• 제목/요약/키워드: viable cells

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교반형 막 반응기를 이용한 재조합 인간 세포의 무혈청 배지에 의한 $\gamma$-Interferon의 생산 (Economic Production of $\gamma$-Interferon from Recombinant Human Cells in Serum Free Medium by a Moving Aeration Membrane Bioreactor)

  • 박영식;김현규;임서규;박경유;이현용
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제22권4호
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    • pp.389-394
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    • 1994
  • 8 X 10$^{6}$(viable cells/ml) of maximum cell density and 9000(IU/ml) of $\gamma$-IFN production were obtained at 55(ml/hr) of a perfusion rate by cultivating HSF cells using a moving membrane aeration bioreactor. This system proves to be an efficient culture process by maintaning 90% of viable cells during the whole cultivation periods. The metabolic molar quotient of glucose to lactate was 0.81 for overall ranges of glucose consumed while the evolution of ammonia was not linearly related to the consumption of glutamine. Low molar conversion ratio was observed in low consumptions of glutamine and high molar conversion ratio in high comsumptions. It also shows that the glutamolysis plays important role in the steady state conditions by evolving larger quantities of ammonia than lactate. At the above of 50 rpm, which is the optimum agitation speed for this bioreactor, the cell growth was severely affected while the IFN production was less decrea- sed, maintaing 1.5 X 10$^{-3}$(IU/cell/day) specific IFN production rate. The cumulatvie $\gamma$-IFN production was 7.2 X 10$^{8}$(IU) for 70 days of the cultivation, which yields 1 X 10$^{7}$ (IU/day) of IFN production rate. Therefore, a commercial production of $\gamma$-IFN by this culture process can be achievable by maintaining the above IFN productivity in a scaled-up culture system.

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대장암 세포암종 HCT-15 세포 및 위암 세포암종 AGS 세포에서 차가버섯 조성물에 의한 세포생육 억제 효과 (Cytotoxic Effect of Inonotus obliquus Composition in HCT-15 Human Colon Cancer Cells and AGS Gastric Cancer Cells)

  • 차재영;전병삼;문재철;유지현;조영수
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제33권4호
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    • pp.633-640
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    • 2004
  • 녹차분말을 포함하는 차가버섯 조성물의 수용성 추출물에 의한 인체 위암 세포 AGS 및 대장암 세포 HCT-15, 그리고 마우스 정상세포 NIH3T3 fibroblast의 세포생육에 미치는 효과를 세포 수 측정방법과 MTT assay 방법으로 측정하였다. 차가버섯 조성물의 수용성 추출물은 인체 대장암 세포주 HCT-15와 위암 세포주 AGS의 생육을 억제하였다. 그러나 동일한 실험조건 하에서 마우스 정상 세포주 NIH3T3은 80% 이상의 생존율을 나타내었다. 본 연구의 결과로 차가버섯 조성물의 수용성 추출물은 정상세포에는 독성을 나타내지 않으면서 위암 및 대장암 세포에는 높은 생육억제 효과를 나타냄을 알 수 있었다.

Arthrobacter luteus가 생산하는 AL-Protease의 효모세포벽 용해 촉진작용 (The Synergistic Action of the AL-Protease from Arthrobacter luteus on the Lysis of Yeast Cell Walls)

  • 오홍록;선진승
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제14권4호
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    • pp.401-408
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    • 1985
  • 효모세포벽 용해효소의 일종인 Zymolyase$(endo-{\beta}-1\;,3-glucanase)$와 더불어 Arthrobacter luteus로 부터 생산되었고, 또한 Zymolyase의 조효소중에서 발견된 바 있는 염기성 AL-protease의 효모세포벽 용해작용을 S. sake의 생세포와 그 세포벽 표품(標品)을 사용하여 조사하였다. AL-protease의 효모 생세포에 대한 용해활성은 그 단독작용만으로는 지극히 미약하였으나, Zymolyase와의 복합작용에 의해서 용해활성은 고도로 상승하였다. 효모생세포를 AL-protease와 Zymolyase로써 단계적인 처리를 할 경우, 효모세포는 AL-protease로 전처리된 뒤에 Zymolyase로 처리되는 처리 순서에 한하여 효과적으로 용해되었다. 이러한 AL-protease의 촉진적 작용은 AL-protease처럼 염기성이고 serine protease로 알려진 몇가지 시판의 효소들 중에서는 발견되지 않았으며, 또한 AL-protease의 이러한 작용은 실험에 사용된 효모들의 배양조건 및 균종에 따라서 커다란 영향을 받는 것으로 밝혀졌다. AL-protease는 효모세포벽 표품(標品)으로부터 일정량의 peptide와 상당량의 당을 유리시키고 있으나, 그 세포벽을 66% 이상은 용해시키지 못하였다. 반면에, Zymolyase는 그 단독작용으로도 효모세포벽을 거의 완전히 용해시킬 수 있었다. 이상의 실험결과를 기초로 하여, S. sake 세포벽의 용해에 있어서 AL-protease의 효소적 작용은, 먼저 AL-protease가 mannan과 단백질로 구성되는 세포벽 표층부에 결합하고, 이어서 그들의 구조를 변화시킴으로써, Zymolyase를 세포벽의 외부로 부터 알카리 불용성 glucan으로 구축되고 있는 세포벽 내부의 골격구조로까지의 침투를 촉진시키는 것으로 추론되었다.

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김치 유산균의 Caco-2 세포막 부착성 및 Aflatoxin B1 제거 효과 (Adhesion of Kimchi Lactobacillus Strains to Caco-2 Cell Membrane and Sequestration of Aflatoxin B1)

  • 이정민
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제34권5호
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    • pp.581-585
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    • 2005
  • 김치의 발효와 숙성 에 관여하는 2종의 유산균과 3종의 유제품으로부터 분리된 유산균을 Caco-2 세포 부착성과 $AFB_1$ 흡착능에 대해 비교 검토하여 보았다. 또한 유산균을 생균군, 열처리군, 강산처리군으로 나누어 유산균의 부착성 및 흡착력이 세포벽의 구조와 관련이 있다는 보고를 재확인하고자 하였다. L. plantarum KCTC 3099의 경우 Caco-2 세포 부착성이나 $AFB_1$ 흡착능이 높게 나타났으며 이것은 양성 대조군으로 사용된 L. rhamnosus GG와 유사한 수준을 나타내었다. 하지만 L. mesenteroides KCTC 3001은 Caco-2 부착성은 다소 높게 나타났으나 $AFB_1$ 흡착능은 낮게 나타났다. 이것은 Caco-2세포에 결합하는 부위와 $AFB_1$에 결합하는 부위가 일치하지는 않는다는 것을 암시하는 것으로 사료된다. 또한 유산균의 처리방법에 따라서도 다양한 차이를 보였는데 본 실험에서는 강산처리군의 경우 보다 효과적인 것으로 나타났으며 세포벽의 주된 구조인 peptidoglycan과 polysaccharides이 강산의 처리에 의해 결합이 파괴되면서 Caco2 세포 부착성이나 $AFB_1$ 흡착능의 상승에 영향을 미쳤으리라 여겨진다. 하지만 강산처리에 의한 세포벽의 변화는 비특이적으로 발생하기 때문에 동일한 형태로 모든 유산균에 적용 되기는 어려울 것이며 각 유산균종의 세포벽 구조와 특이 성분의 함량에 따라 다양하게 변화가 일어날 것으로 사료된다.

Propidium Monoazide(PMA)와 Real-Time qPCR을 이용한 살아있는 Cronobacter sakazakii의 신속검출 (Rapid Detection of Viable Cronobacter sakazakii using Propidium Monoazide (PMA) in Combination with Real-Time qPCR)

  • 황대근;천정환;김현숙;김홍석;김동현;송광영;임진혁;김영지;강일병;서건호
    • Journal of Dairy Science and Biotechnology
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    • 제33권3호
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    • pp.197-202
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    • 2015
  • While various foodborne pathogenic bacteria can be detected more rapidly via polymerase chain reaction than via conventional plating methods, it is impossible to distinguish between viable and dead cells in DNA-based assays. Hence, propidium monoazide (PMA) treatment has been introduced to detect living cells. The purpose of this study is to evaluate the applicability of the PMA treatment and real-time qPCR method for the detection of Cronobacter sakazakii and to compare it to that of plate counting. Based on our positive results, we suggest the use of PMA treatment and real-time qPCR for the detection of viable Cronobacter sakazakii in various food sources and an update of the Korean Food Code.

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Photodynamic Therapy에 의한 산화적 스트레스 조건에서 Helicobacter pylori의 Fur 단백질의 역할 (The Role of Helicobacter pylori's Fur Protein in the Oxidative Stress Induced by Photodynamic Therapy)

  • 박유나;김지훈;최성숙
    • 미생물학회지
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    • 제47권2호
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    • pp.124-129
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    • 2011
  • Helicobacter pylori균의 ferric uptake regulator (Fur) 단백질의 산화적 손상에 대한 역할을 연구하였다. H. pylori균의 fur 유전자를 제거한 돌연변이체를 만들고 wild type H. pylori균과 돌연변이체 균의 산화적 스트레스에 대한 반응을 비교하였다. 산화적 스트레스는 methylene blue와 660 nm 파장의 빛을 이용하는 광역학적 치료방법으로 유도하였다. 산화적 스트레스를 가한 실험조건에서 wt H. pylori와 돌연변이체의 생존력, DNA 손상의 정도를 비교 검토하였다. 그 결과 fur 유전자가 제거된 돌연변이체의 생균수가 wt에 비해 10,000배 가량 감소한 것을 알 수 있었으며 DNA의 산화적 손상의 marker인 8-hydroxy-2-deoxyguanosine (8-OHdG)의 양도 fur 유전자 제거된 돌연변이에서 wild type에 비해 3배 정도 더 생성됨을 확인하였다. 따라서 본 실험결과 H. pylori균의 fur 유전자가 PDT법으로 유도한 산화적 스트레스에 방어 기작을 하는 것으로 사료된다.

Protective Effect of Bcl-2 in NS0 Myeloma Cell Culture is Greater in More Stressful Environments

  • Tey, B.T.;Al-Rubeai, M.
    • Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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    • 제10권6호
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    • pp.564-570
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    • 2005
  • In the present study, the protective effects of Bcl-2 over-expression in a suspension culture (without any adaptation) and spent medium (low nutrient and high toxic metabolite conditions) were investigated. In the suspension culture without prior adaptation, the viability of the control cell line fall to 0% by day 7, whereas the Bcl-2 cell line had a viability of 65%. The difference in the viability and viable cell density between the Bcl-2 and control cell lines was more apparent in the suspension culture than the static culture, and became even more apparent on day 6. Fluorescence microscopic counting revealed that the major mechanism of cell death in the control cell line in both the static and suspension cultures was apoptosis. For the Bcl-2 cell lines, necrosis was the major mode of cell death in the static culture, but apoptosis became equally important in the suspension culture. When the NS0 6A1 cell line was cultured in spent medium taken from a 14 day batch culture, the control cell line almost completely lost its viability by day 5, whereas, the Bcl-2 still had a viability of 73%. The viable cell density and viability of the Bcl-2 cell line cultivated in fresh medium were 2.2 and 2.7 fold higher, respectively, than those of the control cultures. However, the viable cell density and viability of the Bcl-2 cultivated in the spent medium were 8.7 and 7.8 fold higher, respectively, than those of the control cultures. Most of the dead cells in the control cell line were apoptotic; whereas, the major cell death mechanisms in the Bcl-2 cell line were necrotic.

스피루리나가 유산균의 증식에 미치는 영향 (Effect of Spirulina on Growth of Lactic Acid Bacteria)

  • 손찬욱;신유미;심현정;김미연;김미리
    • 한국식품조리과학회지
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    • 제23권6호
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    • pp.968-976
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    • 2007
  • This experiment was carried out to investigate the effects of spirulina powder on the growth properties of lactic acid bacteria in reconstituted skim milk. The spirulina powder supplemented to S. thermophilus and L acidophilus slightly stimulated lactic acid production. In addition, the growth and acid production of L. bulgaricus were enhanced by the addition of spirulina powder. When the spirulina powder was added to reconstituted skim milk at the level of 1%, the mixed cultures of S. thermophilus and L. bulgaricus showed higher numbers of viable cells and higher acid production than the other cultures. The effects of the addition amounts of spirulina powder (1%, 2% and 3%) to the reconstituted skim milk on the growth properties of the mixed cultures of S. thermophilus and L. bulgaricus were evaluated. The pH of the skim milk with added spirulina powder was lower than that of the control, but the amount of spirulina did not have a significant affect. The titratable acidity increased with the incubation time until 12 hr. The number of viable cells in the skim milk with added spirulina increased according to the amount of spirulina. Thus, the spirulina was effective for the increasing lactic acid bacteria in yoghurt.

숙주나물과 콩나물에 대한 부패성 미생물의 증식 양상 비교 (Comparative Study on Growth of Spoilage Microorganisms in Mungbean and Soybean Sprout)

  • 유미지;김용석;신동화
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제19권1호
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    • pp.25-30
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    • 2004
  • 숙주나물과 콩나물은 blanching후 변질 속도가 크게 차이가 나는 바 이들이 Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Pseudomonas fluorescens, Listeria monocytogenes등 4종의 부패성 및 식중독 미생물의 증식에 미치는 영향을 조사하였다. 숙주나물과 콩나물의 조리과정 중 blanching조건이 달라 각각의 조건에서 두 시료 모두 blanching하여 생균수를 측정한 결과 blanching 한 후 미생물 수는 저장시간에 따라 증가하나 그 차이가 없었다. 최소배지에 숙주나물과 콩나물 농축물 및 부패성 미생물을 접종한 후 생균수를 측정한 결과 숙주나물에 접종한 모든 균들의 초기 균수가 높았으나 24시간 이후 비슷한 증식양상을 나타내었다. 그러나 숙주나물과 콩나물의 여액을 배지로 사용하여 실험한 결과 미생물의 증식 양상은 균주 마다 다른 것으로 나타났다. 저장기간 동안 색도를 측정한 결과 숙주나물의 경우 24시간에는 색차가 거의 없다가 48시간 이후 현저한 차이를 보였고, 콩나물의 경우 24시간에 다른 계통의 색으로 변하다가 48시간 이후 현저하게 많은 차이를 보여 다른 양상을 나타내었다.

In vitro antimicrobial effect of the tissue conditioner containing silver nanoparticles

  • Nam, Ki-Young
    • The Journal of Advanced Prosthodontics
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    • 제3권1호
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    • pp.20-24
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    • 2011
  • PURPOSE. The aim of this study was to identify in vitro antimicrobial activity of the tissue conditioner containing silver nanoparticles on microbial strains, Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans and Candida albicans. MATERIALS AND METHODS. Experimental disc samples ($20.0{\times}3.0$ mm) of tissue conditioner (GC Soft-Liner, GC cooperation, Tokyo, Japan) containing 0.1 - 3.0% silver nanoparticles (0%: control) were fabricated. Samples were placed on separate culture plate dish and microbial suspensions (100 ${\mu}L$) of tested strains were inoculated then incubated at $37^{\circ}C$. Microbial growth was verified at 24 hrs and 72 hrs and the antimicrobial effects of samples were evaluated as a percentage of viable cells in withdrawn suspension (100 ${\mu}L$). Data were recorded as the mean of three colony forming unit (CFU) numerations and the borderline of the antimicrobial effect was determined at 0.1% viable cells. RESULTS. A 0.1% silver nanoparticles combined to tissue conditioner displayed minimal bactericidal effect against Staphylococcus aureus and Streptococcus mutans strains, a 0.5% for fungal strain. Control group did not show any microbial inhibitory effect and there were no statistical difference between 24 hrs and extended 72 hrs incubation time (P > .05). CONCLUSION. Within the limitation of this in vitro study, the results suggest that the tissue conditioner containing silver nanoparticles could be an antimicrobial dental material in denture plaque control. Further mechanical stability and toxicity studies are still required.