 마쇄액을 GF세포에 접종배양한 결과, 세포가 구형화 되면서 커지는 세포변성효과가 나타나 감염된 GF 세포로부터 바이러스가 분리되었다. 분리된 바이러스 배양액($10^4TCID_{50}$/0.1 ml)을 건강한 돌돔 치어에 복강주사하면 자연감염어와 유사한 증상을 나타내면서 폐사가 일어났고, 또한 병어의 비장조직을 전자현미경으로 관찰한 결과, 조직내 비대세포의 세포질에서 직경이 120~130 nm이며 외막이 있는 정 20면체의 바이러스 입자가 관찰되었다. 그리고 genebank로부터 얻은 참돔 이리도바이러스(RSIV)의 ATPase gene의 DNA염기서열을 주형으로 제작된 primer를 사용하여 PCR을 수행한 결과, 500 bp의 PCR 생성물이 병어나 인위감염된 GF세포에서 얻어졌는데, 이들 PCR 생성물은 RSIV의 ATPase cDNA gene과 95%의 상동성을 나타내었다. 따라서 양식돌돔에 대량 폐사를 일으킨 원인 바이러스는 참돔 이리도바이러스(RSIV)와 유사한 이리도바이러스로 밝혀졌다.
Bioaerosol inactivation becomes important as people recognize the significance on the health effects of bioaerosols. There are several ways to inactivate such bioaerosols such as antimicrobial filters, UV, etc. For the on-filter-inactivation, proper antimicrobial materials coating should be applied. Recently, air ions are adopted to effectively reduce germ and virus activity. Limitations arise when each method is applied separately. Coating materials can experience chemical instability over time and temperature. Ionizers can generate ozone to prepare high ion concentrations. Combinations of developed techniques to enhance the inactivation efficiency were suggested. Researches on the air sterilization are reviewed and outlook is highlighted. Proper techniques such as combinations of filter material coating and air ion generation can be used to make air quality better for human living.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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