직접생균수측정법(direct viable count; DVC)과 평판법(p1ate count; PC)을 이용하여 시판되고 있는 먹는샘물, 약수, 도시 인근 지역과 축산농가 밀집지역의 음용 지하수로부터 채수된 시료에 대하여 정략적 평가를 실시하였다. DVC법에 의한 생균수는 전균수(total direct count: TDC)의 약 30~80%, 평판법에 의한 생균수는 DVC의 약1~30%로 나타났다. 이와 같은 결과는 지하수내에 배양 불가능한(viable but non-culturable: VBNC)세균이 높은 비율로 존재함이라고 판단된다. 한편, 통상농도의 영양배지(nutrient broth; NB)와 이를 $10^-2 -2/배로 희석한 영양배지(diluted nutrient broth; DNB)및 R2A배지를 이용하여 계수한 결과, 통상농도의 NB배지에 비해 저영양배지인 DNB와 R2A에서 2~50배 이상 높은 계수치를 나타내었다. 이와 같은 결과로부터 지하수와 같이 빈영양한 환경 내에는 통상농도의 NB배지에서는 중식이 현저히 저해되고 저영양배지에서 중식 가능한 저영양세균이 다수 분포해 있음이라 판단되었다.
Lactobacillus cristatus KLB 46 isolated from Korean woman was grown on supplemented whey medium and medium compositions were optimized for maximum viable cell count. Among the nitrogen sources tested, beef extract yielded the highest viable cell number. When corn steep liquor was applied as an additional nitrogen source, the viable cell number was highest $(3.11{\times}10^9\;CFU/ml)$ in the medium containing 50g/ l corn steep liquor and 10g/ l beef extract. The highest viable cell $count(5.00{\times}10^9\;CFU/ml)$ was obtained from the supplemented whey medium that contains beef extract(10g/ l ), corn steep liquor(50g/ l ), tween 80(0.1%, v/v) and trace amounts of sodium acetate(5g/ l ), dipotassium phosphate(2g/ l ), magnesium sulfate(0.1g/ l ), and manganese sulfate (0.05g/ l ).
호소수내의 '살아있는 세균'을 측정하기 위하여 quantitative direct viable count (qDVC) 방법을 적용하였다. qDVC방법에 적용되는 최적 glycine 농도는 2%였으며, '살아있는 세균'을 계수하는데 있어서 평판계수법, CTC법 보다는 qDVC 방법이 보다 효과적이라는 것을 확인하였다. qDVC방법으로 '살아있는 세균'을 측정한 결과 다른 두 방법보다 $2.4{\sim}6.0$배 높은 값이었다. 또한 qDVC방법은 '살아있는 세균'을 죽은 세포 또는 휴면세포와 쉽게 구별할 수 있었다.
To elucidate the influence of pipe materials on the VBNC (viable but nonculturable) state and bacterial numbers in drinking water, biofilm and effluent from stainless steel, galvanized iron, and polyvinyl chloride pipe wafers were analyzed. Although no HPC (heterotrophic plate count) was detected in the chlorinated influent of the model system, a DVC (direct viable count) still existed in the range between 3- and 4-log cells/ml. Significantly high numbers of HPC and DVC were found both in biofilm and in the effluent of the model system. The pipe material, exposure time, and the season were all relevant to the concentrations of VBNC and HPC bacteria detected. These findings indicate the importance of determining the number of VBNC cells and the type of pipe materials to estimate the HPC concentration in water distribution systems and thus the need of determining a DVC in evaluating disinfection efficiency.
Whey based medium was optimized for the production of viable Lactobacillus crispatus KLB 46 isolated from the vagina of Korean women. Among the various nitrogen sources such as yeast extract, beef extract, and proteose peptone no. 3 supplemented to whey, beef extract showed the highest viable cell production. The addition of Tween 80 to the whey based medium increased viable cell concentration. As beef extract supplementation is not economically attractive, corn steep liquor was added as a supplementary nitrogen sources. When corn steep liquor was supplied with beef extract with the ratio 5 : 1, the viable cell count was $3.11{\times}10^9$ CFU/mL. Also, the addition of mineral salts containing sodium acetate (5 g/L), potassium phosphate dibasic (2 g/L), magnesium sulfate (0.1 g/L) and manganese sulfate (0.05 g/L) to the whey medium increased viable cell count further ($5.00{\times}10^9$ CFU/mL).
형광현미경을 이용한 기존의 직접생균수측정(DVC)법을 변형하여 산림토양의 각 층위에 분포하는 난배양성 토양세균의 정량적 평가를 시도하였다. 기존의 방법에서 사용된 DNA합성저해제(nalidixic acid; 100${\mu}g$/ml, pipemidic acid; 50 ${\mu}g$/ml, piromidic acid; 50 ${\mu}g$/ml)보다 5배 높은 농도를 사용한 결과 토양세균 군집의 세포분열이 배양24시간까지 분히 억제되어 기존의 DVC법보다 10배 이상 높은 계수치를 얻었다. 토양시료를 제균수로 원심 세척한 경우 DVC는 전균수(TDC)의 약 I% 미만을 나타내어 첨가된 기질의 이용능을 정확히 판정할 수 있었다. 형광현미경을 이용하여 DVC법에 의해 검출된 생균수는 전균수의 18-44%를 나타내었고, 평판법(PC)에 의해 계수된 생균수는 전균수의 1% 미만을 나타내어 DVC법이 평판법에 비해 100-2000배 이상 높은 계수치를 나타내었다. 이는 평판법으로는 배양할 수 없는 난배양성(VBNC)세균이 토양 내에 다수 존재해 있음으로 판단되었고, DVC법에 의해 난배양성 토양세균을 정량적으로 검출할 수 있는 가능성이 확인되었다. 영양기질로써 통상농도의 NB배지와 NB를 $10^{-2}$로 희석한 DNB배지를 사용하여 DVC법과 평판법에 의한 계수 결과를 비교한 결과 모든 시료에서 DNB배지에서의 생균수는 NB배지보다 5~10배 이상 높은 값을 나타내어 산림토양의 각 층위에 저영양세균(oligotrophic bacteria)이 다수 분포해 있음으로 추정되었다.
Adherence of probiotic bacteria to intestinal epithelium is found to be the most principal characteristics among the various physiological functionality. This study was conducted to investigate the effect of bifidobacterial growth properties and condition on the Caco-2 cell adherence and to construct a basic data on adherence-related research. Among 20 strains of bifidobacteris tested, when measured by cell surface hydrophobicity(CSH) and cell agglutination(CA), Bifidobacterium bifidum ATCC29521, Bif. adolescentis K8, and Bif. infantis K9 were selected. Using these strains, variations of Caso-2 cell adherence depending upon experimental condition were analyzed. The results obtained are as follows : Even though Bif. bifidum ATCC29521, Bif. adolescentis K8, and Bif. infantis K9 reached more 85% cell surface hydrophobicity there was no significant difference in cell agglutination, when reached 31.54$\pm$0.54mg/ml. By direct count method for adherence, viable cell count of M3, K1, K2, K8, K9 and K10 reached more 100 counts per 100 Caco-2 cells. When Bif. bifidum ATCC29521, Bif. adolescentistis K8, and Bif. infantis K9 were used to compare the adherence depending upon viable cell counts, reaction time, and growth phase, the more viable cell count, and the more adhered cell counts, the less adherence percentage. In addition, there was no difference in adherence percentage of bifidobacteria when bifidobacteria was incubated from 1 to 8 hrs after Caco-2 cells already formed monolayer. Considering of the effect of growth phase of bifidobacteria on adherence variation, all strains showed the highest adherence during the early stage of stationary phase. In conclusion, adherence of bifidobacteria was affected by strain specificity, viable cell count, and growth activity.
The purposes of this study were to evaluate the adherence of bacteria on various denture base resin materials and effects of chitosan, added to denture base materials on bacterial adherence. PMMA denture base resin such as heat-cured Vertex-RS, self-cured Vertex-SC and 4-META denture base resin such as heat-cured Meta-Dent, self-cured Meta-Fast were used in this study Samples were divided into two groups the denture base resin with chitosan, without chitosan Streptococcus mutans and Lactobacillus casei were used in this study. The surface of samples was observed by SEM. When chitosan was added to M17 and MRS broth, viable cell count of bacteria was reduced. Viable cell count of Streptococcus mutans on the samples decreased as follows : Meta-Dent, Vertex-SC, Meta-Fast, Vertex-RS. Viable cell count of Lactobacillus casei on the samples decreased as follows: Vertex-RS, Meta-Dent, Meta-Fast, Vertex-SC. The resin with chitosan showed lower adherence of bacteria than without chitosan. The images of SEM showed that the surface of the resin with chitosan was rougher than that of without chitosan. These results showed that the denture base resin materials with chitosan have rougher surface than without chitosan, but less bacteria adhered on them.
Flounder Verasper moseri Jordan et Gilberu sikhae is one of the traditional Korean fermented food. Microbiological, chemical, and biogenic amine analyses were carried out to evaluate the quality of commercial flounder sikhae and establish standardization. The quality characteristics were analyzed in terms the salinity, volatile basic nitrogen, pH, amino-N, TBA value, biogenic amine, viable cell count, and lactic acid bacteria. Quality evaluation of commercial flounder sikhae revaled an average pH of 4.84, volatile basic nitrogen of 43.47 mg/100 g, amino-N of 213.04 mg/100 g, salinity of 5.77 %, viable cell count of $10^6-10^7CFU/g$, viable lactic acid bacteria count of $10^6-10^7CFU/g$ and biogenic amine level of 0.70-47.34 mg/kg.
Bacterial vaginosis can be treated by restoring the normal vaginal flora using lactobacilli. Lactobacillus crispatus KLB46 that was isolated from the human vagina has a string antimicrobial activity and was grown in a batch and in a continuous fermentor. During batch cultivation, the maximum specific growth rate of L. crispatus KLB 46 was 0.63h(sup)-1 and the highest viable cell count (1.9$\times$10(sup)9 CFU/mL) was obtained at pH 5.5. L. crispatus KLB 46 did not grow well at either pH 3.5 or 7.5. During continuous cultivation, the highest viable cell count (1.53$\times$10(sup)9 CFU/mL) was obtained at a dilution rate of 0.32h(sup)-1, and was 7.33$\times$10(sup)11 CFU L(sup)-1 h(sup)-1, that is approximately 5 times higher than that obtained from batch culture.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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